指纹图谱PPT课件
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
质量稳定性评价结果 方法学考察：重现性、稳定性、精密度
光谱法
光谱法主要包括红外光谱(IR)、紫外光谱(UV)和荧光光 谱(AFs)等3种方法。其中IR和UV是目前常用的2种用于中药指 纹图谱建立的方法。这2种方法对于成分简单的单昧药材具有 良好的鉴别效果，但由于其加和性，对于较为复杂的中药制剂 难以准确判断。
中药起药效的是有效物质群在发挥作用，不同的配伍将引起有效物质群 的该变。这种群体的变化可通过指纹图谱这种形式反映或表现出来。控 制好指纹图谱就可以获得良好的药效、稳定的质量和最佳的生物利用度。
中药指纹图谱的构建原则：
构建原则
系统性
特征性
稳定性 可操作性
中药指纹图谱的构建方法
中药化学指纹图谱
中药化学指纹图谱系指 采用光谱、色谱和其他 分析方法建立以表征中 药化学成分特征的指纹 图谱 光谱指纹图谱构建最常 用的是红外光谱（IR） 色谱最常用的是TLC、GC、 HPLC和CE
荧光光谱分析法 （AFS）
AFS的基本原理是蒸汽状态的原子因吸收能量而跃迁至高能态，并在这个过 程中发射出具有固定波长的荧光。
中草药因大多含有发光性组分而具有特征的荧光光谱。因此可利用发光标 记、被测物本身发光性质、分子组装、能量转移原理等分离鉴定药物有效成分。如 中药材的荧光鉴定、中药注射液等的药物鉴别、以及荧光分析及其连用技术用于测 定中药有效成分。
毛细管电泳仪及色谱图
HPLC高效液相色谱法
HPLC高效液相色谱法是在经典液相色谱的基础上发展而成的。HPLC利用了气相色谱的理论和 方法。其工作原理是依据中药中各成分在展开剂和固定相之间分配系数的不同进行分离。HPLC受样 品本身和外界干扰的影响较小，非常适合用于中药指纹图谱的构建。HPLC具有仪器化程度高、分析 速度快、色谱柱可反复使用等优点，目前已成为指纹图谱研究的主要方法，应用十分广泛。 高效液相色谱法有“三高一广一快”的特点： 〈1〉高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载 液加高压。
紫外光谱法（UV）
紫外光谱法，是测定物质分子在紫外光区吸收 光谱的分析方法。紫外吸收光谱是物质吸收紫外光 后，其价电子从低能级向高能级跃迁，产生吸收峰 形成的。并非所有的有机物质在紫外光区都有吸收， 只有那些具有共轭双键（π键）的化合物，其π电 子易于被激发发生跃迁，在紫外光区形成特征性的 吸收峰。
中药指纹图谱构建及 质量评价技术
姓名：曹瑞致 学号：2015051655 专业：中药学
中药指纹图谱的构建
中药指纹图谱的活性标识
中药指纹图谱的评价技术
中药指纹图谱研究中的关 键问题
制定特征中药指纹是质量控制的有效途径，是保证中药安全有效的中药环节
中药指纹图谱制定的两个步骤
初 中药材指纹图谱 级 提取物指纹图谱 阶 中药饮片指纹图谱 段 中成药指纹图谱
主要用于化合物结构的鉴定和含量的测定。由 于中药所含成分的不饱和度是有区别的，其紫外吸 收曲线形状、峰位、峰强均有所不同，因此可以用 来鉴别药材。但紫外光谱是电子光谱，形状变化不 大，有时不同的化合物有相似的图谱，专属性差。 故紫外光谱较少的应用于指纹图谱。
苯的紫外光谱
红外光谱法（IR）
在有机物分子中，组成化学键或官能团的原子 处于不断振动的状态，其振动频率与红外光的振动 频率相当。所以，用红外光照射有机物分子时，分 子中的化学键或官能团可发生振动吸收，不同的化 学键或官能团吸收频率不同，在红外光谱上将处于 不同位置，从而可获得分子中含有何种化学键或官 能团的信息。
色谱法
目前用于构建中药指纹图谱的色谱法主要有薄层色谱 法(TLC)、高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)、 高效毛细管电泳法(HPCE)和高速逆流色谱指纹图谱法 (HSCCC)等
薄层色谱法(TLC)
TLC是利用中药成分性质上的差异经过薄层分离后相对位移值的不同进行鉴别的 一种方法。该方法具有操作简单，分析速度快，成本低等优点，适用于不同种类药 材指纹图谱的构建。使用该方法只需要选取好薄层色谱展开剂，分离样品后即可获 得直观的图谱图像。但是由于薄层板质量的差异和色谱系统的开放性等外界因素的 影响，导致薄层色谱法的精确性和重现性比较差．所以现在薄层色谱法的应用较少。
