种子发芽率
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植物生物学实验
种子发芽率的快速测定
目的要求
掌握快速测定种子发芽率的 氯化三苯四氮唑法、溴麝香 草酚蓝法和红墨水染色法。
了解以上三种方法的优缺点。
实验原理
种子发芽率是指在最适宜条 件下，在规定天数内，发芽的种 子占供试种子的百分数。它是决 定种子品质和实用价值大小的主 要依据，与播种时的用种量直接 有关。
凡有生命活力的种子胚部， 在呼吸作用过程中都有氧化还 原反应，而无生命活力的种胚 则无此反应。当TTC渗入种胚的 活细胞内并被还原时，便由无 色的TTC变为红色的TTF。 ——氯化三苯四氮唑法
凡活细胞必有呼吸作用，吸收 空气中的O2，放出CO2。CO2溶于水而 成为H2CO3，H2CO3解离成H+和HCO3-， 使得种胚周围环境的酸度增加，可 用溴麝香草酚蓝(BTB)来测定酸度的 改变。BTB的变色范围为pH6.0-7.6， 酸性呈黄色，碱性呈蓝色，中间经 过绿色(变色点为pH7.1)。 ——溴麝香草酚蓝法
凡生活细胞的原生质膜具 有选择性吸收物质的能力，而 死的种胚细胞原生质膜丧失这 种能力，于是染料便能进入死 细胞而染色。 ——红墨水染色法
试剂和器材
材料：玉米、小麦种子。 试剂：0.5%TTC溶液，1%BTB琼脂 凝胶，红墨水。 器材：恒温箱，烧杯，培养皿， 镊子，刀片，天平，漏斗， 滤纸。
பைடு நூலகம்
操作方法
1.浸种 将待测种子在30-35℃温水中浸种。 2.显色 取吸胀的种子100粒，用刀片沿种子 胚的中心线纵切为二半，将其中的 一半培养皿中，加入适量的0.5%TTC， 以覆盖种子为度。然后置于30℃恒 温箱中0.5-1小时。观察结果，凡胚 被染为红色的是活种子。
将另外一半纵切开的种子置于另 一培养皿中，加入5%红墨水，以 淹没种子为度，染色10-15分钟。 染色后倒去红墨水，用水冲洗多 次，至冲洗液无色为止。凡种胚 不着色或着色很浅的为活种子； 凡种胚与胚乳着色程度相同的为 死种子。
另取吸胀的种子100粒，将其整齐 地埋于准备好的琼脂凝胶培养皿中， 种子平放，间隔距离至少1cm。然 后将培养皿置于30-35 ℃下培养24小时，在蓝色背景下观察，如种 胚附近呈现较深黄色晕圈是活种子， 否则是死种子。 3.计算 计算活种子的百分率(种子发芽率)。
思考题
1.为什么在要将待测种子放在温 水中浸泡一段时间？ 2.用三种方法快速测定种子发芽 率所得到的结果一致吗，比较 这三种方法的优缺点。
种子发芽率的快速测定
目的要求
掌握快速测定种子发芽率的 氯化三苯四氮唑法、溴麝香 草酚蓝法和红墨水染色法。
了解以上三种方法的优缺点。
实验原理
种子发芽率是指在最适宜条 件下，在规定天数内，发芽的种 子占供试种子的百分数。它是决 定种子品质和实用价值大小的主 要依据，与播种时的用种量直接 有关。
凡有生命活力的种子胚部， 在呼吸作用过程中都有氧化还 原反应，而无生命活力的种胚 则无此反应。当TTC渗入种胚的 活细胞内并被还原时，便由无 色的TTC变为红色的TTF。 ——氯化三苯四氮唑法
凡活细胞必有呼吸作用，吸收 空气中的O2，放出CO2。CO2溶于水而 成为H2CO3，H2CO3解离成H+和HCO3-， 使得种胚周围环境的酸度增加，可 用溴麝香草酚蓝(BTB)来测定酸度的 改变。BTB的变色范围为pH6.0-7.6， 酸性呈黄色，碱性呈蓝色，中间经 过绿色(变色点为pH7.1)。 ——溴麝香草酚蓝法
凡生活细胞的原生质膜具 有选择性吸收物质的能力，而 死的种胚细胞原生质膜丧失这 种能力，于是染料便能进入死 细胞而染色。 ——红墨水染色法
试剂和器材
材料：玉米、小麦种子。 试剂：0.5%TTC溶液，1%BTB琼脂 凝胶，红墨水。 器材：恒温箱，烧杯，培养皿， 镊子，刀片，天平，漏斗， 滤纸。
பைடு நூலகம்
操作方法
1.浸种 将待测种子在30-35℃温水中浸种。 2.显色 取吸胀的种子100粒，用刀片沿种子 胚的中心线纵切为二半，将其中的 一半培养皿中，加入适量的0.5%TTC， 以覆盖种子为度。然后置于30℃恒 温箱中0.5-1小时。观察结果，凡胚 被染为红色的是活种子。
将另外一半纵切开的种子置于另 一培养皿中，加入5%红墨水，以 淹没种子为度，染色10-15分钟。 染色后倒去红墨水，用水冲洗多 次，至冲洗液无色为止。凡种胚 不着色或着色很浅的为活种子； 凡种胚与胚乳着色程度相同的为 死种子。
另取吸胀的种子100粒，将其整齐 地埋于准备好的琼脂凝胶培养皿中， 种子平放，间隔距离至少1cm。然 后将培养皿置于30-35 ℃下培养24小时，在蓝色背景下观察，如种 胚附近呈现较深黄色晕圈是活种子， 否则是死种子。 3.计算 计算活种子的百分率(种子发芽率)。
思考题
1.为什么在要将待测种子放在温 水中浸泡一段时间？ 2.用三种方法快速测定种子发芽 率所得到的结果一致吗，比较 这三种方法的优缺点。