实验七 细菌鞭毛染色和运动性观察(半固体穿刺法)
鞭毛染色法及活细菌活动性的观察
（二）运动性的观察
悬滴法
（1取洁净的盖玻片，取一滴蒸馏水。
（2）加菌液：用接种环取1-2环菌液置于水滴里。
（3）盖玻片反转，放在玻环上。（4）镜检：先用 低倍镜找到悬滴边缘，并将液滴移至视野中心， 然后用高倍镜观察。观察时光线要调得暗一些。 用悬滴法分别观察、普通变形杆菌和金黄色葡萄球 菌的运动性。细菌的运动有一定的方向，并可直 线、波浪式或翻滚运动。
五、实验报告
绘图表示鞭毛细菌的形态特征，并用箭头表示其 运动方向。
六、思考题
1、鞭毛染色法准确鉴定细菌是否具有鞭毛，要注意哪些 细节？
、
三、实验器材
1、菌种： 普通变形杆菌 （Proteus vulgaris）、 金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus） 2、染色液：硝酸银染色液， 3、其他：显微镜，载玻片，盖玻片，），擦镜纸，吸水纸， 记号笔，镊子，接种环等。
四、实验方法
（一）鞭毛染色（硝酸银染色法）
1.清洗玻片：选择光滑无裂痕的玻片，置洗衣粉过滤液中（洗 衣粉煮沸后用滤纸过滤，以除去粗颗粒），煮沸20min。取 出用清水冲洗，沥干水后，置95%乙醇中浸泡，用时取出在 火焰上烧去酒精。
采用鞭毛染色法虽能观察到鞭毛的形态、着生位 置和数目，但此法既费时又麻烦。如果仅须了解 某菌是否有鞭毛，可采用悬滴法或压滴法直接在 光学显微镜下检查活细菌是否具有运动能力，以 此来判断细菌是否有鞭毛。此法较快速、简便。
悬滴法就是将菌液滴加在洁净的盖玻片中央，在 其周边涂上凡士林，然后将它倒盖在有ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ槽的载 玻片中央，即可放置在普通光学显微镜下观察。 压滴法是将菌液滴在普通的载玻片上，然后盖上 盖玻片，置显微镜下观察。
细菌鞭毛染色及运动性观察
细菌鞭毛染色及活菌运动性观察【摘要】本实验以铜绿假单胞菌和枯草芽孢杆菌为实验菌种，先使用压滴法制片，之后用光学显微镜的油镜观察细菌的活体运动。
然后，使用鞭毛染色法（用硝酸银染液A液和B液进行染色）对其染色，之后用光学显微镜的油镜观察细菌鞭毛的形态；虽然最后并没有在显微镜下观察到染色后的鞭毛，但在实验中已大致掌握相关实验操作。
【关键词】铜绿假单胞菌；枯草芽孢杆菌；鞭毛染色法；压滴法【前言】鞭毛是生长在某些细菌体表的长丝状，波曲型的蛋白质附属物，具有运动功能。
鞭毛的有无、数量及着生方式也是细菌分类的重要指标。
鞭毛直径一般为10~20nm，只有用电子显微镜才能观察到。
但可以使用鞭毛染色法，使之能用普通光学显微镜观察到。
因此在本实验中，要观察细菌鞭毛形态，就要使用鞭毛染色法。
本实验使用染液的是硝酸银染液A液和B液。
而观察细菌的运动性时要使用压滴法。
本实验选用的的菌种是具周生鞭毛的枯草芽孢杆菌和具端生鞭毛的的铜绿假单胞菌，均可使用两种方法进行观察。
本实验报告先介绍了本次实验的实验材料与方法，然后是对实验的结果与分析进行描述，最后是总结性的小结部分。
1.实验目的1.1学习并掌握鞭毛染色法并了解鞭毛的形态特征1.2巩固显微镜操作技术及无菌操作技术1.3学习压滴法观察细菌运动性（活细胞）2实验原理2．1细菌鞭毛染色法的基本原理简单染色法适用于一般的微生物菌体的染色，而某些微生物具有一些特殊结构，如鞭毛，对它们进行观察之前需要进行有针对性的染色。
鞭毛是细菌的纤细丝状的运动器。
鞭毛的有无、数量及着生方式也是细菌分类的重要指标。
鞭毛直径一般为10~30nm，只有用电镜才可以直接观察到。
若要用普通光学显微镜观察，必须使用鞭毛染色法。
首先用媒染剂处理，使媒染剂附着在鞭毛上使其加粗，然后用碱性复红（Gray氏染色法）、碱性复品红（Leifson 氏染色法）、硝酸银（West氏染色法）或结晶紫（Difco氏染色法）进行染色。
细菌鞭毛染色及运动性观察
细菌鞭毛染色及运动性观察摘要：实验包括用压滴法制片对细菌的运动性观察；用硝酸银染色法对细菌鞭毛进行染色及观察。
学习用压滴法观察细菌的运动性，掌握鞭毛染色法，观察细菌鞭毛的形态特征关键词：压滴法运动性硝酸银染色法鞭毛前言：鞭毛是细菌的纤细丝状运动“器官”。
鞭毛的有无，数量及着生方式也是细菌分类的重要指标。
它是原核生物实现其趋性的最有效方式，具鞭毛的细菌在液体中借助鞭毛的旋转，使菌体能定向的泳动。
鞭毛的直径一般20—30nm，只有用电镜才能直接观察到。
若用普通光学显微镜观察，必须使用鞭毛染色法。
首先用媒染剂（如单宁酸或明矾钾）处理，使媒染剂附着在鞭毛上使其加粗，然后用适合的方法进行染色。
1材料和方法1.1材料1.1.1菌种枯草芽孢杆菌铜绿假单胞菌1.1.2 溶液和试剂无菌水稀释美兰95%乙醇硝酸银鞭毛染液香柏油二甲苯1.1.3 仪器和其他用品普通光学显微镜擦镜纸载玻片酒精灯双层瓶接种环滴管试管夹1.2方法1.2.1压滴法（1）制片：取一个干净的载玻片，中央滴加一滴无菌水，无菌条件下取适量菌种进行涂片。
加一滴稀释美兰与之混合均匀，将盖玻片一边与菌液接触，慢慢放下盖玻片。
（2）镜检：迅速用油镜镜检。
1.2.2鞭毛染色（1）载玻片的准备：将干净的载玻片置于95 ％乙醇中，用时取出在火焰上烧去酒精及可能残留的油迹。
