自制鳗弧菌卵黄抗体抑菌效果研究[设计+开题+综述]

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开题报告

生物技术

自制鳗弧菌卵黄抗体抑菌效果研究

一、选题的背景与意义

鳗弧菌(Vabrio anguallanim)是一种对水产鱼类危害严重的细菌病原,其流行区域广泛,能引起世界范围内的淡、海水鱼类及其它养殖动物发生弧菌病,常给水产养殖业造成巨大的经济损失。它还可通过食物链感染人类,使人发生较严重的疾病。因此对该病原进行深入的研究,寻找防止和减少该病爆发的方法,对于为人类提供高质量的水产品具有重要的意义。

卵黄抗体(egg yolk immunoglobulin,IgY)是从免疫禽蛋中提取出的针对特定抗原的抗体,是一种具有较强免疫功能的蛋白质,多为IgG。禽类免疫后在其卵黄中产生的大量高纯度免疫球蛋白G(IgG),其对疫病具有明显治疗和紧急预防作用。

用于人、畜、禽类疫病防治方面的有很多成功的研究报道,且已有产品应用于生产中,如用于紧急预防和治疗传染性法氏囊病(IBD)、新城疫(ND)等疫病的IgY,效果很好。在水产动物方面,只对鳖有少量研究,在对其他细菌病方面则未见研究报道。

本研究的目的是借鉴陆生畜禽相关研究的成功经验,以纯培养的鳗弧菌作为抗原,探讨鳗弧菌IgY的制备技术,并研究其抑菌效果,以期为鳗弧菌引起的疾病的生物防治工作奠定基础,创造社会、经济及生态效益。

二、研究的基本内容与拟解决的主要问题:

本研究通过自制的抗鳗弧菌卵黄抗体进行体外抑菌试验和体内抑菌(即动物保护试验),研究其抑菌效果。

拟解决的主要问题:抑菌效果的研究方法。

三、研究的方法与技术路线:

1.体外抑菌效果的研究:根据实验设计的浓度比,将卵黄抗体与鲜鳗弧菌菌悬液的混合,并在不同时间下培养后,涂布在培养基上培养。然后进行菌落计数,对比、分析各组结果。

2.体内抑菌效果(即动物保护试验)

①对将一定浓度的鳗弧菌菌悬液注射入克氏原螯虾体内进行攻毒,观察死亡情况。

②中和试验:将卵黄抗体与鳗弧菌等比例混合并中和一段时间后,注射入试验动物体内,观察试验动物的发病以及死亡情况。

技术流程:

四、研究的总体安排与进度:

2010.11-2010.12 查阅文献,外文翻译,任务书和开题报告的撰写,熟悉

实验操作。

2010.12-2011.02 鳗弧菌卵黄抗体的体内、体外抑菌效果试验。

2011.02-2011.03 鳗弧菌卵黄抗体的抑菌效果分析。

2011.03-2011.04 实验数据的整理分析以及对整个试验的补充、完善。2011.04-2011.05 撰写论文,结题、答辩。

五、主要参考文献:

[1]Egidius E. Vibriosis, pathogenicity and pathology, a renew[J]. Aquaculture, 1987, 67:15~18.

[2]Toranzo AB, Santos Y, Barja J I. Immunization with bacterial antigens: vibrio infe ctions [J].

Dev Biol Stand, 1997, 90:93~105.

[3]布坎南R E,吉本斯N E.中国科学院微生物研究所《伯杰细菌鉴定手册》编译组译.伯

杰细菌鉴定手册[M].(第八版).北京:科学出版社, 1984.Pp.475~481.

[4]Milton D L, Norqvist A, Wolf-watz H. Journal of Bacteriology[M], 1992, 174(22):7235~7244.

[5]Boesen H T, Pedersen K, Larsen J L, et al. Boesen H T, Pedersen K, Larsen J L, et al. Infect

Immun [J]. Infect Immun, 1999, 67:294~301.

[6]Kusuda R, Kawai K. Gyobyo Kenkyu[M], 1998, 33:221.

[7]孟思妤,孟长明,陈昌福.鳗弧菌(Vibrio anguillarum)的病原生物学研究现状(上)

[J].渔业致富指南,Fishery Guide to be Rich,2010,(01)63~64.

[8]莫照兰,茅云翔,陈师勇,张培军.一株牙鲆皮肤溃烂症病原菌的鉴定[J].微生物学报,

2002,(03).

[9]高冬梅,李健,王群.鳗弧菌灭活疫苗对牙鲆免疫效果的研究[J].海洋水产研究,2004,

25(1):486~492.

[10]肖慧,李军,徐怀恕等.鲈鱼苗烂鳃、烂尾病病原的研究[J].青岛海洋大学报,1999,

29(1):89.

[11]夏永娟,黄威权,姜国良.鳗弧菌感染牙鲆的组织学及组织化学观察[J].海洋科学,2000,

24(10):41~44.

[12]陈吉祥,于德华,李绮.鱼类病原鳗弧菌致病相关因子及分子生物学[J].海洋科学.2003,

(08).

[13]Lally E T, Hill R B, Kieba I R, et al. The interaction between RTX toxins and target cells[J].

Trends in Microbiology, 1999, 7:356~361.

[14]Boardman B K, Fuller S K J. Journal of Bacteriology[M], 2004, 186(23):8137~8143.

[15]Jarma E, Corradino G, Regassa L B. Anaerobiosis, growth phase and Actinobacillus

pleuropneumoniae RTX toxin production[J]. Microb Pathog, 2004, 37(1):29~33.

[16]Cortajarena A L, Goni F M, Ostolaza H. His 859 is an essential residue for the activity and

pH-dependence of Escherichia coli RTX toxin alpha –haemolysin[J]. Journal of Biological

Chemistry, 2002, 277(26):23223~23229.

[17]Rodkhum C, Stork H M, Lorenzo M D, et al. Journal of Fish Diseases[M], 2006, 29:157~66.

[18]Milton D L, Toole R, Horstedt P, et al. Flagellin A is essential for the virulence of Vibrio

anguillarum[J]. Journal of Bacteriology, 1996, 178(5):1310~1319.

[19]Norqvist A, Norrman B, Identification and characterization of a zinc metalloprotease

associated with invasion by the fish pathogen Vibrio anguillarum[J]. Wolf watz H.Infection

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