微生物的实验室培养 ppt课件
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微生物的实验室培养
精品资料
一、基础知识：
（一）培养基 培养基（培养液）是由人工方法配制而成
的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。
1.培养基的类型和用途 （1）按物理状态来分：培养基可分为固体培 养基、液体培养基和半固体培养基。其中固 体培养基用于菌种分离、鉴定等。 （2）按功能来分，可分为选择培养基和鉴别 培养基。 （3）按成分来分，可分为天然培养基和合成 培养基。
微生物的实验室培养
碳源、氮源、生长因子的比较
来源
常用原料
功能
CO2、NaHCO3、糖 碳源 类、脂肪酸、花生粉 糖类
饼、石油等
构成细胞物质 和一些代谢产 物，有些还是 异养做生物的 主要能源物质
氮源
N2、NH3、铵盐、硝 酸盐、尿素、牛肉膏
和蛋白胨等
铵盐、硝酸 盐等
合成蛋白质、 核酸以及含氮 的代谢产物
• 细菌pH为：6.5-7.5； • 放线菌pH为：7.5-8.5； • 真菌pH为：5.0-6.0。
微生物的实验室培养
3、培养基的营养构成
不管哪种培养基，一般都含有水、 碳源、和氮源、无机盐等营养物质，另 外还需要满足微生物生长对pH、特殊 营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必 需，而自身不能合成的化合物,如维生 素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧 气、二氧化碳、渗透压等的要求。
(2)灭菌的方法：
1、灼烧灭菌 接种环、接种针、 试管口 2、干热灭菌： 160-170 ℃下加 热1-2h。
3、高压蒸气灭菌： 100kPa、121 ℃ 下维持15-30min.
微生物的实验室培养
最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌，它可以
杀灭所有的生物，包括最耐热的某些微生物的休
眠体，同时可以基本保持培养基的营养成分不被
微生物的实验室培养
培养基的种类 在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要 的例根如微据，生微在物生培的物养生的基长液代中，体谢加促培特入进养点青所基，霉需在素要培，的养以微基抑生中制物加细的入菌生某、长种。 据放指物线示理菌剂性的或质生化分长学，半药从固品而体配分培制离养而到基成酵，母用菌以和鉴霉别菌不。同又种 如种类蓝，细的 ，在 菌微 可培 的生 以养 生物 用基 长。 来中 ，固例鉴加但体如别入不培，饮高影养常在用浓响基用培水度金于养和的黄工基乳食色业中制盐葡生加品可 萄产入 中以 球伊是抑 菌红否制 的和存多 生美在 据长大物带化。肠 就 有学杆 与 金成菌 伊 属分等 红 光分细 和 泽天合菌美。然成：蓝常运用培培如结用动于养养果合于、微基基有，观鉴生大使察定物肠菌微菌的杆落生种分菌呈物离， 深的、其 紫计代 色数谢 ，产 并
全部微生物
能
微生物的实验室培养
3.常用的消毒与灭菌的方法
(1)消毒的方法：
1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min 2、巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min 或 80 ℃ 下煮15min 3、化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁 尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源 4、紫外线消毒 ……
微生物的实验室培养
专题2 :微生物的培养与应用
课题1 微生物的实验室培养
微生物的实验室培养
微生物基础知识
病毒
细菌
微生物包括哪五类： 放线菌
病毒界 原核生物界
真菌
真菌界
原生动物 原生生物界
特点：结构都相当简单,个体多数十分微小.通 常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有 的甚至没有细胞结构.且体内一般不含有叶绿 素.不能进行光合作用.