（2）制片：在载玻片的一端滴一滴蒸馏水,用接种环挑取少许备用的菌种（注意不要挑上培养基）,在载玻片的水滴中轻沾几下。
将载玻片稍倾斜,使菌液随水滴缓慢流到另一端,然后平放在空气中自然干燥。
（3）染色：涂片干燥后滴加A液染5分钟,用蒸馏水冲洗,用B液冲去残水。
洗净A液滴加B液覆盖1min （其间可将玻片在酒精灯上稍加热）然后用蒸馏水冲洗,自然干燥。
（4）镜检：油镜镜检。
2结果与分析2.1 实验结果压滴法观察细菌运动性时可以看到菌体不规则快速运动，有些为转动。
鞭毛染色的两个片子油镜镜检时，找到一处菌体聚集的地方。
实验七 细菌鞭毛染色和运动性观察(半固体穿刺法)
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实验七、细菌的鞭毛染色和运动性观察
问题与建议
对实验内容不明确 多进行基本技能的训练及实验指导 启发式教学（荚膜/芽孢染色为例） 鼓励交流与分享（成功/失败） 按要求准确操作是实验成功的关键
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实验七、细菌的鞭毛染色和运动性观察
实验七、细菌鞭毛染色和运 动性观察（半固体 穿刺法）
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暗视野显微镜或相差显微镜观察
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实验七、细菌的鞭毛染色和运动性观察
➢了解细菌鞭毛染色的应用
鞭毛的有无和着生方式具有十分重要的分类学意义
单端鞭毛 端生丛毛
两端生鞭毛 精品课周件 生鞭毛
实验七、细菌的鞭毛染色和运动性观察
三、实验材料
1、菌种：枯草杆菌（Bacillus subtilis）（连续活
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实验七、细菌的鞭毛染色和运动性观察
（二）银染法
1、菌悬液的制备。沿试管壁流入直至快接近培养基 斜面的顶部，静置10min，同时可双手搓动试管。 2、制片：用移液枪取约100ul菌液于载玻片的一端， 顺着倾斜的玻片流下，自然干燥。 3、染色：滴加过滤的染液Ａ覆盖8分钟，用Ｂ液冲 洗去Ａ液，再用Ｂ液覆盖染色，缓缓加热至冒气， 维持约0．5秒(加热时注意勿使出现干涸面) 在菌体 多的部位可见深褐色至黑色(共约2分钟) ，停止加 热，用水冲净，干后镜检。 4、镜检，菌体及鞭毛为深褐色到黑色。
化3-4代，每10-12小时接种一次），金黄色葡萄
球菌（Staphyloccocus aureus）
2、材料与试剂：载玻片（非常洁净）等 清洗酸泡水洗蒸溜水泡酒精泡
染液A（单宁酸，FeCl3，福尔马林， NaOH）
染液B（AgNO3） 3、培养基：半固体培养基（0.5%琼脂）
细菌运动力观察实验报告
实验七细菌运动力观察[实验目的]1、了解检查细菌运动力的方法。
2、掌握悬滴法检测细菌的运动力。
[实验原理]鞭毛是细菌的一种特殊结构，是细菌运动器官。
细菌是否具有鞭毛是细菌分类鉴定中的重要特征之一。
采用鞭毛染色法虽能观察到鞭毛的形态、着生位置和数目，但此法较复杂烦琐。
采用悬滴法或水封片法（压滴法）直接在光学显微镜下检查活菌是否具有运动能力来判断细菌是否具有鞭毛则快速、简便。
具有运动能力的细菌，可以独立运动，在显微镜下观察时，细菌的真正运动(自动运动)表现为能离开原来位置，不断改变方向的自由地游动。
水的分子运动(布朗运动)也能见于细菌个体，但只能使其在原地摆动，不能远离原来的位置移动。
这种情况，都是外力作用的结果，不是细菌本身的真正运动。
检查细菌的运动力，应用幼年培养物，最好刚从温箱中取出，并在温暖的环境下从速进行。
此外，这种方法也可用来检查微生物对各种化学物质的趋化性。
[实验材料]1、菌种2003Y1，2003Y2(为本实验室分离的菌种)的肉汤培养物2、仪器及其他物品显微镜、接种环、酒精灯、凹玻片、盖玻片、蒸馏水等[实验内容]1、悬滴检查法采用不染色活菌标本来检查其运动能力。
a.不染色标本片的制备取洁净盖玻片一张，用接种环各勾取蒸馏水1-2环于盖玻片四个角，灭菌接种环，再勾取2003Y1或2003Y2幼龄肉汤培养物1-2环于盖玻片中央；另取一干净凹玻片，凹面朝下对角扣于盖玻片上，再将玻片翻转，使菌液液滴向下，即可进行镜检。
若为固体培养物，则需在盖玻片中央先滴上一小滴生理盐水或透明肉汤，再用接种环取待检固体培养物少量(不要过多)，混匀于液滴内即可。
盖玻片四角的蒸馏水起到粘附（使凹玻片和盖玻片紧密吸附）、防止液滴干燥的目的。
b. 镜检因细菌无色透明，与背景无明显的色差，故在观察时视野要稍暗。
10倍镜对光后调整光线使视野变暗。
放上悬滴标本片，先用低倍镜找到液滴边缘（因表面张力的作用，液滴边缘有大量的菌体，便于观察），然后再转换高倍镜对焦观察，一般不必使用油镜观察，必须用时，注意防止压坏盖玻片。
水产微生物实验—细菌特殊构造的染色法及活细菌运动性的观察(教案).docx
实验六细菌特殊构造的染色法及活细菌运动性的观察一、基础知识荚膜是包围在细菌细胞外的一层粘液状或胶质状物质，其成分为多糖、糖蛋白或多肽。
由于荚膜与染料的亲和力弱、不易着色；而口町溶于水，易在用水冲洗时被除去。
