DNA生物合成过程

4. DNA生物合成过程

4.1复制的起始 DNA复制的起始阶段，由下列两步构成。 4.1.1 预引发：①解旋解链，形成复制叉：由拓扑异构酶和解链酶作用，使DNA的超螺旋及双螺旋结构解开，碱基间氢键断裂，形成两条单链DNA。单链DNA结合蛋白（SSB）结合在两条单链DNA上，形成复制叉。 DNA 复制时，局部双螺旋解开形成两条单链，这种叉状结构称为复制叉。②引发体组装：由蛋白因子（如dnaB等）识别复制起始点，并与其他蛋白因子以及引发酶一起组装形成引发体。

4.1.2 引发在引发酶的催化下，以DNA为模板，合成一段短的RN**段，从而获得3'端自由羟基（3'-OH）。

4.2 复制的延长 4.2.1 聚合子代DNA：由DNA聚合酶催化，以3‘→5’方向的亲代DNA链为模板，从5‘→3’方向聚合子代DNA链。在原核生物中，参与DNA复制延长的是DNA 聚合酶Ⅲ；而在真核生物中，是DNA聚合酶α(延长滞后链)和δ（延长先导链）。

4.2.2 引发体移动：引发体向前移动，解开新的局部双螺旋，形成新的复制叉，随从链重新合成RNA引物，继续进行链的延长。

4.3 复制的终止 4.3.1 去除引物，填补缺口：在原核生物中，由DNA聚合酶Ⅰ来水解去除RNA 引物，并由该酶催化延长引物缺口处的DNA，直到剩下最后一个磷酸酯键的缺口。而在真核生物中，RNA引物的去除，由一种特殊的核酸酶来水解，而冈崎片段仍由DNA聚合酶来延长。

4.3.2 连接冈崎片段：在DNA连接酶的催化下，形成最后一个磷酸酯键，将冈崎片段连接起来，形成完整的DNA长链4.3.3 真核生物端粒的形成：端粒（telomere）是指真核生物染色体线性DNA分子末端的结构部分，通常膨大成粒状。其共同的结构特征是由一些富含G、C的短重复序列构成，可重复数十次至数百次。

线性DNA在复制完成后，其末端由于引物RNA的水解而可能出现缩短。故需要在端粒酶（telomerase）的催化下，进行延长反应。端粒酶是一种RNA-蛋白质复合体，它可以其RNA 为模板，通过逆转录过程对末端DNA链进行延长。

整个DNA复制过程中，只有复制起始受细胞周期的严格调控。 DNA甲基化与DNA复制起始密切相关。OriC中有11个GATC回文结构（一般说来，256bp才应有一个GATC重复）。DNA 子链被合成后，母链立即被甲基化（称为hemimethylated）。此时，oriC与细胞原生质膜相结合。只有当oriC被从膜上释放出来，子链被Dam甲基化后，才能有效地与DnaA蛋白结合，起始新一轮的DNA复制。复制起始可能还受ATP水解过程调控，因为DnaA只有与ATP 相结合时才能与oriC区DNA相结合。 Once in each cell cycle 原核生物核真核生物DNA复制的异同：不同点：①复制起点数目②复制叉数目③调节方式