茶氨酸测定方法
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HPLC法测定茶叶中游离氨基酸具体方法:
提取方法:准确称取1g 粉碎茶样于100ml 三角瓶中,加入80ml 沸蒸馏水,于80℃水浴中浸提2h;定容到100ml,取1mL,加入200uL 三氯甲烷(氯仿),颠倒20次,静置10min,转速12000r/min离心10 min,取上清液,转移水层至新的离心管,过滤膜,上样。
色谱柱:hypersil AA-ODS(2.1*200mm,5μm,Agilent)
流动相A: 25μM无水乙酸钠,0.018%三乙胺,0.3%四氢呋喃,乙酸调PH7.2 (500mL:1.7001g无水乙酸钠,加超纯水400ml溶解,90μL三乙胺,用冰醋酸调pH 至7.2,加入4mL四氢呋喃,定容至500mL)
流动相B:40%乙腈,40%甲醇,0.1%乙酸(500mL:200mL甲醇,200mL乙腈,0.5ml乙酸,定容至500mL)
流速:0.5mL
洗脱梯度: