观察花粉粒萌发的几种方法

观察花粉粒萌发的几种方法

一、如何使花粉萌发

选用3%～30%蔗糖溶液、1×3

10-硼酸以及0.04%～0.08％硝酸钾

10-～5×3

的混合培养液，在温室（30℃±5℃）条件下，可使一些植物的花粉萌发，12h 后，花粉管的长度便很可观。萌发时间过长容易长菌丝，影响观察。萌发时间要与花粉生命力最强的时间相吻合，异花传粉植物在花冠盛开，大部分花药裂开后8h内生命力最强，而自花传粉植物以花药刚打开后8h内为最强。提前采花粉也可以，但要注意将花粉低温、干燥保存，花粉存放时间不要超过3天。

二、花粉粒萌发的培养与制片

花粉粒的培养

取10g葡萄糖或蔗糖溶解于100mL蒸馏水中，将此溶液倒入培养皿中，只需一薄层即可。取凤仙花，用镊子轻轻拨动花朵，使花粉散落在液面上，静置，切不可摇动。将上述材料小心放在25～30℃的条件下，静置培养，0.5h后，即可出现呈豆芽状的花粉粒萌发形状，1h后可大量出现。观察时，可直接把培养皿放在载物台上，用低倍物镜观察即可。

由于各种植物花粉粒萌发时所要求的条件各异，因此，实验时一定要多摸索，多作比较，才可能找到某种植物花粉粒萌发的最适条件。

固定

取出萌发的花粉粒放入固定液（甲醛液6～7mL，70%酒精100mL）中固定，可长期保存。

染色

(1)取出材料用蒸馏水漂洗；

(2)放入1%高锰酸钾溶液中2～3min；

(3)自来水漂洗；

(4)5%草酸溶液漂白1～3min；

(5)自来水冲洗15min；

(6)1%铬酸媒染20min，更长时间也可；

(7)自来水漂洗；

(8)用蒸馏水漂洗2～3次；

(9)1%结晶紫水溶液染4h左右；

(10)用I-KI溶液（碘1g，碘化钾1g，80%酒精100mL）处理1～2min，处理时间视由蓝色变成褐色为准；

(11)无水酒精脱水，漂洗；

(12)1%橘红G丁香油，对比染色2～4min；

(13)换两次无水酒精；

(14)二甲苯透明；

(15)中性树胶封片。

结果

细胞核蓝色。