羊胎素的提取研究进展
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羊胎素的提取研究进展
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2010-01-31 17:13
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羊胎素的提取研究进展
1.羊胎素概述
羊胎素是利用最新的生化设备和技术从羊的胚胎或胎盘中提取的活性物质[1],在《本草纲目》记载:“性温无毒、主添精、助气、益血、扶虚、治男女虚劳、矢志恍惚”。
羊胎素能够通过提高人体组织细胞的分裂速度,活化细胞,改善老化细胞的再生;可以增强免疫功能,有效的改善人体内分泌;增加血液制造,治疗贫血;益精补髓,增加精子制造能力,改善不孕症状,强身健体,增强性能力;增强肝功能,加快恢复手术后体力;延缓衰老的进程,具有养颜美容的功能。
羊胎素是瑞士科学家卡尔教授于1912年在羊胚胎细胞中发现的能使细胞恢复活力的物质,卡尔教授发现的这种活性物质可以促使细胞分裂次数的增加,能迫使已衰退或老化的细胞重新活化或被淘汰,从而使机能衰退的器官恢复旺盛活力,卡尔教授因此获得诺贝尔奖。
1931年瑞士的保罗尼翰医生将羊胚胎中的甲状腺提出直接植入人体内,由此开始了胚胎器官疗法。
1943年,日本的胚胎研究专家山岛教授从羊胎中提出一种黑褐色液体,并命名为“维他X”,这是羊胎盘活性的精华,该物质就是羊胎素。
1980年,瑞士的卡洛琳教授研究并开发出羊胎素针剂,将羊胎素通过人体静脉注射,迅速抵达人的皮下组织,刺激皮肤细胞分裂,改善皮肤特征,提高人体机能,平衡内分泌等。
由此开始,羊胎素成了延年益寿,美容健肤的奢侈品。
经研究发现羊胎盘的营养组成与人类胎盘基本一致,营养结构最接近人胎盘,其合理的自然结构特别是丰富的营养成分含量成为动物胎盘的首选种类[2],相比较其他胎盘素,羊胎素是人体最容易吸收的,含有人体免疫系统及各器官需要补充和调整的活性成分。
而且羊胎盘不会感染肝炎病毒,不会与人类产生交叉感染,相对较安全。
采用现代医学手段对羊胎素的成分进行分解,发现其主要成分是免疫球蛋白、多种激素、和多种具有较高应用价值的酶和干扰素。
其中蛋白质的含量在80%以上,氨基酸含量丰富,种类齐全,配比合理;含有丰富的暖磷脂、脑磷脂、糖多脂、多种维生素和微量元素[3]。
此外,还有转移因子、蛋白质活性因子、生长刺激因子、核酸等化合物。
2.羊胎素提取方法的研究
最早的羊胎盘的加工是将新鲜的羊胎盘清洗干净,通过烘、焙等方式除去水分制成粉或入方服用。
这种方法简单易行,但是烘干过程胎盘活性物质易损失,所得制品稀释率较低。
为提高羊胎素活性物质的利用率,不断出现将羊胎素活性物质从胎盘中提取的工艺,方法。
目前国外对羊胎素功能的研究较多,国内对羊胎素的研究相对较少。
羊胎素提取的工艺研究,主要有溶剂提取、酶解提取和高新技术辅助提取等。
2.1溶剂提取羊胎素
2.1.1水溶液提取羊胎素
羊胎素中的活性物质部分是溶于生理盐水的,所以生理盐水作为溶剂能够提取羊胎素。
王洪奇等[4]用生理盐水为溶剂,在不同的条件下提取羊胎素中可溶性活性物质。
张大文[5,6]等人将羊胎素的水解液加工生产羊胎素化妆水。
G .Onuaguluchi等[7]用生理盐水清洗新鲜的羊胎盘后,用生理盐水浸提羊胎盘中的活性物质,离心收集上清液,得到羊胎素活性物质的
浓缩物,冷藏保存。
用水溶液提取,操作简单,成本低,但不能够完全提取出羊胎盘中的活性物质,易造成原料的浪费。
2.1.2酸碱水解法提取羊胎素
用酸、碱水解提取操作简单,成本低,但是酸、碱水解过程可能对营养物质造成损失,产生一些有毒有害物质。
目前没有相关酸碱水解提取羊胎素的报道。
2.1.3有机溶剂提取羊胎素
有机溶剂提取法可以较好的将羊胎盘中的活性物质提出,利用不同的溶剂中可以将各种活性物质提取、分离。
乌云[8]将无菌条件下保存的羊胎盘粉碎后加入无菌水、匀浆、离心,上清液混合有机溶剂,沉淀、离心,将沉淀冷冻成干粉低温保存;然后将清夜减压浓缩,蒸出有机溶剂,得透明液体,冷冻干燥得到羊胎素结晶,低温保存。
提取的羊胎盘素中氨基酸和微量元素含量丰富,其中必须氨基酸亮氨酸、赖氨酸含量较多,具有较大的开发价值和经济效益。