所以通常用衬托染色法染色，使菌体和苗景着色，而荚膜不着色，在菌体周围形成一透明圈。
由于荚膜含水量高，制片时通常不用热固定，以免变形影响观察。
实验中介绍3种荚膜染色法，其屮湿墨水法较简便、并适用于各种有荚膜的细菌。
芽抱又叫内生抱了，是某些细菌生长到一定阶段在菌体内形成的休眠体，通常呈圆形或椭圆形。
细菌能否形成芽抱以及芽抱的形状、芽砲在芽抱囊内的位置、芽砲囊是否膨人等特征是鉴定细菌的依据之一。
由于芽抱壁厚、透性低、不易着色，当用石炭酸复红、结晶紫等进行单染色时，菌体和芽他囊着色，而芽施囊內的芽他不着色或仅显很淡的颜色，游离的芽他呈淡红或淡蓝紫色的圆或椭圆形的圈。
为了使芽紀着色便于观察，可用芽沦染色法。
芽沦染色法的基本原理是：用着色力强的染色剂孔雀绿或石炭酸复红，在加热条件下染色，使染料不仅进入菌体也可进入芽他内，进人菌体的染料经水洗后被脱色，而芽沦一经着色难以被水洗脱，当用对比度大的复染剂染色后，芽他仍保留初染剂的颜色，1佃菌体和芽沦囊被染成复染剂的颜色，使芽他和菌体更易于区分。
鞭毛是细菌的运动“器官”细菌是否具有鞭毛，以及鞭毛着生的位置和数目是细菌的一项重要形态特征。
细菌的鞭毛很纤细，其宜径通常为().()1—().021 xm,所以，除了很少数能形成鞭毛束(由许多根鞭毛构成)的细菌可以用相并显微镜肓接观察到鞭毛束的存在外，一般细菌的鞭毛均不能用光学显微镜直接观察到，1何只能用电子显微镜观察。
要用普通光学显微镜观察细菌的鞭毛，必须用鞭毛染色法。
鞭毛染色的基本原理，是在染色前先用媒染剂处理，使它沉积在鞭毛上，使鞭毛直径加粗，然后再进行染色。
鞭毛染色方法很多，本实验介绍硝酸银染色法和改良的Leifson氏染色法，前一种方法更容易掌握，但染色剂配制后保存期较短。
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本文部分内容来自网络整理，本司不为其真实性负责，如有异议或侵权请及时联系，本司将立即删除！== 本文为word格式，下载后可方便编辑和修改！ ==鞭毛染色实验报告篇一：鞭毛染色实验报告年月日山东大学实验报告 201X 年10月26 日姓名：年级同组科目微生物题目观察鞭毛染色和运动201X01140018一．实验目的??? 学习并掌握鞭毛染色法并了解鞭毛的形态特征巩固显微镜操作技术及无菌操作技术学习压滴法观察细菌运动性（活细胞）二．实验原理? 细菌鞭毛染色法的基本原理简单染色法适用于一般的微生物菌体的染色，而某些微生物具有一些特殊结构，如鞭毛，对它们进行观察之前需要进行有针对性的染色。
鞭毛是细菌的纤细丝状的运动器。
鞭毛的有无、数量及着生方式也是细菌分类的重要指标。
鞭毛直径一般为10~30nm，只有用电镜才可以直接观察到。
若要用普通光学显微镜观察，必须使用鞭毛染色法。
首先用媒染剂处理，使媒染剂附着在鞭毛上使其加粗，然后用碱性复红（Gray氏染色法）、碱性复品红（Leifson氏染色法）、硝酸银（West氏染色法）或结晶紫（Difco氏染色法）进行染色。
? 压滴法观察活菌运动的基本原理鞭毛的功能相当于船的螺浆，在水中可以高速旋转从而推动菌体前行，因此水体环境才是鞭毛细菌自由驰骋的天地。
鞭毛的旋转速度是非常快的，每秒钟旋转两百到一千多转，比一般的电动机要快得多。
鞭毛的高速旋转是由其附着于菌体上的基体旋转带动的，基体实际上就是鞭毛的基部，它由一个中轴套上两个或四个环构成，镶嵌固定在细菌的体表（细胞膜和细胞壁）中，在科学家的眼中，基体简直就是一台精巧的纳米机械—分子马达，但这个马达并不是靠电流驱动，而是用伴随着细胞膜两侧质子梯度的消失产生的生物能量ATP来驱动，鞭毛马达还可以转向（从反时针旋转变为顺时针旋转）从而使菌体发生翻滚进而改变细菌的运动方向，事实上细菌在游动时也并不是单纯地一直朝前游，而是伴随着不时的随机翻滚转向，但从表观上看仍表现为细菌的前行。
细菌鞭毛染色及运动性鉴定
细菌鞭毛染色及运动性鉴定摘要：用稀释美蓝对菌体进行染色后在油镜下对菌体的运动性进行观察、鉴定和描述。
鞭毛是细菌的运动器官，用硝酸银染液A液B液对菌体的鞭毛进行染色，并在光学显微镜下对菌体鞭毛的形态特征和着生部位进行观察。
关键词硝酸银染色法压滴法微生物制片镜检前言鞭毛是细菌的运动器官，具有鞭毛的不同的细菌其鞭毛的粗细、长短、着生部位不同，是微生物的一项重要形态特征。
除了少数细菌的鞭毛能够较轻易的观察出来外，一般其他的细菌由于鞭毛微小且透明，一般不能在光学显微镜直接观察到。
故要用光学显微镜对细菌的鞭毛进行观察时，要对细菌的鞭毛进行染色处理使鞭毛直径加粗并与背景色形成对比。
通过硝酸银法对细菌鞭毛进行染色观察，能区分细菌的类型，对细菌的结构进行初步了解，在细菌的分类及鉴定上具有一定的重要意义。
材料与方法1.1 材料1.1.1标准菌株枯草芽孢杆菌铜绿假单胞菌1.1．2溶液和试剂蒸馏水 95%乙醇香柏油 0.01%美蓝硝酸银染液A液B液1.1.3仪器及其他用品载玻片盖玻片镊子光学显微镜胶头滴管酒精灯接种环1.2方法1.2.1压滴法观察细菌的运动性1）涂片1．将载玻片用自然水洗干净后，用纸吸除多余水分。
2．在载玻片滴取半滴蒸馏水到载玻片上。
3．在酒精灯形成的无菌区域内用接种环在铜绿假单胞菌的琼脂斜面上小心地（防止因动作过大而使鞭毛从菌体上脱落）挑取适量的菌苔。