对单一组分或混合物中各组分也可以进行定量 分析，尤其是对一些较难分离并在紫外区、可见区 找不到明显特征峰的样品，可以方便、迅速的完成 定量分析。
红外光谱的优点：1.指纹性 2.对样品的要求 较低 3.可操作性较强
红外光谱在中药质量控制方面的应用： 1.中药材质量的监控 2.中药材生产过程质量的监控 3.中成药质量的监控
高效薄层色谱法是指利用特殊材质的薄层板和展开技术来提高薄层色谱的灵敏 度和准确度，从而有效提高构建指纹图谱的效率。
薄层板
毛细管电泳（CE）
是色谱与电泳结合发展的产物。又称高效毛细管电泳（high performance capillary electrophoresis HPCE），是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电 场为驱动力的新型液相分离技术。高效毛细电泳法的工作原理是利用高压直流电场 推动中药样品在毛细管中运动，由于样品中各组分的淌度和分配行为的不同，导致 不同组分在毛细管中产生运动上的差异，从而实现分离的一种技术。 优点是分离效率高、快速、适用面宽，模式多样且易于变换，运行费用低，无环境 污染。特别适用于成分复杂的中药材和带电离子的分析。将其运用于中药的指纹图 谱的研究，已取得可观的成绩。但利用电泳机制在毛细管中进行分离使得该方法的 精确性和灵敏度较低，所以目前的使用并不是很广泛。
构建方法
中药生物指纹图谱
中药物指纹图谱包括中 药基因组学指纹图谱中药 蛋白质组学指纹图谱和中 药材DNA指纹图谱
构建指纹图谱的主要步骤
样品采集
方法建立
数据分析
样品评价
方法检验
指纹图谱构建程序
构效
对应关系
中药样品处理
预处理（提取分离）
测试样品
色谱分析
色谱图
计算机图谱解析、处理
指纹特征
指纹图谱
质量稳定性评价
初级中药指纹图谱即常见的中药质量控制方法，是以保证中药的品
质为目的。重点是测定方法的建立、有效成分和控制指标的确定
高 中药药理 级 药效 阶 药动 段 生物等效性
高级阶段的指纹图谱研究多采用多仪器连用，如GC-MS（气象色谱-质谱连用）、
LC-MS（液相色谱-质谱联用）等方式，获取多维信息数据，寻找最佳药效相关指纹图谱， 指导实践，从而保证药品最终品质
光谱法
光谱法主要包括红外光谱(IR)、紫外光谱(UV)和荧光光 谱(AFs)等3种方法。其中IR和UV是目前常用的2种用于中药指 纹图谱建立的方法。这2种方法对于成分简单的单昧药材具有 良好的鉴别效果，但由于其加和性，对于较为复杂的中药制剂 难以准确判断。
中药起药效的是有效物质群在发挥作用，不同的配伍将引起有效物质群 的该变。这种群体的变化可通过指纹图谱这种形式反映或表现出来。控 制好指纹图谱就可以获得良好的药效、稳定的质量和最佳的生物利用度。
中药指纹图谱的构建原则：
构建原则
系统性
特征性
稳定性 可操作性
中药指纹图谱的构建方法
中药化学指纹图谱
中药化学指纹图谱系指 采用光谱、色谱和其他 分析方法建立以表征中 药化学成分特征的指纹 图谱 光谱指纹图谱构建最常 用的是红外光谱（IR） 色谱最常用的是TLC、GC、 HPLC和CE
荧光光谱分析法 （AFS）
AFS的基本原理是蒸汽状态的原子因吸收能量而跃迁至高能态，并在这个过 程中发射出具有固定波长的荧光。
中草药因大多含有发光性组分而具有特征的荧光光谱。因此可利用发光标 记、被测物本身发光性质、分子组装、能量转移原理等分离鉴定药物有效成分。如 中药材的荧光鉴定、中药注射液等的药物鉴别、以及荧光分析及其连用技术用于测 定中药有效成分。
毛细管电泳仪及色谱图
HPLC高效液相色谱法
HPLC高效液相色谱法是在经典液相色谱的基础上发展而成的。HPLC利用了气相色谱的理论和 方法。其工作原理是依据中药中各成分在展开剂和固定相之间分配系数的不同进行分离。HPLC受样 品本身和外界干扰的影响较小，非常适合用于中药指纹图谱的构建。HPLC具有仪器化程度高、分析 速度快、色谱柱可反复使用等优点，目前已成为指纹图谱研究的主要方法，应用十分广泛。 高效液相色谱法有“三高一广一快”的特点： 〈1〉高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载 液加高压。
紫外光谱法（UV）
