离子交换色谱法-分析化学

7
第一节概 述
二、色谱法的分类 （一）按两相的分子聚集状态分类
液相色谱法（LC）：流动相为液体的色谱法。
气相色谱法（GC）：流动相为气体的色谱法。
超临界流体色谱法（SFC）：是以超临界流体作为流 动相的一种色谱法。
8
第一节概 述
（二）按操作形式分类 柱色谱法（CC）: 将固定相装于柱管内构成色谱 柱，色谱过程在色谱柱内进行的色谱法，称为柱 色谱。 平面色谱法 : 色谱过程在固定相构成的平面层内 进行的色谱法，称为平面色谱。
熟练掌握薄层色谱法、柱色谱法及纸色谱法的 操作技术，学会应用薄层色谱法、纸色谱法等对 物质进行分离和鉴定。
⊙
4
第一节概 述
第一节 概
述
色谱法（chromatography）是一种根据物质的物理或物 理化学性质不同而进行分离分析的方法。
5
第一节概 述
一、色谱法的发展概况 色谱法的创始人是俄国植物学家Tsweet。 20世纪30与40年代相继出现了薄层色谱和纸色谱，与 柱色谱一起统称为经典的液相色谱法，使色谱法成为 一门分离技术。 20世纪 50年代气相色谱的兴起，使色谱法在理论、仪 器以及分离与“在线”分析等方面得到长足发展，奠 定了现代色谱法的基础。
13
第二节色谱法的基本概念
色谱流出曲线和色谱峰区域宽度
14
第二节色谱法的基本概念
fs处于0.95～1.05之间为对称峰；小于 0.95者为前延 峰；大于1.05者为拖尾峰。 色谱流出曲线上，一个组分的色谱峰可用峰位、峰 高或峰面积及色谱峰的区域宽度等三项参数描述， 分别作为定性、定量及衡量柱效的依据。 峰高（h）：色谱峰顶至基线的垂直距离。 峰面积（A）：色谱峰与基线所包围的面积。
V 'R = VR-VM = t 'R · Fc
问
题
您能说出色谱法定性、定量以 及衡量柱效的依据吗？
20
第二节色谱法的基本概念
三、分配系数和容量因子 分配系数（distribution coefficient，K）
6
第一节概 述
20世纪 70年代高效液相色谱的崛起，弥补了气相色谱不 能直接用于分析难挥发、对热不稳定及高分子试样等方 面的不足，拓宽了色谱法的应用范围，成为色谱发展史 上又一个里程碑 。
20世纪 80年代是色谱迅猛发展的重要时期，相继出现了 液相色谱的各种联用技术 。
经过一个多世纪的发展，色谱法已成为重要的分离分析 方法。
18
第二节色谱法的基本概念
保留体积（VR） ：某组分在保留时间内流动相流经色 谱柱的体积 。 VR = tR· Fc 死体积（VM或V0）：由进样器至检测器的流路中未被 固定相占据的空间称为死体积。 VM = tM· Fc
死体积大，色谱峰扩展，色谱柱的柱效降低。
19
第二节色谱法的基本概念
调整保留体积（V 'R）：保留体积与死体积之差。
10
分析化学
第一节概 述
课堂互动
请您阐述色谱法的分类方法？
11
第一节概 述
三、色谱过程 色谱法具有相对运动的两相，其 一是固定不动的，称为固定相 （stationary phase）；而另一相 则是携带试样向前移动的，称为 流动相（mobile phase）。 色谱过程是物质在相对运动的固 定相和流动相之间达到分配平衡 的过程。例：顺式与反式偶氮苯 的色谱过程。
W = 4 或 W = 1.699 W1/2
16
第二节色谱法的基本概念
对称峰与不对称峰可用对称因子（fs）或拖尾因子（T） 来衡量。
W0.05h A B fs 2A 2A
对称因子计算示意图
17
第二节色谱法的基本概念
二、保留值 保留时间（tR）：进样开始到某组分色谱峰顶点的时 间间隔。 死时间（tM或t0）：分配系数为零的组分（即不被固定 相吸附或溶解的组分）的保留时间 。 调整保留时间（t 'R）：组分的保留时间与死时间之差。 亦可认为是组分在固定相中的滞留时间。 t 'R = tR - tM
2
◆知识要求
1．掌握色谱法的基本概念，吸附色谱法和分配色谱法的 分离机制，薄层色谱法的基本原理及其应用。
2．熟悉色谱法的分类，离子交换色谱法和空间排阻色谱 法的分离机制，各种经典的柱色谱法和纸色谱法基本 原理及其应用。
3．了解色谱法的由来，高效薄层色谱法及薄层扫描法的 基本原理及应用。 ⊙
3
◆能力要求
分析化学 第十一章 色谱法基本概念及经典液相色谱法
◆学习目的⊙
◆知识要求⊙
◆能力要求⊙
◆进入章节学习请点这里第1节 第2节 第3节 第4节
1
◆学习目的
通过学习色谱法基本概念、基本类型、分离机制以 及各种经典液相色谱法的固定相、流动相及其选择 等相关知识，了解色谱法的特点及其应用，会利用 吸附色谱、分配色谱等经典柱色谱法和薄层色谱法 对试样进行分离分析。为气相色谱法和高效液相色 谱法的学习奠定基础，同时也为学习药物分析、天 然药物化学、药物分离检测技术等专业课程奠定基 础。
9
第一节概 述
（三）按色谱过程的分离机制分类 吸附色谱法（adsorption chromatography，AC）
分配色谱法（distribution chromatography，DC）
离子交换色谱法 （ion exchange chromatography，IEC） 空间排阻色谱法 （steric exclusion chromatography，SEC）
顺式与反式偶氮苯的 色谱过程示意图 a. 加样 b. 洗脱 c. 继续洗脱 1.顺式偶氮苯 2. 反式偶氮苯
12
第二节色谱法的基本概念
第二节 色谱法的基本概念 一、色谱图 色谱流出曲线 （一）基线 ：是在操作条件下，仅有流动相通过检测系统 时所产生的信号曲线。 （二）色谱峰 ：色谱流出曲线上的突起部分。分为对称峰 与不对称峰，后者又分为前延峰和拖尾峰。
15
第二节色谱法的基本概念
色谱峰的区域宽度
色谱峰的区域宽度用于衡量色谱柱的柱效，区域宽度越 小，色谱柱的柱效越高。 标准差（）：正态分布曲线上两拐点间距离的一半。
半峰宽（W1/2）：峰高一半处的峰宽称为半峰宽。
W1/2 = 2.355 峰宽（W）：通过色谱峰两侧拐点作切线，在基线上
所截得的距离称为峰宽。