实验七 细菌鞭毛染色和运动性观察(半固体穿刺法)
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实验前准备工作
1.菌株的连续活化 Power Bar 中国专业PPT设计交流论坛
2.染色液当天配制 3.无菌液（试管或三角瓶中）
的准备
部分同学的实验结果实例
水洗
钾细菌的荚膜
Power Bar
中国专业PPT设计交流论坛
不水洗
部分同学的实验结果实例
枯草杆菌的芽孢
番红染色 中P国o专w业PPeT设r计交B孔流a论r坛雀绿+番红染色
Power Bar 人都要参与，在完成的实验设计报告中列出所有组员的学号，姓名） 2. 选题 （选感兴趣中国的专小业P实PT验设计，交查流论资坛料，讨论可行性） 3. 写实验设计（要求详细具体） 实验目的（可简单） 实验原理 实验材料（包括菌种、试剂、仪器设备） 方法与步骤 可能的结果 可能存在的问题 4. 两星期后交实验设计报告，并讨论实验可能性。该实验设计内容将计算
1、绘图表示所观察P到ow的e细r B菌ar菌体及鞭毛形
态。
中国专业PPT设计交流论坛
2、简述鞭毛染色的基本原理，鞭毛染色应 掌握哪些环节？注意些什么问题？
3、记录观察到的细菌运动性结果（下次补 记）。
4、讨论实验成败的原因。
开放设计性实验的准备
1. 分组 （每一排为一组，5-6人，推选1人为组长，负责本组协调，每个
直径10～20nm
观察和判断细菌鞭毛的方法
电子显微镜直接观察
Power Bar
根据培养特征判断：半中国固专业体PPT穿设计刺交流、论坛菌落（菌苔）形态 （在半固体培养基中呈扩散性生长）
光学显微镜下观察：特殊的鞭毛染色 在染色前先用媒染剂处理，使它沉积在鞭毛上，使鞭毛直径
变粗，然后再进行染色。
暗视野显微镜或相差显微镜观察
为一次平时成绩。
设计性实验的格式
实验题目
Power Bar 成员的姓名，学号，组长及联系方式
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实验目的 实验原理 实验材料（应当是小组成员自己能够采集或制备的） 实验设备 试剂的配制 操作步骤（步骤要详细） 讨论（包括可能的结果和可能存在的问题） 参考文献
Staphyloccocus aureus） 中国专业PPT设计交流论坛 2、材料与试剂：载玻片（非常洁净）等
清洗酸泡水洗蒸溜水泡酒精泡 染液A（单宁酸，FeCl3，福尔马林，
NaOH） 染液B（AgNO3） 3、培养基：半固体培养基（0.5%琼脂）
四、实验方法
（一）半固体穿刺法观察运动性（无菌操作
用水冲净，ห้องสมุดไป่ตู้后镜检。 4、镜检，菌体及鞭毛为深褐色到黑色。
五、注意事项
1、穿刺接种时针P及ow穿er刺Ba过r 程要直。 中国专业PPT设计交流论坛
2、用于鞭毛染色的菌活力要强，操作时 动作要柔和，因为鞭毛易脱落。
六、视频
Power Bar
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细菌鞭毛染色法
七、作业与讨论
1、菌悬液的制备。沿试管壁流入直至快接近培养基
斜面的顶部，静置10mPionw，e同r 时Ba可r 双手搓动试管。
2、制片：用移液枪取约中国1专0业P0PuT设l计菌交流液论坛于载玻片的一端， 顺着倾斜的玻片流下，自然干燥。
3、染色：滴加过滤的染液Ａ覆盖8分钟，用Ｂ液冲 洗去Ａ液，再用Ｂ液覆盖染色，缓缓加热至冒气， 维持约0．5秒(加热时注意勿使出现干涸面) 在菌体 多的部位可见深褐色至黑色(共约2分钟) ，停止加热，
）
Power Bar
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1、试管壁上标明BS及学号，用直的接种针
火焰灼烧柄及针挑取一点枯草芽孢杆菌
沿轴心穿刺接种于半固体培养基中，深
34厘米37℃培养2448小时（1周）后观
察生长情况（下次课补记结果）。
2、每排找一个人按同样的方式穿刺接种金黄 色葡萄球菌，并标明SA。
（二）银染法
➢了解细菌鞭毛染色的应用
鞭毛的有无和着生方式具有十分重要的分类学意义
Power Bar
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单端鞭毛
两端生鞭毛
端生丛毛
周生鞭毛
三、实验材料
1、菌种：枯草杆菌（Bacillus subtilis）（连续活化3-
4代，每10-12小时接P种ow一e次r B）a，r 金黄色葡萄球菌（
➢学习并掌握P细ow菌er的B鞭ar毛染色法
中国专业PPT设计交流论坛
➢观察细菌鞭毛的形态特征和着生方式
➢观察细菌是否运动来间接证明是否有鞭毛
➢了解细菌鞭毛染色的应用
二、实验原理
细菌的鞭毛极细，直径一般为
10～20nm；长度为15～20μmP。ower Bar
中国专业PPT设计交流论长坛度15～20μm。
问题与建议
对实验内容不Po明we确r Bar
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多进行基本技能的训练及实验指导
启发式教学（荚膜/芽孢染色为例）
鼓励交流与分享（成功/失败）
按要求准确操作是实验成功的关键
实验七、细菌鞭毛染色和运 Power Bar 中国专业PPT设计交流论坛
动性观察（半固体 穿刺法）
一、实验目的