4．将沾有菌苔的接种环置于载玻片中的滴有蒸馏水的区域进行涂抹，使菌悬浮在蒸馏水中。
2）染色在涂有菌体的部分滴加一滴稀释美蓝使其覆盖整个悬浮液。
3）盖盖玻片1．用镊子取出一片盖玻片并将盖玻片放在菌体悬浮液的左侧使盖玻片恰好与悬浮液相接触。
2．将盖玻片用镊子轻轻向左侧移动同时慢慢地盖上盖玻片（注意不要让空气进入片中）。
4）快速镜检在观察时应先用高倍镜观察，看不清楚时再用低倍镜观察。
在观察时应采用暗视野，并要以较快的速度对菌体进行观察以免菌体过早死亡。
主要介绍油镜的使用方法：1．将染色好的载玻片置于显微镜下的载物台上，将对准载物台油镜，调节粗调将载物台合适的高度。
细菌的运动性观察
细菌的运动性观察（一）实验原理细菌是否具有鞭毛是细菌分类鉴定的重要特征之一。
采用鞭毛染色法虽能观察到鞭毛的形态、着生位置和数目，但此法既费时又麻烦。
如果仅须了解某菌是否有鞭毛，可采用悬滴法或水封片法（即压滴法）直接在光学显微镜下检查活细菌是否具有运动能力，以此来判断细菌是否有鞭毛。
此法较快速、简便。
悬滴法就是将菌液滴加在洁净的盖玻片中央，在其周边涂上凡士林，然后将它倒盖在有凹槽的载玻片中央，即可放置在普通光学显微镜下观察。
水封片法是将菌液滴在普通的载玻片上，然后盖上盖玻片，置显微镜下观察。
大多数球菌不生鞭毛，杆菌中有的有鞭毛有的无鞭毛，弧菌和螺菌几乎都有鞭毛。
有鞭毛的细菌在幼龄时具有较强的运动力，衰老的细胞鞭毛易脱落，故观察时宜选用幼龄菌体。
1.制备菌液：在幼龄菌斜面上，滴加3-4mL无菌水，制成轻度混浊的菌悬液。
2.涂凡士林：取洁净无油的盖玻片1块，在其四周涂少量的凡士林。
3.滴加菌液：加1滴菌液于盖玻片的中央，并用记号笔在菌液的边缘做一记号，以便在显微镜观察时，易于寻找菌液的位置。
4.盖凹玻片将凹玻片的凹槽对准盖玻片中央的菌液，并轻轻地盖在盖玻片上，使两者粘在一起，然后翻转凹玻片，使菌液正好悬在凹槽的中央，再用铅笔或火柴棒轻压盖玻片，使玻片四周边缘闭合，以防菌液干燥。
若制水封片，在载玻片上滴加一滴菌液，盖上盖玻片后即可置显微镜下观察。
5.镜检先用低倍镜找到标记，再稍微移动凹玻片即可找到菌滴的边缘，然后将菌液移到视野中央换高倍镜观察。
由于菌体是透明的，镜检时可适当缩小光圈或降低聚光器以增大反差，便于观察。
镜检时要仔细辨别是细菌的运动还是分子运动（即布朗运动），前者在视野下可见细菌自一处游动至他处，而后者仅在原处左右摆动。
细菌的运动速度依菌种不同而异，应仔细观察。
结果：有鞭毛的枯草杆菌和假单胞菌可看到活跃的运动，而无鞭毛的金黄色葡萄球菌不运动。
文案编辑词条B 添加义项?文案，原指放书的桌子，后来指在桌子上写字的人。
鞭毛染色
姓名：朴薇学号：200900140091 年级班级：09生科三班组别：周三2组同组者：李雪彤、刘雯雯、潘红芳、娄峰时间：2010年10月20日实验题目细菌鞭毛染色及运动性观察实验目的用鞭毛染色法对苏云金芽孢杆菌和铜绿假单胞菌进行鞭毛染色，观察鞭毛的着生位置、数量、形态特征，并用压滴法观察活菌的运动情况。
同时巩固显微镜操作技术和无菌操作技术。
实验原理一些引起人类严重疾病的细菌具有鞭毛。
鞭毛的数量和着生方式，形态特征是细菌分类鉴定地重要依据。
因此，细菌鞭毛的染色观察在临床医学上是鉴定致病菌的重要手段之一。
因此学习并掌握鞭毛染色法并了解鞭毛的形态特征是微生物学者必须经受的训练。
鞭毛是细菌的纤细丝状运动器官，鞭毛直径一般为10~30nm，只有用电镜才能直接观察到，若要用普通光学显微镜，必须使用鞭毛染色法。
细菌中的螺旋菌、部分杆菌及少数球菌具有鞭毛，有鞭毛的细菌在幼龄时具有较强的运动能力。
衰老细胞的鞭毛容易脱落，故观察运动性或做鞭毛染色时宜选用幼龄菌。
首先用媒染剂（如单宁酸或明矾钾）处理，使媒染剂附着在鞭毛上使其加粗，然后用碱性复红（Gray氏染色法）、碱性复品红（Leifson氏染色法）、硝酸银（West氏染色法）或结晶紫（Difco氏染色法）进行染色。
实验材料菌种枯草芽孢杆菌1~2d牛肉膏蛋白胨琼脂斜面培养物，铜绿假单胞菌牛肉膏蛋白胨培养物。
溶液和试剂0.01%美兰水溶液，蒸馏水，硝酸银鞭毛染液，95%乙醇仪器和其它用品酒精灯，载玻片，显微镜，双层瓶（内装香柏油和二甲苯），擦镜纸，接种环，镊子，滴管，无菌水等。
方法及步骤细菌运动的观察a．载玻片准备将载玻片用去污粉洗净（注意：切勿用试管刷刷洗，以免划损玻片），然后用清水充分洗净，再置于95%乙醇中浸泡（至少5min），使用时取出在火焰上烧去乙醇及可能残留的油迹。
b．涂片取一载玻片，平放于实验台上，在中央区域滴一滴无菌水；无菌操作用接种环由铜绿假单胞杆菌及枯草芽孢杆菌牛肉膏蛋白胨琼脂斜面培养基上挑取菌体，在无菌水中轻轻涂1~2下，至水滴混浊。
半固体接种实验报告
实验日期： 2023年X月X日实验目的：1. 掌握半固体培养基的使用方法。
2. 观察细菌在半固体培养基中的生长现象，包括细菌的动力和扩散情况。
3. 学习细菌分离和鉴定的基本原理。
实验原理：半固体培养基是一种含有低浓度琼脂的培养基，其凝固程度介于固体培养基和液体培养基之间。
在半固体培养基中，细菌的鞭毛可以表现出其动力，通过观察细菌在培养基中的生长情况，可以判断细菌是否具有鞭毛，以及鞭毛的数量和运动方式。
