海洋保健食品 第三章

装一冷凝器 挥发的溶剂回流
周而复始
有效成分完全浸出
优点 回流提取比渗漉提取时间短，速度快。 比渗漉法使用的溶剂少。 提取有效成分更完全。
缺点 提取出来的提取液杂质更多。 操作时技术要求更高。(且如果冷却系统效果不好, 乙醇的损耗
率会更高) 由于连续加热，浸提液受热时间长，不适用于受热易破坏的药
分配比D：萃取体系达到平衡后，不管被萃 取溶质以何种形式存在，溶质在两相中的实 际分配情况。它随实验条件而变化，通常由 实验直接测定。
海洋保健食品
第三章 海洋生物活性成分的提取、分 离与结构分析
主要内容
一、海洋生物活性成分的提取 二、海洋生物活性成分的分离与纯化 三、海洋生物活性成分的结构鉴定 四、应用实例（自学）
➢ 鱼皮胶原蛋白活性肽的提取、分离与纯化； ➢ 海参黏多糖的提取、分离与纯化
学习要求
掌握：海洋生物活性物质提取的常用方法；常用 的色谱分离技术及原理；
（1）溶剂萃取 （2）超临界流体萃取 （3）固相萃取法
（1）溶剂萃取
溶剂萃取：是一种利用物质在互不混溶的两 相（水相和有机相）中的分配系数的差异， 使目标物质与基体物质互相分离的方法。
分配系数KD：在一定温度下，当某一溶质在 互不相溶的两种溶剂中达到分配平衡时，该 溶质在两相中的浓度比为一常数
• 温度低活性成分稳定， 提取物中所含杂质较 少。
缺点：
• 提取时间长，不宜用 水做溶剂，常用不同 浓度乙醇；
• 耗费溶剂
（3）煎煮法
用水做溶剂，将原料充分浸泡后加热至沸，并保持微 沸，使其有效成分煎出的一种方法。
优点 简便易行，能煎出大部分有效成分。 尤其适用有效成分能溶于水，对温、热均稳定的原料。
缺点 对有效成分的选择性差，且杂质较多，精制较困难。 容易霉变、腐败变质，不易保存。 一些不耐热及挥发性成分在煎煮过程中易被破坏，挥发而
损失。
（4）回流提取法
水浴中加热回流，保持沸腾约1小时后过 滤，再加新溶剂，做第二、三次加热回 流，分别约半小时，或至有效成分基本 提尽为止。
乙醇等挥发性有机溶剂 加热方法提取有效成分
优点： 适用：遇热不稳定成分，含淀粉、
果胶、粘液质多的样品； 浸出液澄明度较好。
缺点： 提取时间长，不宜用水做溶剂，
常用不同浓度乙醇； 不适用：贵重或有效成分含量低
的原料，提取有效成分不完全。
（2）渗漉法
不断从渗漉器上部添加新溶剂，使其渗透过原料， 自上而下流出浸出液的一种浸出方法。
1. 溶剂提取法
也称浸提，是采用适当的溶剂使活性成分从固相向液相转移。 溶剂的选择：对活性成分有较大溶解度，而对杂质溶解较少，
安全无毒。
溶剂 水
有机溶剂
非极性溶剂
优点
成本最低，安全，溶解范围广，适用 于蛋白质、多糖、生物碱、有机苷、 氨基酸、色素等
低毒，价廉，沸点适中，具有一定的 防腐作用，水溶液既能溶解水溶性成 分，也能溶解脂溶性成分
湿润：
用配制好的溶剂拌匀，原料吸收溶剂后充分膨胀。
装桶
原料湿润一段时间后装入渗漉桶中（或多功能提取罐）。
浸渍： 渗漉：
装桶后缓缓加入溶剂，至高出原料面数厘米，加盖放置24-48时。 浸渍后，开始慢慢放出浸出液，并且往原料上面及时添加溶剂。
优点：
• 提取效率较浸渍法高， 可用于提取较大量样 品；
材成分浸出。
（5）连续回流提取法
为了弥补回流提取法中需要溶剂量大，操作较 繁的不足，可采用连续回流提取法
优点：以较少的溶剂一次加入便可将有效成分 提取完全，效率较高。
缺点：提取器容量较小，只适于少量原料的提 取；提取液受热时间长，因此对受热易分解的 成分不宜采用此法。
2. 蒸馏法
液态物质受热化为蒸汽
冷凝
转变为液体
简单蒸馏只有在组分沸点相差 30℃以上时才有较好的分离效 果。若组分沸点相差不大，则 需用分馏（利用分馏柱多次蒸 馏）操作，可将沸点差距1 ℃ -2 ℃的混合物分离开来。
蒸馏是纯化和分 离液态物质的一 种常用的方法。
利用不同物质的沸 点差异对液态混合 物进行分离纯化。
（1）水蒸气蒸馏法 （2）分子蒸馏法
⑤分子蒸馏不适宜于同分异构体的分离。
3.萃取法
萃取分离法：将样品中的目标化合物选择性地转移 到另一相中或选择性地保留在原来的相中（转移非 目标化合物），从而使目标化合物与原来的复杂基 体相互分离的方法。
溶剂萃取属于扩散分离，它是根据溶质在两相中的 分配平衡状态的差异实现分离。
构成溶剂萃取两相的两溶剂的互溶度要低，否则无 法分相实现选择性分离的作用。
分子蒸馏技术的选用原则：
①分子蒸馏适用于不同物质分子量差别较大的液体混合物系的分 离，特别是同系物的分离，分子量必须要有一定差别。
②分子蒸馏也可用于分子量接近但性质差别较大的物质的分离， 如沸点差较大、分子量接近的物系的分离。
③分子蒸馏特别适用于高沸点、热敏性、易氧化（或易聚合）物 质的分离。
④分子蒸馏适宜于附加值较高或社会效益较大的物质的分离。
压力：压力增高可促进活性成分从毛细管中扩散；
时间：浸提时间与浸提量成正比，但长时间的浸提则可能溶出大 量杂质，并且易导致活性成分水解
可通过正交设计实 验来确定浸提温度、 压力、时间和浸提 率之间的最佳比例
常用：浸渍法，渗漉法、ຫໍສະໝຸດ Baidu煮法、回流提取法、连续 回流提取法等
（1）浸渍法 适当的溶剂，常温或温热浸泡，溶出有效成分； 包括冷浸法和温浸法。
熟悉：膜分离法; 熟悉：结构研究中常用的波谱技术； 了解：鱼皮胶原蛋白活性肽的提取、分离与纯化；
海参黏多糖的提取、分离与纯化。
一、 海洋生物活性物质的提取
提取时首先要进行原料处理，主要指干物料的粉碎和新鲜原料的匀浆。
1、溶剂提取法 2、蒸馏法 3、萃取法
注意：在海洋活 性成分的提取之 前，应对所用原 料的品种及来源 进行鉴定和确认！
主要用于提取脂溶性成分或作为脱水 剂使用
缺点 选择性差，易提出杂质，有 时会引起有效成分水解或发 生化学变化 易挥发燃烧，有些具有一定 毒性
大多易燃易爆，一般有毒。 提取时间长，要求原料干燥
增加浸提效率，可在溶剂中加入辅助剂，如酸、碱、多种溶质、表 面活性剂等。
影响因素：
温度：温度提高可促进传质速度，但活性成分在高温下易分解， 一般100 ℃以下；