临床标本收集及保存
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临床样本的收集与保存
培养细胞样本
尿液样本环境中操作,保存RNA
时应尽量在无菌环境下
进行;采集不同样本时
应更换采集器材、防止
交叉污染。
4.采集顺序:标明“远
癌-近癌-癌灶”顺序,正
常组织(距癌灶边缘>
3cm或最远端)T 癌旁组织
(距离癌灶「边缘<
3cm)T癌组织采集后
样本置于液态液氮中应
使用内旋式冻存管,置
于气相液氮或-80 C冰箱
中可使用外旋式冻存
管。每份肿瘤样本应有
配对的血液样本。
采集容器应无菌、干
燥、洁净、具有防漏瓶
盖。
吸出培养皿培养液,用
PBS冲洗2次,力口入
胰蛋白酶37 C消化
1min。
除去胰蛋白酶,加入5ml
培养液混匀后取出细胞
液进行离心。除去上清
液后加入细胞保护剂
0.5ml,胎牛血清0.5ml
及DMSO 0.1-0.2ml 混匀
放入内旋式冻存管内,
进行程序降温。
干细胞保存加入特定细
胞培养液及高浓度胎牛
血清。
采集容器应无菌、干
燥、洁净、具有防漏瓶
盖。
进行毒理分析时应使用
高密度聚丙烯类容器。
检测特殊分析物时应
石蜡样本不小于
0.5*0.5*0.2cm 。
样本/福尔马林液比
例应》1/5。
依据科研需求确定样
本份数。
每皿细胞对应1个冻
存管保存。
传代细胞建议取处于
指数生长期、较大瓶
皿培养的80%-90%匚
合单层细胞。
收集培养液时,
1000g/min 离心
5-10min 。
加入胰蛋白酶后需放
入恒温箱37 C恒温
1mi n。
依据科研需求确定样
本份数。
尿液样本w 100ml。
分装5管,1ml/管。
尿液样本可处理为:
全尿。
样本置于液氮内转
运。
<-150 C长期保
存。
常温保存:w 4h
0-4 Cw 24h。
全尿w -80 C长期保
存.
细胞w -150 C长期保
存。