实验材料：1. 菌种：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌2. 半固体培养基3. 接种环4. 高压蒸汽灭菌器5. 移液器6. 紫外线灯7. 细菌计数器实验步骤：1. 将半固体培养基分装到无菌试管中，每管5ml，放入高压蒸汽灭菌器中灭菌，121℃灭菌15分钟。
2. 灭菌后取出试管，待培养基冷却至约45℃时，用无菌移液器吸取一定量的菌液，分别接种到金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌的试管中。
3. 将接种后的试管置于37℃恒温培养箱中培养24小时。
4. 观察并记录细菌在半固体培养基中的生长情况，包括生长速度、扩散范围、穿刺线等。
实验结果：1. 金黄色葡萄球菌在半固体培养基中生长迅速，形成明显的扩散圈，穿刺线清晰。
2. 大肠杆菌在半固体培养基中生长较慢，扩散范围较小，穿刺线模糊。
3. 肺炎克雷伯菌在半固体培养基中生长缓慢，几乎无扩散，穿刺线明显。
实验分析：1. 金黄色葡萄球菌具有鞭毛，能够在半固体培养基中快速扩散，形成明显的扩散圈。
2. 大肠杆菌鞭毛数量较少，运动能力较弱，因此在半固体培养基中扩散范围较小，穿刺线模糊。
3. 肺炎克雷伯菌无鞭毛，无法在半固体培养基中扩散，穿刺线明显。
实验结论：通过半固体接种实验，我们成功地观察了金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯菌在半固体培养基中的生长现象。
实验结果表明，半固体培养基是一种有效的细菌分离和鉴定工具，可以用于判断细菌是否具有鞭毛以及鞭毛的数量和运动方式。
半固体细菌动力实验报告
本实验旨在通过观察细菌在半固体培养基中的生长现象，判断细菌是否具有动力，即细菌是否能够进行运动。
通过实验，我们可以了解细菌的鞭毛存在与否，从而对细菌的分类和研究提供依据。
二、实验原理细菌的动力主要依赖于鞭毛，鞭毛是细菌的一种附属结构，负责细菌的运动。
有鞭毛的细菌在半固体培养基中可以沿着穿刺线向四周扩散，形成羽毛状或云雾状的浑浊生长；而无鞭毛的细菌则只能沿着穿刺线呈明显的线状生长。
三、实验材料与试剂1. 半固体培养基：牛肉膏蛋白胨培养基，加入0.3%～0.5%琼脂。
2. 实验菌株：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌等。
3. 实验器材：无菌接种针、无菌棉签、无菌试管、无菌培养皿、酒精灯、火焰喷灯等。
四、实验方法1. 将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌分别接种于无菌试管中，37℃培养24小时。
2. 将培养好的菌株分别用无菌棉签涂抹在半固体培养基的表面，形成穿刺接种。
3. 将接种好的半固体培养基置于37℃培养箱中培养24小时。
4. 观察并记录细菌在半固体培养基中的生长现象。
五、实验结果与分析1. 金黄色葡萄球菌：在半固体培养基中，穿刺线两侧出现羽毛状或云雾状浑浊生长，说明金黄色葡萄球菌具有动力，为动力阳性。
2. 大肠杆菌：在半固体培养基中，穿刺线两侧出现明显的线状生长，说明大肠杆菌不具有动力，为动力阴性。
3. 枯草芽孢杆菌：在半固体培养基中，穿刺线两侧出现羽毛状或云雾状浑浊生长，说明枯草芽孢杆菌具有动力，为动力阳性。
1. 半固体培养基是观察细菌动力的理想培养基，其特点是既有一定的固体支撑，又具有一定的流动性，有利于细菌的生长和运动。
2. 在实验过程中，应严格控制无菌操作，避免污染。
3. 本实验结果表明，金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌具有动力，而大肠杆菌不具有动力。
这为细菌的分类和研究提供了依据。
七、实验结论通过本实验，我们成功观察了细菌在半固体培养基中的动力现象，并了解了细菌鞭毛的存在与否。
实验结果表明，金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌具有动力，而大肠杆菌不具有动力。
细菌的两种鞭毛染色法
细菌的两种鞭毛染色法（一）实验目的：学习细菌的鞭毛染色法（二）实验原理：细菌的鞭毛极细，直径一般为10—20nm，只有用电子显微镜才能观察到。
但是，如采用特殊的染色法，则在普通光学显微镜下也能看到它。
鞭毛染色方法很多，但其基本原理相同，即在染色前先用媒染剂处理，让它沉积在鞭毛上，使鞭毛直径加粗，然后再进行染色。
常用的媒染剂由丹宁酸和氯化高铁或钾明矾等配制而成。
现推荐以下两种染色法。
（三）实验器材1.活材料：培养12-16h的水稻黄单胞菌（Xanthomonas oryzae），粘质赛氏杆菌（Serratia marcescens）或假单细胞菌（Pseudomonas sp.）斜面菌种。
2.染色液和试剂：硝酸银染色液、Leifson染色液、香柏油、二甲苯。
3.器材：载玻片、擦镜纸、吸水纸、记号笔、玻片搁架、镊子、接种环，显微镜。
（四）实验方法1.镀银法染色（1）清洗玻片选择光滑无裂痕的玻片，最好选用新的。
为了避免玻片相互重叠，应将玻片插在专用金属架上，然后将玻片置洗衣粉过滤液中（洗衣粉煮沸后用滤纸过滤，以除去粗颗粒），煮沸20min。
取出稍冷后用自来水冲洗、晾干，再放入浓洗液中浸泡5—6天，使用前取出玻片，用自来水冲去残酸，再用蒸馏水洗。