紫外光谱法，是测定物质分子在紫外光区吸收 光谱的分析方法。紫外吸收光谱是物质吸收紫外光 后，其价电子从低能级向高能级跃迁，产生吸收峰 形成的。并非所有的有机物质在紫外光区都有吸收， 只有那些具有共轭双键（π键）的化合物，其π电 子易于被激发发生跃迁，在紫外光区形成特征性的 吸收峰。
中药指纹图谱构建及 质量评价技术
姓名：曹瑞致 学号：2015051655 专业：中药学
中药指纹图谱的构建
中药指纹图谱的活性标识
中药指纹图谱的评价技术
中药指纹图谱研究中的关 键问题
制定特征中药指纹是质量控制的有效途径，是保证中药安全有效的中药环节
中药指纹图谱制定的两个步骤
初 中药材指纹图谱 级 提取物指纹图谱 阶 中药饮片指纹图谱 段 中成药指纹图谱
主要用于化合物结构的鉴定和含量的测定。由 于中药所含成分的不饱和度是有区别的，其紫外吸 收曲线形状、峰位、峰强均有所不同，因此可以用 来鉴别药材。但紫外光谱是电子光谱，形状变化不 大，有时不同的化合物有相似的图谱，专属性差。 故紫外光谱较少的应用于指纹图谱。
苯的紫外光谱
红外光谱法（IR）
在有机物分子中，组成化学键或官能团的原子 处于不断振动的状态，其振动频率与红外光的振动 频率相当。所以，用红外光照射有机物分子时，分 子中的化学键或官能团可发生振动吸收，不同的化 学键或官能团吸收频率不同，在红外光谱上将处于 不同位置，从而可获得分子中含有何种化学键或官 能团的信息。
色谱法
目前用于构建中药指纹图谱的色谱法主要有薄层色谱 法(TLC)、高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)、 高效毛细管电泳法(HPCE)和高速逆流色谱指纹图谱法 (HSCCC)等
薄层色谱法(TLC)
TLC是利用中药成分性质上的差异经过薄层分离后相对位移值的不同进行鉴别的 一种方法。该方法具有操作简单，分析速度快，成本低等优点，适用于不同种类药 材指纹图谱的构建。使用该方法只需要选取好薄层色谱展开剂，分离样品后即可获 得直观的图谱图像。但是由于薄层板质量的差异和色谱系统的开放性等外界因素的 影响，导致薄层色谱法的精确性和重现性比较差．所以现在薄层色谱法的应用较少。
对单一组分或混合物中各组分也可以进行定量 分析，尤其是对一些较难分离并在紫外区、可见区 找不到明显特征峰的样品，可以方便、迅速的完成 定量分析。
红外光谱的优点：1.指纹性 2.对样品的要求 较低 3.可操作性较强
红外光谱在中药质量控制方面的应用： 1.中药材质量的监控 2.中药材生产过程质量的监控 3.中成药质量的监控
高效薄层色谱法是指利用特殊材质的薄层板和展开技术来提高薄层色谱的灵敏 度和准确度，从而有效提高构建指纹图谱的效率。
薄层板
毛细管电泳（CE）
是色谱与电泳结合发展的产物。又称高效毛细管电泳（high performance capillary electrophoresis HPCE），是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电 场为驱动力的新型液相分离技术。高效毛细电泳法的工作原理是利用高压直流电场 推动中药样品在毛细管中运动，由于样品中各组分的淌度和分配行为的不同，导致 不同组分在毛细管中产生运动上的差异，从而实现分离的一种技术。 优点是分离效率高、快速、适用面宽，模式多样且易于变换，运行费用低，无环境 污染。特别适用于成分复杂的中药材和带电离子的分析。将其运用于中药的指纹图 谱的研究，已取得可观的成绩。但利用电泳机制在毛细管中进行分离使得该方法的 精确性和灵敏度较低，所以目前的使用并不是很广泛。
构建方法
中药生物指纹图谱
中药物指纹图谱包括中 药基因组学指纹图谱中药 蛋白质组学指纹图谱和中 药材DNA指纹图谱
构建指纹图谱的主要步骤
样品采集
方法建立
数据分析
样品评价
方法检验
指纹图谱构建程序
构效
对应关系
中药样品处理
预处理（提取分离）
测试样品
色谱分析
色谱图
计算机图谱解析、处理
指纹特征
指纹图谱
质量稳定性评价
初级中药指纹图谱即常见的中药质量控制方法，是以保证中药的品
质为目的。重点是测定方法的建立、有效成分和控制指标的确定
高 中药药理 级 药效 阶 药动 段 生物等效性
高级阶段的指纹图谱研究多采用多仪器连用，如GC-MS（气象色谱-质谱连用）、
LC-MS（液相色谱-质谱联用）等方式，获取多维信息数据，寻找最佳药效相关指纹图谱， 指导实践，从而保证药品最终品质