机能学设计性实验急性肾衰竭动物模型的建立
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内生肌酐清除率:
尿量( ml/min ) ml/min
肌酐 ( mg%) 88.402
mol/L
【观察项目】
表2 处理前和处理后对照组家兔各指标变化
组 别
1兔 2兔 3兔 4兔 5兔 6兔
血压
(mmHg)
呼吸
尿量
(滴/分)
心率
(次/分)
血肌酐
( %)
尿肌酐
(%)
内生肌酐清除率
(%)
【预期实验结果】
二组家兔兔子血压升高,呼吸加深加快,心率加快, 尿量减少,血/尿肌酐的浓度增高,内生肌酐清除率升 高,各项症状明显易于测定。
正常肾脏切面图
急性肾衰竭肾脏切面图
急性肾衰竭镜下图
毒素引起的肾小管坏死通常弥散性累及肾小 管,而由缺血(如心衰引起的严重低血压) 引起的肾小管坏死则成片状受累。
急性肾衰竭动物模型的建立
【实验目的】
1.学习复制急性肾衰竭动物模型的方法 。
2.观察急性肾衰竭时机体的典型表现及血 酐水平的变化。 3.掌握急性肾衰竭的概念及发病机制 。
【实验原理】
急性肾功能衰竭 指各种原因在短期内引起肾脏泌尿功能 急剧障碍,以致机体内环境出现严重紊乱的 病理过程,临床表现有水中毒、氮质血症、 高钾血症和代谢性酸中毒等 急性肾功能不全的分类 根据病因学,临床上将急性肾功能不全 分为肾前性、肾性、肾后性三种。
在实验系统上读取血压以及记录此时在尿量
↓
在麻醉状态下,自耻骨联合上方腹部正中线切开皮肤,切口长4~6cm
↓
夹闭肾动脉---沿腹白线打开腹腔,将内脏推向左侧,打开后腹膜,暴露 肾蒂,分离肾动脉,实验兔和夹闭肾动脉30分钟,对照组肾脏不夹闭。
↓
二组家兔耳缘静脉注入庆大霉素4万U/Kg
↓ ↓
每隔10分钟,取一次尿液,测定尿量,并做尿肌酐试验。共取三 次。
处理前│处理后
处理前│处理后
处理前│处理后 处理前│处理后 处理前│处理后
表3 处理前和处理后实验组家兔各指标变化
组 别
血压
(mmHg)
呼吸
尿量
(滴/分) 处理前│处理后
心率
血肌酐
尿肌酐
(%)
内生肌酐清除率
(%) 处理前│处理后
(次/分) ( %)
处理前│处理后
处理前│处理后 处理前│处理后
7兔 8兔 9兔 10兔 11兔 12兔
【实验步骤】
家兔称重、分组---体重相似为一组,并且实验组和对照组体重相同或相似 剪去颈部和上腹部毛、麻醉--- 20%氨基甲酸乙酯注射液4ml/kg,耳缘静 脉注射麻醉
↓
↓
生理盐水作静脉点滴输液---耳缘静脉滴注
↓
家兔固定---仰卧位固定
↓ 在麻醉状态下,做颈总动脉插管,并连接到试验系统---取血1mL测血肌酐和
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【注意事项】
1.选择体重相差不超过250g的家兔进行对照 2.注意麻醉药的剂量与注入剂量、观察麻醉情况。 3.专人测定血/尿肌酐
左颈总动 迷走神 脉 颈内静脉 经
4.颈总动脉插管
胸骨舌骨 肌 胸锁乳突 肌
5.肾脏结扎线置于肾动脉处,避免勒破肾脏 6.每项生化检验所加入试剂的用量要准确
0.25
- 0.25
-
血浆或尿液
血浆或尿液 空白苦味酸
0.5 -
0.5
0.250
0.5 -
0.250
-
计算:
血中肌酐含量: 尿中肌酐含量:
2
R 0.01 S 0.01
0 . 23 mg% 100 mg%
R 0 . 01 2 0 . 23 S 0 . 01 尿中肌酐含量 血中肌酐含量
颈总动脉取血,做血肌酐试验
↓
最后将家兔一并处死,取出肾脏,观察并比较家兔的肾脏。
血、尿肌酐测定方法(见表1)和内生肌酐清除率的计算从颈总动脉取血 置盛有肝素的离心管内,离心后取血浆,按下表进行实验。
表1 血浆和尿液肌酐含量测定
试剂(ml)
标准管S
标准空白管S0
测定管R
测定空白管 R0 -
肌酐标准液
急性肾功能的发病机制
肾缺血 肾中毒
血流动力学异常
肾小管损伤
滤过膜受损
皮质缺氧
髓质充血
肾小管阻塞
原尿反漏
滤过系数
外髓部供氧
GRF
少尿
【实验动物】
健康家兔,雄性,体重1.5~1.8Kg
【实验器材和药品】
• • • 20%乌拉坦溶液、庆大霉素注射液(1ml:4万单位)、 150U/ml肝素、0.9%生理盐溶液、苦味酸 BL-420F实验系统、哺乳动物手术器械一套、动脉 导管、动脉夹、膀胱导尿管、注射器(2ml、5ml)、 皮头针一套、水浴箱、离心机、丝线