食物中还原型抗坏血酸的测定
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食物中还原型抗坏血酸的测定2,6-二氯酚靛酚法
1. 测定原理
还原型抗坏血酸能还原染料2,6-二氯酚靛酚,该染料在酸性中呈红色,被还原后红色消失。还原型抗坏血酸还原2,6-二氯酚靛酚后,本身被氧化成脱氢抗坏血酸。在没有杂质干扰时,一定量的样品提取液还原标准2,6-二氯酚靛酚的量与样品中所含维生素C的量成正比。
2. 仪器设备
高速组织捣碎机
分析天平
漏斗
锥形瓶:50ml
容量瓶:250ml
微量滴定管:5ml
烧杯:250ml、50ml
移液管:5ml、2ml、1ml
3. 试剂
1%草酸溶液
2%草酸溶液
2,6-二氯酚靛酚溶液
20%抗坏血酸标准溶液
0.001N碘酸钾标准溶液
6%碘化钾溶液
1%淀粉溶液
4. 样品
甘蓝、青椒、菜花、桔子、猕猴桃
5. 操作步骤与计算
(1)标准维生素C溶液的标定
(2)2,6-二氯酚靛酚(染料)标定
(3)样品中维生素C的测定
6. 注意事项
(1)微量滴定管的使用:
a量程5ml,每小格0.02ml
b每过量一滴即2-3小格,掌握好终点
c加样时易产生气泡,要注意
d接头易碎,要小心使用
(2)样品取样后,应浸泡在已知量的2%草酸中,以免氧化,测定过程要迅速。
(3)测定样品时必须同时作一空白对照,样品溶液滴定的毫升数须扣除空白液滴定的毫升数。
(4)滴定开始时,染料应迅速加入,直至红色不立即消失,以后逐滴加入,并不断振荡,直到粉红色15s内不褪色为止。
样品中可能有其他杂质也能还原2,6-二氯酚靛酚,但一般
杂质还原该染料的速度均较抗坏血酸慢,所以滴定时以
15s红色不褪为终点。