将水沥干后，放入95%乙醇中脱水。
（2）菌液的制备及制片：菌龄较老的细菌容易失落鞭毛，所以在染色前应将待染细菌在新配制的牛肉膏蛋白胨培养基斜面上（培养基表面湿润，斜面基部含有冷凝水）连续移接3-5代，以增强细菌的运动力。
最后一代菌种放恒温箱中培养12—16h。
然后，用接种环挑取斜面与冷凝水交接处的菌液数环，移至盛有1—2mL无菌水的试管中，使菌液呈轻度混浊。
将该试管放在37℃恒温箱中静置10min（放置时间不宜太长，否则鞭毛会脱落），让幼龄菌的鞭毛松展开。
然后，吸取少量菌液滴在洁净玻片的一端，立即将玻片倾斜，使菌液缓慢地流向另一端，用吸水纸吸去多余的菌液。
涂片放空气中自然干燥。
半固体穿刺培养实验报告
一、实验目的1. 熟悉半固体穿刺培养的方法和操作步骤；2. 观察细菌在半固体培养基中的生长现象，了解细菌的运动性；3. 掌握细菌动力试验的基本原理和方法。
二、实验原理半固体培养基是一种含有少量凝固剂的培养基，其物理状态介于液体和固体之间。
细菌在半固体培养基中生长时，鞭毛菌能表现出明显的运动性，而无鞭毛菌则无运动性。
通过观察细菌在半固体培养基中的生长现象，可以判断细菌是否具有鞭毛，进而判断细菌的运动性。
三、实验材料1. 菌种：大肠杆菌、肺炎克雷伯菌等；2. 培养基：半固体培养基（琼脂浓度为0.3%）、普通琼脂平板；3. 工具：接种环、接种针、酒精灯、无菌操作台等。
四、实验方法1. 准备工作：将半固体培养基在灭菌锅中煮沸15分钟，待冷却至50℃左右时，倒入无菌试管中，每管10ml，放入培养箱中冷却凝固。
2. 接种：将接种环在火焰上灼烧灭菌，待冷却后，从培养皿中取出适量菌液，涂布于普通琼脂平板上，制成菌落。
3. 穿刺：用接种针将菌落挑起，沿半固体培养基的斜面进行穿刺，注意深度一致。
4. 培养：将接种好的试管放入培养箱中，培养24小时。
5. 观察与记录：观察半固体培养基中细菌的生长现象，记录有鞭毛菌和无鞭毛菌的生长情况。
五、实验结果与分析1. 有鞭毛菌的生长现象：在半固体培养基中，有鞭毛菌表现出明显的运动性，沿穿刺线向四周扩散，形成羽毛状或云雾状浑浊生长。
2. 无鞭毛菌的生长现象：在半固体培养基中，无鞭毛菌无运动性，仅沿穿刺线呈明显的线状生长。
根据实验结果，可以判断实验中的大肠杆菌和肺炎克雷伯菌均具有鞭毛，属于运动性菌。
六、实验讨论1. 半固体穿刺培养实验是一种常用的微生物实验方法，可以观察细菌的运动性，有助于鉴定细菌种类。
2. 实验过程中，应注意无菌操作，避免污染。
3. 在实验过程中，应控制好培养条件，如温度、时间等，以确保实验结果的准确性。
4. 实验结果与分析相结合，可以更好地理解微生物的生长规律。
2013实验四细菌鞭毛观察法及细菌运动性观察 (2)
三、实验材料及用品
1、菌种：苏云金芽孢杆菌（半固体培养基平 板）、白色葡萄球菌（斜面） 2、染色剂：A液（媒染剂）、 B液（硝酸银鞭毛染色液）。 3、其他：载玻片、盖玻片、无菌水、 显微镜、双层瓶、镜头纸、接种环等。
四、操作步骤
1、鞭毛染色：
1）制片：在新制载玻片上抹一薄薄的水层，在菌 苔边缘取菌，轻轻在水层中轻轻点几下；待其自然 干燥； 2）A液染色：3--5分钟； 3）缓流水洗：让水流平缓流下，浸洗多次，将残 留的A液洗尽； 4）B液染色：30--60秒、微热 5）缓流水洗，自然干燥； 6）镜检（油镜）：菌体深褐色，鞭毛淡褐色。
实验四、细菌鞭ห้องสมุดไป่ตู้染色法 及运动性观察
一、目的要求：
1、学习并初步掌握鞭毛染色法，观察 细菌鞭毛的形态特征。 2、学习用压滴法和悬滴法观察细菌的 运动性。
二、基本原理
鞭毛是细菌的运动“器官”，细菌是否具有鞭毛，以及鞭
毛 着生的位置和数目是细菌的一项重要的形态特征。细菌的鞭毛 直径通常为0.01-0.02微米，为超显微结构，不能用光学显微 镜直接观察，必须对鞭毛染色。
2、运动性的观察 （1）、压滴法 a 、制片：滴无菌水，取菌，盖上盖玻片； b 、镜检（高倍） （2）、悬滴法 a 、加菌液于盖玻片，盖于凹玻片上； b 、镜检（高倍）
五、实验报告
1、结果：你所观察的2种细菌是否都具有鞭毛？ 是否都能 运动？鞭毛----运动有无相关性？绘图 表示有鞭毛细菌的形态特征 2、思考题：用鞭毛染色法准确鉴定一株细菌是 否具有鞭毛， 要注意那些环节？
细菌鞭毛染色及活细菌的运动性观察
细菌鞭毛染色及活细菌的运动性观察摘要：生长在某些细菌表面的纤细丝状运动器官，称为鞭毛。
采用硝酸银染色法对枯草杆菌和铜绿假单胞菌进行鞭毛染色，在光学显微镜下观察菌体形态和菌毛的长短、数量、着生位置，得到清晰的结果。
采用压滴法观察活细菌的运动性，对其运动情况有初步了解。
关键词：鞭毛染色硝酸银染色法压滴法活细菌1前言1.1实验目的1.学习并掌握鞭毛染色法，观察鞭毛的形态特征。
2.学习用压滴法观察活细菌的运动性。
1.2实验原理鞭毛是细菌的纤细丝状运动“器官”。
鞭毛的有无、数量及着生方式也是细菌分类的重要指标。
鞭毛直径一般为10~30nm,只有用电镜才能直接观察到。
若要用普通光学显微镜观察，必须使用鞭毛染色法。
鞭毛染色的基本原理是在染色前先用媒染剂处理，使媒染剂附着在鞭毛上使其加粗，然后用碱性复红（Gray氏染色法）、碱性复品红（Leifson氏染色法）、硝酸银（West氏染色法）或结晶紫（Difo氏染色法）进行染色。