利用有机溶剂溶剂法提取羊胎素活性物质,比透析法、超滤方法更省时,但最终有机溶剂可能清除不净、有异味。
2.2酶解提取
酶解提取是利用酶的专一性,选择性的作用于生物大分子,使之降解成易于溶解和吸收的小分子形式。
羊胎盘中的主要成分是蛋白质,在选择酶加工法时多用蛋白酶进行水解,使蛋白质逐步降解为小分子肽和氨基酸。
黄磊[9]通过生物酶解方法提取羊胎盘中的羊胎素蛋白小肽,获得的分子量小于2500D,营养丰富的蛋白质。
苏[10]胰酶酶水解和有机溶剂提取结合,提取羊胎盘中活性物质,既保留羊胎中的天然活性物质,又增加其多肽和氨基酸含量。
谷雨,朱蓓薇等[2,11]采用生物酶解技术制备羊胎盘生物活性肽,用胰蛋白酶和木瓜蛋白酶双酶解沉淀,离心得到羊胎盘的活性物质。
这种方法操作简便易行,效率高,成本低,适合工业化生产,有显著的经济效益和社会效益。
2.3应用现代科学技术提取羊胎素
2.3.1冻干法在羊胎素提取中的应用
羊胎盘中的活性物质的活性物质比较容易损失,因此现在多用冷冻干燥来保存羊胎盘或羊胎素提取物。
在-40℃迅速冻结,然后升华去除水分。
这一方法能较好的保持活性成分[2]。
目前在胎盘活性物质的保持中应用比较广泛。
经冻干制备的羊胎素成本低、营养成分及生物活性高,可广泛应用于生物医学和保健食品等领域。
余内逊[12]通过冷冻干燥制备羊胎素粉,生产复方羊胎素保健食品。
姚炳坤等[13]通过低温粉碎、冷冻干燥,并在液氮下二次粉碎,得到了冻干羊胎素具有较高的生物活性,可广泛应用于生物医学和保健食品工业领域。
2.3.2超声法提取羊胎素
魏聆[14]将羊胎盘原料在0℃~5℃温度下低温粉碎后,用超声设备处理,激活器活性成分,然后在冷库中速冻,生冷冻干,升华制备羊胎素冻干粉。
杨国春[15]用超声处理过的羊胎盘,提取其活性物质经离心后,真空冷冻干燥,低温粉碎得到最大限度保留了活性物质的羊胎素胶囊。
2.3.3透析法和超滤法提取羊胎素
透析法和超滤法都是膜分离技术,是利用各种膜技术对溶液中溶质分子的大小、形状、性质等不同的可透性来达到分离目的。
透析法是利用半透膜将分子大小不同的蛋白质分开。
谷雨、A. Bella等[2,16]用生理盐水清洗后的羊胎盘在缓冲液中匀浆后,离心,提取液经过透析,得到水溶性的活性物质溶液。
超滤法是利用高压力或离心力,强使水和其他小的溶质
分子通过半透膜,而蛋白质留在膜上,可选择不同孔径的卢膜截留不同分子量的蛋白质。
周国华[17]胎盘预处理后,匀浆、离心,上层液用0.45微米的滤器进行微滤,得到胎盘肽溶液。
蔡英姬等[18]采用透析法和超滤法提取羊胚胎盘肽,结果表明,超滤法提取液的多肽含量及生物活性明显高于透析法提取液。
用透析、超滤的方法提取胎盘素并把其加工成高科技产品应用于临床医学在80年代已有报道[19]。
透析法成本投人低,但是所需时间较长、易污染、分离率不如超率法。
超滤法所用时间较短,分离率也较高但成本较高。
2.3.4超临界CO2提取羊胎素
超临界CO2具有很强的渗透性和溶解能力, 萃取速度快,萃取率高,流程简单,具有广泛的应用前景。
目前应用超临界CO2提取羊胎素的研究报道较少,高彦祥[20]等人将冷冻干燥后的羊胎盘,用超临界二氧化碳萃取羊胎盘素,分离得到有效物质羊胎素油脂能够有效地保证羊胎盘中的活性物质。
超临界CO2提取是将提取和分离两过程合为一体的方法,萃取产品中活性成分含量高,与萃取成分分离后,完全没有溶剂的残留,可以有效地避免传统溶剂萃取条件下溶剂毒性的残留,是一种天然且环保的萃取技术,但其成本较高。
3.羊胎素研究前景
随着对羊胎素研究的深入,羊胎素在增强免疫机能、提高性功能、延缓衰老、美容等方面具有显著的作用。
使得羊胎素产品在市场上目前市场上占有一席之地。
瑞士已经运用绵羊羊胎盘提取液生产出了美容、养颜、
抗衰老的化妆品。
目前羊胎素产品主要有:羊胎素冻干粉、羊胎素胶囊、羊胎素针剂以及与维生素、多酚等复配的羊胎素滋补口服液等。
但羊胎素冻干粉、羊胎素胶囊加工过程中对羊胚胎中的活性物质都有一定程度的破坏,羊胎素针剂是通过先进的技术对提取的活性细胞进行分离,活性物质含量较高,但其提取复杂,价格昂贵,不适于大众消费。
随着现代科学技术的进步,提取技术和生化设备研究不断取得新进展,对羊胎素深入的研究,将现代新技术应用于羊胎素的提取、纯化及检测中,提高羊胎素活性物质的含量,较好的保存活性物质,以及羊胎素的功能的进一步研究将会成为羊胎素今后研究的主要方向。