129例急性白血病流式细胞术免疫分型的特点分析
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１（３．７） ０（０）
１８（６６．７） ２６（９６．３） １１（４０．７） １９（７０．４） ６（２２．２）
０（０） ８（２９．６） ２（７．４） ２０（７４．１）★ ２３（８５．２）★
０（０） １（３．７）
０（０） ２５（９２．６）
Ｔ－ＡＬＬ（１１ 例 ） １０（９０．９） ９（８１．８） １１（１００．０） ３（２７．３） ０（０） ０（０） １（９．１） ０（０） ０（０） １（９．１） ０（０） ５（４５．５） ２（１８．２） ０（０） ０（０） １０（９０．９） ０（０）
（１８．７％）、ＣＤ１９（９．９％），Ｂ－ＡＬＬ 常 见 交 叉 表 达
ＣＤ３３（２９．６％）、ＣＤ１３（２２．２％），Ｔ－ＡＬＬ 常 有 ＣＤ１０
（２７．３％ ）交 叉 表 达 。
表 １ １２９ 例 急 性 白 血 病 患 者 的 抗 原 表 达 情 况 （例 （％ ））
抗原
ＣＤ２ ＣＤ５ ＣＤ７ ＣＤ１０ ＣＤ１９ ＣＤ２０ ＣＤ２２ ＣＤ１３ ＣＤ１４ ＣＤ３３ ＣＤ１１７ ＣＤ３４ ＨＬＡ－ＤＲ ＣＤ５６ ｃＭＰＯ ｃＣＤ３ ｃＣＤ７９ａ
抗原 ＨＬＡ－ＤＲ（８５．２％）、ＣＤ３４（７４．１％）表 达 率 高，
与 ＡＭＬ、Ｔ－ＡＬＬ 比较有显著 差 异；１１ 例 Ｔ－ＡＬＬ 患
者最 敏 感 的 指 标 为 ＣＤ７（１００．０％），其 次 为 ｃＣＤ３
（９０．９％）、ＣＤ２（９０．９％）、ＣＤ５（８１．８％）。
ＡＭＬ 中 常 见 交 叉 表 达 ＣＤ７（２０．９％）、ＣＤ５６
判 定 以 膜 抗 原 ≥２０％ ，胞 浆 内 抗 原 ≥１０％ 为 阳 性 。
１．５ 统 计学处理 用 ＳＰＳＳ １３．０ 统计软 件 包 进 行
统
计
学
分
析
，采
用
２
χ
检验。
２ 结 果
２．１ 急性白血病患者 抗 原 表 达 情 况 由 表 １ 可 见
９１例 ＡＭＬ 中 髓 系 特 异 性 抗 原 ｃＭＰＯ 表 达 率 最 高
与 ＡＭＬ、Ｔ－ＡＬＬ 比较 ★ Ｐ＜０．０５
２．２ ＡＭＬ 患者各亚型髓 系 抗 原 表 达 情 况 由 表 ２ 可见９１例 ＡＭＬ 患者各亚型中 ＣＤ１３、ＣＤ３３、ＣＤ１１７ 和胞浆 内 抗 原 ｃＭＰＯ 广 泛 表 达，无 明 显 差 异，但 在 ２３ 例 Ｍ３ 患 者 中 ＣＤ３４（８．７％）、ＨＬＡ－ＤＲ（４．３％） 表达率明 显 低 于 其 他 ＡＭＬ 亚 型，而 ＣＤ１４ 特 异 性 表达于 Ｍ４和 Ｍ５亚型，其他亚型很少见。
１．３ 主 要 试 剂 采 用 三 色 直 接 标 记 的 荧 光 抗 体 ，选 择 １８ 种 单 抗 如 下，髓 系：ＣＤ１３、ＣＤ３３、ＣＤ１４、 ＣＤ１１７、ｃＭＰＯ；Ｔ 系：ＣＤ２、ＣＤ５、ＣＤ７、ｃＣＤ３；Ｂ 系： ＣＤ１０、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ｃＣＤ７９ａ；ＮＫ 系：ＣＤ５６； 非特 异 性 早 期 标 志：ＣＤ３４、ＨＬＡ－ＤＲ、ＣＤ４５。 