沙眼衣原体

生物学性状 培 养 特 性
分离培养：困难
• • • • 专性活细胞内寄生 鸡胚卵黄囊: 组织细胞培养：如Hela, McCoy 动物接种
生物学性状
抗原性
• 衣原体LPS: 属特异性抗原 补体结合抗原
• 外膜蛋白：
属特异性抗原
主要外膜蛋白(MOMP) 60KD外膜蛋白 热休克蛋白
种特异性抗原 型特异性抗原
微 生 物 学 检查
标本: 沙眼：眼穹窿眼结膜刮片；
宫颈炎：宫颈移行部位刮取物
尿道炎：尿道刮取物 输卵管炎：输卵管抽取物
性病淋巴肉芽肿：淋巴结脓汁 肺炎衣原体肺炎：鼻咽拭子、气管内痰液、肺泡灌洗液 鹦鹉热：血液、痰、咽喉含漱液
微 生 物 学 检查 方法: 1、直接涂片镜检： Giemsa染色：原体： 紫红色 始体： 蓝色 包涵体：暗紫色 卢戈碘染色： 包涵体：褐色 免疫荧光检查：荧光素标记的衣原体抗体
5 鉴定：
Giemsa染色： 卢戈碘染色： 免疫荧光检查
检验程序：
标本 血液等
直接涂片
姬姆萨 碘染 荧光 染色 标记的 抗体 衣原体 包涵体
分离培养
细胞 鸡胚 小鼠
血清学检查
姬姆 碘染 荧光 收集细胞 组织 镜检 继代培养
镜检
鉴定依据： 1 直接涂片染色，观察包涵体的形态特点 2 分离培养检查包涵体 3 血清抗体检查结果
鸡胚：6～8天胚龄
标本 接种卵黄囊 收获卵黄囊膜 制片 染色 镜检
接种鸡胚
前3天死亡 弃去 3~13天死亡 收获卵黄囊涂片，染色镜检 13天仍存活 冷冻解剖 阳性 连续传代死亡，血清学（+） 盲传3代阴性 阴性
•
动物接种：小鼠
（1） 腹腔接种：鹦鹉热衣原体 （2）颅内接种：鹦鹉热衣原体，性病淋巴肉芽肿 （3）滴鼻接种：鹦鹉热衣原体
完
衣
百度文库
原
体
Chlamydia
概述
衣原体是一类严格细胞内寄生的原核细 胞微生物, 具有细胞壁，能通过细菌滤器， 对许多抗生素敏感，专性活细胞内寄生， 有独特的发育周期。
分类
沙眼生物变种
衣原体目 衣原体科 衣原体属
沙眼衣原体
（C.trachomatis)
性病淋巴肉芽肿变种 鼠生物变种
鹦鹉热衣原体(C.psittaci) 肺炎衣原体(C.pneumoniae)
生物学性状 形态结构
两种发育类型： 原体（elementary body,EB) ：胞外存在形式，
具感染性
始体（initial body) : 网状体（reticulate body,RB)
繁殖型，不能在胞 外存活，无感染性
生物学性状
生活周期
衣原体原体和始体的性状 性状 原体 大小（直径um） 0.2～0.4 代谢活性 胞外稳定性 + 感染性 + 繁殖能力 RNA：DNA比值 1 始体 0.8~1.0 + + 3~4
肺炎衣原体：双份血清抗体效价升高4倍或以上
IgM 〉1：16 IgG〉1：512
• 酶免疫技术
3、分子技术： 核酸探针：rDNA探针 PCR:
沙眼衣原体:MOMP基因，隐蔽质粒 肺炎衣原体： 16S rRNA 特异片断 鹦鹉热衣原体:16S rRNA
4、分离培养 • 细胞培养分离： 沙眼衣原体： McCoy细胞 鹦鹉热衣原体：HeLa229 肺炎衣原体： Hep-2、HL
革兰氏染色：一般反应为阴性，但变化不恒定 沙眼包涵体：Giemsa染色——深紫色
Lugol液染色——棕褐色斑块
Chlamydia trachomatis (Giemsa stain)
培养在McCoy细胞的沙眼衣原体 吉姆萨染色的 McCoy细胞，含大衣原体包涵体，使部分细胞 核不清楚。（吉姆萨染色,放大1000倍）
Electron micrograph of C trachomatis inclusion body in cytoplasm (C) of infected cell
生物学性状 染 色 性
沙眼衣原体具有特殊的染色性状，不同的 发育阶段其染色有所不同。 Giemsa 染色：原体——紫色
始体——蓝色
临 床 意 义
沙眼衣原体：
• 沙眼：衣原体沙眼生物变种A、B、Ba、C血清型引起 • 包涵体性结膜炎：沙眼生物变种D～K血清型引起 • 泌尿生殖道感染：沙眼生物变种D～K血清型引起 • 性病淋巴肉芽肿：沙眼衣原体LGV生物变种引起
鹦鹉热衣原体 ：引起鸟类，家禽感染，可传染给人，可 引起肺炎 肺类衣原体： 急性呼吸感染，肺炎，支气管炎、咽炎等， 感染率高 与冠心病、动脉粥样硬化有关
血清型
沙眼生物变种: A、B、Ba、C、D、Da、E-I、Ia、J、K 性病淋巴肉芽肿变种：L1、L2、L2a、L3 鹦鹉热衣原体： 4个血清型 肺炎衣原体： 1个血清型
生物学性状
抵 抗 力
对冷及冷冻干燥有一定耐受性; 不能用甘油保存，一般保存在pH7.6磷酸盐 缓冲液中或7.5%葡萄糖脱脂乳溶液中; 56℃ 5~6分钟灭活 0.1%甲醛溶液或0.5%石炭酸溶液经24小时 即杀死；用2%来苏儿仅需5分钟. 鹦鹉热衣原体: 抵抗力较强; 3%来苏儿溶液则需24～36小时才可杀死； 紫外线照射可迅速灭活。 四环素、氯霉素和红霉素等抗生素有抑制衣原体繁殖作用。 沙眼衣原体:
*衣原体缺乏主动侵入细胞的能力 促进衣原体在细胞培养基中生长，可采用下法： • 离心 • 细胞培养中加入DEAE葡聚糖 • 细胞培养中加入代谢抑制，如放线菌酮
• 培养方法：有盖片小瓶、微量滴定板 • 结果：检查有无衣原体和包涵体 细胞病变 继代接种
• 鸡胚培养：
所有沙眼衣原体都能在鸡胚卵黄囊内生长繁殖，并致死鸡胚。
cytosol
nucleus
Chlamydia develops in inclusions inside host cells.
Epithelial cell infected with Chlamydia.
2、血清学试验： （Ab
Ag)
• 补体结合试验(complement fixation test, CF) ： • 微量-IF（micro-IF)： 试剂：衣原体标准抗原片 荧光素标记的抗人IgG、IgM (或IgA) 标准：性病淋巴肉芽肿：IgG〉1：2000、IgM 〉1：32