使用强烈的理化因素杀死物体内外 所有的微生物，包括芽孢和孢子，而达 到完全无菌之过程。
灭菌消毒技术是微生物有关工作中最 普通也是最重微要生物的的实技验室术培养 。
消毒与灭菌的比较
比较 理化因素的 消灭微生物的 芽孢和孢子能
项 作用强度
数量
否被消灭
消毒 较为温和 部分生活状态 的微生物
不能
灭菌 强烈
选择培养常基用于工业生产 据用途分
鉴别培养基常用于分类、鉴定
微生物的实验室培养
标准
培养基类型
配制特点
主要应用
固体培养基 物理性质 半固体培养基
加入琼脂较多 加入琼脂较少
菌种分离,鉴定, 计数
菌种保存
化学组成
液体培养基 合成培养基 天然培养基
不加入琼脂
由已知成分配制而成， 培养基成分明确
工业生产，连续 培养
生长 维生素、氨基酸、碱
因子 基
微生物的实验室培养
酶、核酸等的 组成成分
（二）无菌技术
1.无菌技术的概念
无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所 有防止杂菌污染的方法。
成功地培养微生物的关键。
无菌技术包括： （1）对实验操作空间、操作者的衣着和手进行 清洁
和消毒 ； （2）将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行 灭
菌； （3）为避免周围微生物污染，实验操作应在 酒精灯
火焰附近 旁进行； （4）避免已灭菌处微生理物的的实验材室培料养 用具与 周围物品 相接触。
2.消毒与灭菌的概念及两者的区别
（１）消毒定义：
指使用较为温和的物理或化学方法 仅杀死物体表面或内部一部分对人体有 害的微生物。（不包括芽孢和孢子）
（2）灭菌的定义：
无动力
有动力(弥散)
(是否运动) 微生物的实验室培养
选择培养基
加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌
加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌
不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌
不加含碳有机物的无碳培养基: 分离自养型微生物
微生物的实验室培养
鉴定培养基：鉴定所培养生物的类型 大肠杆菌在伊红美蓝培养基上典型特征
菌种降低
培养基成分不明确
成本
目的用途
添加某种指示剂或化学 鉴别培养基
药剂 添加（或缺少）某种化 选择培养基 微生物的实验室培养学成分
菌种的鉴别 菌种的分离
固体培养基：菌落
微生物的实验室培养
液体培养基：
表面生长
均匀混浊生长
微生物的实验室培养
沉淀生长
半固体培养基：
大肠杆菌呈微生物的黑实验色室培中养 心 ,有金属光泽
2、培养基配制原则：
• （1）目的要明确：根据微生物的种类、培养 目的等确定配制培养基的种类，因为不同的微 生物对培养物质的需求不同。
• （2）营养要协调：注意各种营养物质的浓度 和比例。
• （3）pH要适宜：各种微生物适宜生长的pH范 围不同。
破坏。
有些玻璃器皿也可采用高温干热灭菌。为了
防止杂菌，特别是空气中的杂菌污染，试管及玻
精品资料
一、基础知识：
（一）培养基 培养基（培养液）是由人工方法配制而成
的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。
1.培养基的类型和用途 （1）按物理状态来分：培养基可分为固体培 养基、液体培养基和半固体培养基。其中固 体培养基用于菌种分离、鉴定等。 （2）按功能来分，可分为选择培养基和鉴别 培养基。 （3）按成分来分，可分为天然培养基和合成 培养基。
微生物的实验室培养
碳源、氮源、生长因子的比较
来源
常用原料
功能
CO2、NaHCO3、糖 碳源 类、脂肪酸、花生粉 糖类
饼、石油等
构成细胞物质 和一些代谢产 物，有些还是 异养做生物的 主要能源物质
氮源
N2、NH3、铵盐、硝 酸盐、尿素、牛肉膏
和蛋白胨等
铵盐、硝酸 盐等
合成蛋白质、 核酸以及含氮 的代谢产物
• 细菌pH为：6.5-7.5； • 放线菌pH为：7.5-8.5； • 真菌pH为：5.0-6.0。
微生物的实验室培养
3、培养基的营养构成
不管哪种培养基，一般都含有水、 碳源、和氮源、无机盐等营养物质，另 外还需要满足微生物生长对pH、特殊 营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必 需，而自身不能合成的化合物,如维生 素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧 气、二氧化碳、渗透压等的要求。
(2)灭菌的方法：
1、灼烧灭菌 接种环、接种针、 试管口 2、干热灭菌： 160-170 ℃下加 热1-2h。
3、高压蒸气灭菌： 100kPa、121 ℃ 下维持15-30min.