1.菌株的连续活化 Power Bar 中国专业PPT设计交流论坛
2.染色液当天配制 3.无菌液（试管或三角瓶中）
的准备
部分同学的实验结果实例
水洗
钾细菌的荚膜
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不水洗
部分同学的实验结果实例
枯草杆菌的芽孢
番红染色 中P国o专w业PPeT设r计交B孔流a论r坛雀绿+番红染色
Power Bar 人都要参与，在完成的实验设计报告中列出所有组员的学号，姓名） 2. 选题 （选感兴趣中国的专小业P实PT验设计，交查流论资坛料，讨论可行性） 3. 写实验设计（要求详细具体） 实验目的（可简单） 实验原理 实验材料（包括菌种、试剂、仪器设备） 方法与步骤 可能的结果 可能存在的问题 4. 两星期后交实验设计报告，并讨论实验可能性。该实验设计内容将计算
1、绘图表示所观察P到ow的e细r B菌ar菌体及鞭毛形
态。
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2、简述鞭毛染色的基本原理，鞭毛染色应 掌握哪些环节？注意些什么问题？
3、记录观察到的细菌运动性结果（下次补 记）。
4、讨论实验成败的原因。
开放设计性实验的准备
1. 分组 （每一排为一组，5-6人，推选1人为组长，负责本组协调，每个
直径10～20nm
观察和判断细菌鞭毛的方法
电子显微镜直接观察
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根据培养特征判断：半中国固专业体PPT穿设计刺交流、论坛菌落（菌苔）形态 （在半固体培养基中呈扩散性生长）
光学显微镜下观察：特殊的鞭毛染色 在染色前先用媒染剂处理，使它沉积在鞭毛上，使鞭毛直径
变粗，然后再进行染色。
暗视野显微镜或相差显微镜观察
为一次平时成绩。
设计性实验的格式
实验题目
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实验目的 实验原理 实验材料（应当是小组成员自己能够采集或制备的） 实验设备 试剂的配制 操作步骤（步骤要详细） 讨论（包括可能的结果和可能存在的问题） 参考文献
Staphyloccocus aureus） 中国专业PPT设计交流论坛 2、材料与试剂：载玻片（非常洁净）等
清洗酸泡水洗蒸溜水泡酒精泡 染液A（单宁酸，FeCl3，福尔马林，
NaOH） 染液B（AgNO3） 3、培养基：半固体培养基（0.5%琼脂）
四、实验方法
（一）半固体穿刺法观察运动性（无菌操作
用水冲净，ห้องสมุดไป่ตู้后镜检。 4、镜检，菌体及鞭毛为深褐色到黑色。
五、注意事项
1、穿刺接种时针P及ow穿er刺Ba过r 程要直。 中国专业PPT设计交流论坛
2、用于鞭毛染色的菌活力要强，操作时 动作要柔和，因为鞭毛易脱落。
六、视频
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细菌鞭毛染色法
七、作业与讨论
1、菌悬液的制备。沿试管壁流入直至快接近培养基
斜面的顶部，静置10mPionw，e同r 时Ba可r 双手搓动试管。
2、制片：用移液枪取约中国1专0业P0PuT设l计菌交流液论坛于载玻片的一端， 顺着倾斜的玻片流下，自然干燥。
3、染色：滴加过滤的染液Ａ覆盖8分钟，用Ｂ液冲 洗去Ａ液，再用Ｂ液覆盖染色，缓缓加热至冒气， 维持约0．5秒(加热时注意勿使出现干涸面) 在菌体 多的部位可见深褐色至黑色(共约2分钟) ，停止加热，
）
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1、试管壁上标明BS及学号，用直的接种针
火焰灼烧柄及针挑取一点枯草芽孢杆菌
沿轴心穿刺接种于半固体培养基中，深
34厘米37℃培养2448小时（1周）后观
察生长情况（下次课补记结果）。
2、每排找一个人按同样的方式穿刺接种金黄 色葡萄球菌，并标明SA。
（二）银染法
➢了解细菌鞭毛染色的应用
鞭毛的有无和着生方式具有十分重要的分类学意义
Power Bar
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单端鞭毛
两端生鞭毛
端生丛毛
周生鞭毛
三、实验材料
1、菌种：枯草杆菌（Bacillus subtilis）（连续活化3-
4代，每10-12小时接P种ow一e次r B）a，r 金黄色葡萄球菌（
➢学习并掌握P细ow菌er的B鞭ar毛染色法
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➢观察细菌鞭毛的形态特征和着生方式
➢观察细菌是否运动来间接证明是否有鞭毛
➢了解细菌鞭毛染色的应用
二、实验原理
细菌的鞭毛极细，直径一般为
10～20nm；长度为15～20μmP。ower Bar
中国专业PPT设计交流论长坛度15～20μm。
问题与建议
对实验内容不Po明we确r Bar
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多进行基本技能的训练及实验指导
启发式教学（荚膜/芽孢染色为例）
鼓励交流与分享（成功/失败）
按要求准确操作是实验成功的关键
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动性观察（半固体 穿刺法）
一、实验目的