本实验采用的是硝酸银染色法。
在显微镜下观察细菌的运动性，也可以初步判断细菌是否有鞭毛。
细菌运动性的观察可用压滴法和悬滴法。
观察时，要适当减弱光强度以增加反差，若光线太强．细菌和周围的液体难以区分。
2材料与方法2.1实验器材2.1.1菌种枯草芽孢杆菌牛肉膏蛋白胨琼脂斜面培养物，铜绿假单胞菌牛肉膏蛋白胨琼脂斜面培养物。
2.1.2溶液和试剂硝酸银鞭毛染液，0.01%美兰水溶液，香柏油，二甲苯，体积分数95%的乙醇。
2.1.3仪器和其他用品酒精灯，载玻片，盖玻片，显微镜，擦镜纸，接种环，镊子，记号笔，滴管和无菌水等。
2.2实验步骤3结果与分析3.1压滴法用压滴法观察枯草杆菌的运动性，盖上盖玻片立即观察时，可以看到浅蓝色的细菌细胞。
盖玻片下里液体流动较明显，菌体随水流运动，运动方向较统一且呈直线状。
待液体稍蒸发，盖玻片下液体充分但不流动时观察，细菌的运动朝不同的方向，运动过程中可转弯；有些细菌在原地左右摆动，应为布朗运动。
实验细菌鞭毛染色及其运动的观察
在显微镜下观察活细菌的运动性，也可以初步判断细菌 是否有鞭毛。细菌运动性的观察可用压滴法和悬滴法。
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三、器材
1、菌种 大肠杆菌、四联球菌12～18h液 体培养物，变形杆菌6～8h斜面培养物；
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图 2 运动型细菌
特殊聚光器实现斜射照明，给样品照明的光线不直接穿过物镜，
而经样品反射或折射后进入物镜，使样品与背景差别大，可以清
楚看到透明微小颗粒。
用于：生活细菌运动性观察。
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细菌鞭毛的着生位置
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七、预习
细菌的芽孢染色 细菌的荚膜染色
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五、实验报告
1、绘图示细菌的鞭毛染色形态图。 2、说明所观察各菌是否都有鞭毛？有鞭毛的
细菌作何运动，无鞭毛的细菌又如何 运动？
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六、思考题
1、试设计一实验，如何鉴别某种细菌是 否能运动，是否有鞭毛，观察其鞭毛的 着生的位置。
（要求使用详细介绍流程步骤）
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2、染色剂 鞭毛染色液 3、仪器或其他用具 光学显微镜、酒精 灯
载玻片、盖玻片、凹载玻片、无菌水等。
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四、操作步骤
1、鞭毛染色
制片 染色液A3～5min 充分水洗 Nhomakorabea染色液B 2min
水洗、自然干燥、镜检。
2、细菌运动性的观察
鞭毛染色
3. 实验设备及器材：恒温培养箱；恒温干燥箱； 高压蒸汽灭菌锅；显微镜；酒精灯；接种环；滴 瓶；试剂瓶；双层瓶；镊子；载玻片；φ90mm培 养皿；500ml标本缸；15×150试管；火柴（或打 火机）；吸水纸；镜头纸；棉花；
版权所有 未经作者同意 请勿使用
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实验七 鞭毛染色技术、活细菌的运动性 菌落形态
影响鞭毛染色的因素较多。主要有： 1.菌种的活化程度：实验前，应将菌种用斜
面底部有少量冷凝水的新鲜培养基斜面转接 2～3次，以使菌种活化，处于良好的生理状 态，其鞭毛的生长才正常； 2.染色液的新鲜程度：用于鞭毛染色的染色 液，应随用随配。搁置一段时间的染色液的 染色效果较差； 3.载玻片的洁净程度：用于鞭毛染色的载玻 片应无油污、无划痕，洁净干燥。
实验前应将菌种用斜面底部有少量冷凝水的新鲜培养基斜面转接23次以使菌种活化处于良好的生理状态其鞭毛的生长才正常
实验七 鞭毛染色技术、活细菌的运动性 菌落形态
一、实验背景及目的：
鞭毛是某些细菌生长在细胞外的长丝状蛋白质 附属物。
通过鞭毛的高速旋转，可使有鞭毛的细菌呈现 运动性，是鞭毛的主要功能。鞭毛也是有鞭毛 的细菌实现其趋性的最有效方式。
实验七 鞭毛染色技术、活细菌的运动性 菌落形态
5.染色处理： ①滴加鞭毛染色A液于载玻片上，染色处理
4～6分钟，蒸馏水充分洗净A液； ②用B液冲去残留的水，再加B液于玻片上，
微火加热至微冒汽，保持0.5～1分钟，注意 勿使B液干涸，应随时补加B液，蒸馏水清 洗，自然干燥； 6.镜检：油镜。菌体深褐色，鞭毛很纤细， 呈浅褐色；可多调整几个视野，仔细观察。
实验七 鞭毛染色技术、活细菌的运动性 菌落形态
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1、绘图表示所观察P到ow的e细r B菌ar菌体及鞭毛形
态。
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2、简述鞭毛染色的基本原理，鞭毛染色应 掌握哪些环节？注意些什么问题？
3、记录观察到的细菌运动性结果（下次补 记）。
4、讨论实验成败的原因。
开放设计性实验的准备
1. 分组 （每一排为一组，5-6人，推选1人为组长，负责本组协调，每个
Staphyloccocus aureus） 中国专业PPT设计交流论坛 2、材料与试剂：载玻片（非常洁净）等
清洗酸泡水洗蒸溜水泡酒精泡 染液A（单宁酸，FeCl3，福尔马林，
NaOH） 染液B（AgNO3） 3、培养基：半固体培养基（0.5%琼脂）
四、实验方法
（一）半固体穿刺法观察运动性（无菌操作
1、菌悬液的制备。沿试管壁流入直至快接近培养基
斜面的顶部，静置10mPionw，e同r 时Ba可r 双手搓动试管。
2、制片：用移液枪取约中国1专0业P0PuT设l计菌交流液论坛于载玻片的一端， 顺着倾斜的玻片流下，自然干燥。
3、染色：滴加过滤的染液Ａ覆盖8分钟，用Ｂ液冲 洗去Ａ液，再用Ｂ液覆盖染色，缓缓加热至冒气， 维持约0．5秒(加热时注意勿使出现干涸面) 在菌体 多的部位可见深褐色至黑色(共约2分钟) ，停止加热，
直径10～20nm
观察和判断细菌鞭毛的方法
电子显微镜直接观察
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根据培养特征判断：半中国固专业体PPT穿设计刺交流、论坛菌落（菌苔）形态 （在半固体培养基中呈扩散性生长）
光学显微镜下观察：特殊的鞭毛染色 在染色前先用媒染剂处理，使它沉积在鞭毛上，使鞭毛直径
变粗，然后再进行染色。
暗视野显微镜或相差显微镜观察
）
Power Bar
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1、试管壁上标明BS及学号，用直的接种针
火焰灼烧柄及针挑取一点枯草芽孢杆菌
沿轴心穿刺接种于1周）后观
察生长情况（下次课补记结果）。
2、每排找一个人按同样的方式穿刺接种金黄 色葡萄球菌，并标明SA。
（二）银染法
实验前准备工作
1.菌株的连续活化 Power Bar 中国专业PPT设计交流论坛
2.染色液当天配制 3.无菌液（试管或三角瓶中）
的准备
部分同学的实验结果实例
水洗
钾细菌的荚膜
Power Bar
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不水洗
部分同学的实验结果实例
枯草杆菌的芽孢
番红染色 中P国o专w业PPeT设r计交B孔流a论r坛雀绿+番红染色
➢了解细菌鞭毛染色的应用
鞭毛的有无和着生方式具有十分重要的分类学意义
Power Bar
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单端鞭毛
两端生鞭毛
端生丛毛
周生鞭毛
三、实验材料
1、菌种：枯草杆菌（Bacillus subtilis）（连续活化3-
4代，每10-12小时接P种ow一e次r B）a，r 金黄色葡萄球菌（
用水冲净，干后镜检。 4、镜检，菌体及鞭毛为深褐色到黑色。
五、注意事项
1、穿刺接种时针P及ow穿er刺Ba过r 程要直。 中国专业PPT设计交流论坛
2、用于鞭毛染色的菌活力要强，操作时 动作要柔和，因为鞭毛易脱落。
六、视频
Power Bar
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细菌鞭毛染色法
七、作业与讨论
➢学习并掌握P细ow菌er的B鞭ar毛染色法
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➢观察细菌鞭毛的形态特征和着生方式
➢观察细菌是否运动来间接证明是否有鞭毛
➢了解细菌鞭毛染色的应用
二、实验原理
细菌的鞭毛极细，直径一般为
10～20nm；长度为15～20μmP。ower Bar
中国专业PPT设计交流论长坛度15～20μm。
问题与建议
对实验内容不Po明we确r Bar
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多进行基本技能的训练及实验指导
启发式教学（荚膜/芽孢染色为例）
鼓励交流与分享（成功/失败）
按要求准确操作是实验成功的关键
实验七、细菌鞭毛染色和运 Power Bar 中国专业PPT设计交流论坛
动性观察（半固体 穿刺法）
一、实验目的
Power Bar 人都要参与，在完成的实验设计报告中列出所有组员的学号，姓名） 2. 选题 （选感兴趣中国的专小业P实PT验设计，交查流论资坛料，讨论可行性） 3. 写实验设计（要求详细具体） 实验目的（可简单） 实验原理 实验材料（包括菌种、试剂、仪器设备） 方法与步骤 可能的结果 可能存在的问题 4. 两星期后交实验设计报告，并讨论实验可能性。该实验设计内容将计算
为一次平时成绩。
设计性实验的格式
实验题目
Power Bar 成员的姓名，学号，组长及联系方式
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实验目的 实验原理 实验材料（应当是小组成员自己能够采集或制备的） 实验设备 试剂的配制 操作步骤（步骤要详细） 讨论（包括可能的结果和可能存在的问题） 参考文献