上 述 试剂和ＩｇＧ１三色荧光 标 记 同 型 对 照 试 剂 均 购 于 法 国Ｉｍｍｕｎｏｔｅｃｈ公司，溶血 剂 （ＩｍｍｕｎｏＰｒｅｐ）和 透 膜 剂（Ｉｎｔｒａｐｒｅｐ Ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ Ｒｅａｇｅｎｔ）购 于 Ｂｅｃｋ－ ｍａｎ－Ｃｏｕｌｔｅｒ 公 司 。 １．４ 研究方法 采患者骨髓２－３ ｍｌ，ＥＤＴＡ 抗凝， 用单克隆抗体 三 色 直 接 免 疫 荧 光 标 记 法，取 １００μｌ 样品与单抗２０μｌ混 匀 后 室 温 避 光 １５ ｍｉｎ，加 入 溶 血剂混匀，避 光 １０ ｍｉｎ 后 ＰＢＳ 洗 涤 两 次 即 可 上 机 检测。胞浆 内 抗 原 检 测：按 透 膜 剂 （Ｉｎｔｒａｐｒｅｐ Ｐｅｒ－ ｍｅａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ Ｒｅａｇｅｎｔ）试剂盒所述步骤增加细胞 膜
（９０．１％），其次为 ＣＤ１１７（８７．９％）、ＣＤ１３（８２．４％）、
ＣＤ３３（８１．３％）；２７ 例 Ｂ－ＡＬＬ 患 者 主 要 表 达 抗 原
ＣＤ１９（９６．３％）、ｃＣＤ７９ａ（９２．６％）、ＣＤ２２（７０．４％）、
ＣＤ１０（６６．７％）、ＣＤ２０（４０．７％），非 特 异 性 早 期 标 志
中 国 实 验 诊 断 学 ２０１３ 年 １ 月 第 １７ 卷 第 １ 期
— １２５ —
后上机检测。
运 行 ＳＹＳＴＥＭ Ⅱ 程 序 上 机 检 测，用 ＦＬＯＷ
ＣＨＥＣＫ 校准 ＦＣＭ 的光路和流路，应 用 ＣＤ４５／ＳＳＣ
设 门 ，确 定 幼 稚 细 胞 群 ，分 析 其 抗 原 表 达 情 况 。 结 果
— １２４ —
Ｃｈｉｎ
１２９例急性白血病流式细胞术免疫分型的特点分析
刘 志 祥１ ，姚 忠 红２ ，李 瑞 明３ ，王 晓 勋３
（湖北医药学院附属太和医院 １．检验科；２．脊柱外科；３．生命科学研究所，湖北 十堰４４２０００）
免疫分型是用已知的单克隆抗体鉴定细胞表面 或 细 胞 内 的 免 疫 标 志 ，剖 析 细 胞 的 来 源 及 分 化 阶 段 ， 与 流 式 细 胞 术 联 合 应 用 使 诊 断 白 血 病 更 精 细 、全 面 ， 对为临床合理治 疗、判 断 预 后 提 供 科 学 依 据。 我 们 应用 ＣＤ４５／ＳＳＣ 设门的三色荧光流式细胞术对１２９ 例急性白血病患者 进 行 较 全 面 的 免 疫 分 型 检 测，对 其结果和诊断标准进行分析。 １ 材 料 与 方 法 １．１ 临床资料 ２００８年 ６ 月 至 ２０１０ 年 １２ 月 本 院 血 液 科 和 儿 科 急 性 白 血 病 门 诊 及 住 院 的 患 者 １２９ 例 ，男 ７１ 例 ，女 ５８ 例 ，年 龄 １－７１ 岁 。 其 中 急 性 髓 系 白血病（ＡＭＬ）９１ 例；Ｂ 细 胞 急 性 淋 巴 细 胞 白 血 病 （Ｂ－ＡＬＬ）２７ 例；Ｔ 细 胞 急 性 淋 巴 细 胞 白 血 病 （Ｔ－ ＡＬＬ）１１ 例 。 １．２ 主 要 仪 器 Ｂｅｃｋｍａｎ－Ｃｏｕｌｔｅｒ Ｅｐｉｃｓ ＸＬ 流 式
ＡＭＬ（９１ 例 ） １（１．１） ０（０）
１９（２０．９） ０（０）
９（９．９） ０（０） ０（０）
７５（８２．４） １９（２０．９） ７４（８１．３） ８０（８７．９） ５３（５８．２） ４５（４９．５） １７（１８．７） ８２（９０．１）
０（０） ３（３．３）
Ｂ－ＡＬＬ（２７ 例 ） ０（０）
１８（６６．７） ２６（９６．３） １１（４０．７） １９（７０．４） ６（２２．２）
０（０） ８（２９．６） ２（７．４） ２０（７４．１）★ ２３（８５．２）★
０（０） １（３．７）
０（０） ２５（９２．６）
Ｔ－ＡＬＬ（１１ 例 ） １０（９０．９） ９（８１．８） １１（１００．０） ３（２７．３） ０（０） ０（０） １（９．１） ０（０） ０（０） １（９．１） ０（０） ５（４５．５） ２（１８．２） ０（０） ０（０） １０（９０．９） ０（０）
（１８．７％）、ＣＤ１９（９．９％），Ｂ－ＡＬＬ 常 见 交 叉 表 达
ＣＤ３３（２９．６％）、ＣＤ１３（２２．２％），Ｔ－ＡＬＬ 常 有 ＣＤ１０
（２７．３％ ）交 叉 表 达 。
表 １ １２９ 例 急 性 白 血 病 患 者 的 抗 原 表 达 情 况 （例 （％ ））
抗原
ＣＤ２ ＣＤ５ ＣＤ７ ＣＤ１０ ＣＤ１９ ＣＤ２０ ＣＤ２２ ＣＤ１３ ＣＤ１４ ＣＤ３３ ＣＤ１１７ ＣＤ３４ ＨＬＡ－ＤＲ ＣＤ５６ ｃＭＰＯ ｃＣＤ３ ｃＣＤ７９ａ
抗原 ＨＬＡ－ＤＲ（８５．２％）、ＣＤ３４（７４．１％）表 达 率 高，
与 ＡＭＬ、Ｔ－ＡＬＬ 比较有显著 差 异；１１ 例 Ｔ－ＡＬＬ 患
者最 敏 感 的 指 标 为 ＣＤ７（１００．０％），其 次 为 ｃＣＤ３
（９０．９％）、ＣＤ２（９０．９％）、ＣＤ５（８１．８％）。
ＡＭＬ 中 常 见 交 叉 表 达 ＣＤ７（２０．９％）、ＣＤ５６
判 定 以 膜 抗 原 ≥２０％ ，胞 浆 内 抗 原 ≥１０％ 为 阳 性 。
１．５ 统 计学处理 用 ＳＰＳＳ １３．０ 统计软 件 包 进 行
统
计
学
分
析
，采
用
２
χ
检验。
２ 结 果
２．１ 急性白血病患者 抗 原 表 达 情 况 由 表 １ 可 见
９１例 ＡＭＬ 中 髓 系 特 异 性 抗 原 ｃＭＰＯ 表 达 率 最 高
与 ＡＭＬ、Ｔ－ＡＬＬ 比较 ★ Ｐ＜０．０５
２．２ ＡＭＬ 患者各亚型髓 系 抗 原 表 达 情 况 由 表 ２ 可见９１例 ＡＭＬ 患者各亚型中 ＣＤ１３、ＣＤ３３、ＣＤ１１７ 和胞浆 内 抗 原 ｃＭＰＯ 广 泛 表 达，无 明 显 差 异，但 在 ２３ 例 Ｍ３ 患 者 中 ＣＤ３４（８．７％）、ＨＬＡ－ＤＲ（４．３％） 表达率明 显 低 于 其 他 ＡＭＬ 亚 型，而 ＣＤ１４ 特 异 性 表达于 Ｍ４和 Ｍ５亚型，其他亚型很少见。
１．３ 主 要 试 剂 采 用 三 色 直 接 标 记 的 荧 光 抗 体 ，选 择 １８ 种 单 抗 如 下，髓 系：ＣＤ１３、ＣＤ３３、ＣＤ１４、 ＣＤ１１７、ｃＭＰＯ；Ｔ 系：ＣＤ２、ＣＤ５、ＣＤ７、ｃＣＤ３；Ｂ 系： ＣＤ１０、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ｃＣＤ７９ａ；ＮＫ 系：ＣＤ５６； 非特 异 性 早 期 标 志：ＣＤ３４、ＨＬＡ－ＤＲ、ＣＤ４５。 上 述 试剂和ＩｇＧ１三色荧光 标 记 同 型 对 照 试 剂 均 购 于 法 国Ｉｍｍｕｎｏｔｅｃｈ公司，溶血 剂 （ＩｍｍｕｎｏＰｒｅｐ）和 透 膜 剂（Ｉｎｔｒａｐｒｅｐ Ｐｅｒｍｅａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ Ｒｅａｇｅｎｔ）购 于 Ｂｅｃｋ－ ｍａｎ－Ｃｏｕｌｔｅｒ 公 司 。 １．４ 研究方法 采患者骨髓２－３ ｍｌ，ＥＤＴＡ 抗凝， 用单克隆抗体 三 色 直 接 免 疫 荧 光 标 记 法，取 １００μｌ 样品与单抗２０μｌ混 匀 后 室 温 避 光 １５ ｍｉｎ，加 入 溶 血剂混匀，避 光 １０ ｍｉｎ 后 ＰＢＳ 洗 涤 两 次 即 可 上 机 检测。胞浆 内 抗 原 检 测：按 透 膜 剂 （Ｉｎｔｒａｐｒｅｐ Ｐｅｒ－ ｍｅａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ Ｒｅａｇｅｎｔ）试剂盒所述步骤增加细胞 膜
（９０．１％），其次为 ＣＤ１１７（８７．９％）、ＣＤ１３（８２．４％）、
ＣＤ３３（８１．３％）；２７ 例 Ｂ－ＡＬＬ 患 者 主 要 表 达 抗 原
ＣＤ１９（９６．３％）、ｃＣＤ７９ａ（９２．６％）、ＣＤ２２（７０．４％）、
ＣＤ１０（６６．７％）、ＣＤ２０（４０．７％），非 特 异 性 早 期 标 志
中 国 实 验 诊 断 学 ２０１３ 年 １ 月 第 １７ 卷 第 １ 期
— １２５ —
后上机检测。
运 行 ＳＹＳＴＥＭ Ⅱ 程 序 上 机 检 测，用 ＦＬＯＷ
ＣＨＥＣＫ 校准 ＦＣＭ 的光路和流路，应 用 ＣＤ４５／ＳＳＣ
设 门 ，确 定 幼 稚 细 胞 群 ，分 析 其 抗 原 表 达 情 况 。 结 果
— １２４ —
Ｃｈｉｎ
１２９例急性白血病流式细胞术免疫分型的特点分析
刘 志 祥１ ，姚 忠 红２ ，李 瑞 明３ ，王 晓 勋３
（湖北医药学院附属太和医院 １．检验科；２．脊柱外科；３．生命科学研究所，湖北 十堰４４２０００）
免疫分型是用已知的单克隆抗体鉴定细胞表面 或 细 胞 内 的 免 疫 标 志 ，剖 析 细 胞 的 来 源 及 分 化 阶 段 ， 与 流 式 细 胞 术 联 合 应 用 使 诊 断 白 血 病 更 精 细 、全 面 ， 对为临床合理治 疗、判 断 预 后 提 供 科 学 依 据。 我 们 应用 ＣＤ４５／ＳＳＣ 设门的三色荧光流式细胞术对１２９ 例急性白血病患者 进 行 较 全 面 的 免 疫 分 型 检 测，对 其结果和诊断标准进行分析。 １ 材 料 与 方 法 １．１ 临床资料 ２００８年 ６ 月 至 ２０１０ 年 １２ 月 本 院 血 液 科 和 儿 科 急 性 白 血 病 门 诊 及 住 院 的 患 者 １２９ 例 ，男 ７１ 例 ，女 ５８ 例 ，年 龄 １－７１ 岁 。 其 中 急 性 髓 系 白血病（ＡＭＬ）９１ 例；Ｂ 细 胞 急 性 淋 巴 细 胞 白 血 病 （Ｂ－ＡＬＬ）２７ 例；Ｔ 细 胞 急 性 淋 巴 细 胞 白 血 病 （Ｔ－ ＡＬＬ）１１ 例 。 １．２ 主 要 仪 器 Ｂｅｃｋｍａｎ－Ｃｏｕｌｔｅｒ Ｅｐｉｃｓ ＸＬ 流 式
ＡＭＬ（９１ 例 ） １（１．１） ０（０）
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７５（８２．４） １９（２０．９） ７４（８１．３） ８０（８７．９） ５３（５８．２） ４５（４９．５） １７（１８．７） ８２（９０．１）
０（０） ３（３．３）
Ｂ－ＡＬＬ（２７ 例 ） ０（０）