微生物的实验室培养
最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌，它可以
杀灭所有的生物，包括最耐热的某些微生物的休
眠体，同时可以基本保持培养基的营养成分不被
微生物的实验室培养
培养基的种类 在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要 的例根如微据，生微在物生培的物养生的基长液代中，体谢加促培特入进养点青所基，霉需在素要培，的养以微基抑生中制物加细的入菌生某、长种。 据放指物线示理菌剂性的或质生化分长学，半药从固品而体配分培制离养而到基成酵，母用菌以和鉴霉别菌不。同又种 如种类蓝，细的 ，在 菌微 可培 的生 以养 生物 用基 长。 来中 ，固例鉴加但体如别入不培，饮高影养常在用浓响基用培水度金于养和的黄工基乳食色业中制盐葡生加品可 萄产入 中以 球伊是抑 菌红否制 的和存多 生美在 据长大物带化。肠 就 有学杆 与 金成菌 伊 属分等 红 光分细 和 泽天合菌美。然成：蓝常运用培培如结用动于养养果合于、微基基有，观鉴生大使察定物肠菌微菌的杆落生种分菌呈物离， 深的、其 紫计代 色数谢 ，产 并
全部微生物
能
微生物的实验室培养
3.常用的消毒与灭菌的方法
(1)消毒的方法：
1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min 2、巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min 或 80 ℃ 下煮15min 3、化学药剂消毒法:用75%酒精、新洁 尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源 4、紫外线消毒 ……
微生物的实验室培养
专题2 :微生物的培养与应用
课题1 微生物的实验室培养
微生物的实验室培养
微生物基础知识
病毒
细菌
微生物包括哪五类： 放线菌
病毒界 原核生物界
真菌
真菌界
原生动物 原生生物界
特点：结构都相当简单,个体多数十分微小.通 常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有 的甚至没有细胞结构.且体内一般不含有叶绿 素.不能进行光合作用.
使用强烈的理化因素杀死物体内外 所有的微生物，包括芽孢和孢子，而达 到完全无菌之过程。
灭菌消毒技术是微生物有关工作中最 普通也是最重微要生物的的实技验室术培养 。
消毒与灭菌的比较
比较 理化因素的 消灭微生物的 芽孢和孢子能
项 作用强度
数量
否被消灭
消毒 较为温和 部分生活状态 的微生物
不能
灭菌 强烈
选择培养常基用于工业生产 据用途分
鉴别培养基常用于分类、鉴定
微生物的实验室培养
标准
培养基类型
配制特点
主要应用
固体培养基 物理性质 半固体培养基
加入琼脂较多 加入琼脂较少
菌种分离,鉴定, 计数
菌种保存
化学组成
液体培养基 合成培养基 天然培养基
不加入琼脂
由已知成分配制而成， 培养基成分明确
工业生产，连续 培养
生长 维生素、氨基酸、碱
因子 基
微生物的实验室培养
酶、核酸等的 组成成分
（二）无菌技术
1.无菌技术的概念
无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所 有防止杂菌污染的方法。
成功地培养微生物的关键。
无菌技术包括： （1）对实验操作空间、操作者的衣着和手进行 清洁
和消毒 ； （2）将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行 灭
菌； （3）为避免周围微生物污染，实验操作应在 酒精灯
火焰附近 旁进行； （4）避免已灭菌处微生理物的的实验材室培料养 用具与 周围物品 相接触。
2.消毒与灭菌的概念及两者的区别
（１）消毒定义：
指使用较为温和的物理或化学方法 仅杀死物体表面或内部一部分对人体有 害的微生物。（不包括芽孢和孢子）
（2）灭菌的定义：
无动力
有动力(弥散)
(是否运动) 微生物的实验室培养
选择培养基
加入青霉素的培养基: 分离酵母菌、霉菌等真菌
加入高浓度食盐的培养基: 分离金黄色葡萄球菌
不加氮源的无氮培养基: 分离固氮菌
不加含碳有机物的无碳培养基: 分离自养型微生物
微生物的实验室培养
鉴定培养基：鉴定所培养生物的类型 大肠杆菌在伊红美蓝培养基上典型特征
菌种降低
培养基成分不明确
成本
目的用途
添加某种指示剂或化学 鉴别培养基
药剂 添加（或缺少）某种化 选择培养基 微生物的实验室培养学成分
菌种的鉴别 菌种的分离
固体培养基：菌落
微生物的实验室培养
液体培养基：
表面生长
均匀混浊生长
微生物的实验室培养
沉淀生长
半固体培养基：
大肠杆菌呈微生物的黑实验色室培中养 心 ,有金属光泽
2、培养基配制原则：
• （1）目的要明确：根据微生物的种类、培养 目的等确定配制培养基的种类，因为不同的微 生物对培养物质的需求不同。
• （2）营养要协调：注意各种营养物质的浓度 和比例。
• （3）pH要适宜：各种微生物适宜生长的pH范 围不同。
破坏。
有些玻璃器皿也可采用高温干热灭菌。为了
防止杂菌，特别是空气中的杂菌污染，试管及玻