外周血造血干细胞的采集
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儿童在维持治疗 的化疗 时，ＣＦＵ—ＧＭ增加 ６～５０倍 ，注 射环磷酰胺 ４ｇ／ｍ？后 血中 ＣＦＵ—ＧＭ峰值一般出现在用药后 约 １８天 。ｆ外 周血 白细胞 数后 １天 ）。外 周 血 ＣＦＵ—ＧＭ． １０００／ｍｉ血 的持续 时间为化疗时环磷酰胺 的用药剂量影 响 其对 ＰＢＳＣ的动员 效果 ，一般用药 总量 ４ｇ／ｍ２，一 次给予 效 果较好 。另一影响 因素是使用环磷酰胺与最后一次经疗的 间隔时间，问隔短 于一年时 ，动员效果欠佳 。
一 般于 化疗 后 １６ ２６天 ，即血 液恢 复 期 间 ，嗜 中性 和血 小板迅 速升 高时 ，收集 ＰＢＳＣ，每个 病人 收集 ５～８ 次 ，一般 于 上午 ９～１０时 采集 ，间隔 １～３天 ，每次 处 理 全血 限制 于 １００００ ｍｌ（一 般 ７０００—９０００ｍ１），全血 流速 为 ５０ｍ￣ｍｉｎ，ＡＣＤ—Ａ：全 血流 速 为 １：８～１：１０，每 次分 离可 获 得单 个 核细 胞 和 ＣＦＵ—ＧＭ，收 获 的 ＰＢＳＣ悬 浮 于 自体 血 浆和 ｌＯ％Ｚ．甲亚砜 中 ，按梯 度 降温法 保存 于液 氮液 中 ， 回输 时将其快 速投 入 ４２。Ｃ温水 中 ，融 化后 ，迅速输 给 患 者 。一 般 ＰＢＳＣ移 植后 ，血 液 系统 很快 得 到恢复 ：嗜 中性 细胞 的时间为 １０天左右 ，血小板的时间为 １１天左右。正常 人 ＰＢＳＣ在 一１９６。Ｃ保存 ４年其 ＣＲＵ—ＧＭ存活率为 ８６％。
细 胞 因 子 对 ＰＢＳＣ也 具 有 较 好 的 动 员 效 果 。 Ｓｏｃｉｎｓｋｉ 检测 恶性 肿瘤 患者 在接受 ＧＭ—ＣＳＦ后 ，血 液 中造血 前 体 细 胞 明显 增 加 ，Ｄｕｈｒｓｅｎ也 证 实 ＧＭ—ＣＳＦ可使 外 周 血 中 红 系 和 巨 核 细 胞 系 增 加 １００倍 ，其 高 峰 为 第 ４天 ，比 较 Ｇ—ＣＳＦ和 ＧＭ—ＣＳＦ在 动员 造血 前体 细胞 的效果 上发 现 ， Ｇ—ＣＳＦ作用较 好 。另外 ，ＩＬ—Ｉ能使 ＰＢＳＣ增 加 ２０倍 ，在治 疗 的第 ５天 达 到高 峰 ；叶酸 、聚阴 离子 化 合物 如 硫 酸 葡 聚糖 、肾上腺 皮质激 素等对 ＰＢＳＣ也 具有 明显 的动 员效 果 。同时 ，化 疗药 物与 细胞 因子 以及 细胞 因子 之间 在动 员 ＰＢＳＣ上具 有协 同作用 。 ２ ＰＢＳＣ 的 采 集 与 回 输
抗 肿瘤药 物对 造血 干 细胞有 不 同程度 的动 员作 用 ， 其 中，对环磷 酰胺 的干细胞 动员 作用 有进 一步 的研 究 。 如 ：环 磷 酰胺 静 注后 １周 ，外 周 血 ＣＦＵ—ＧＭ 浓度 增 至 ６．５～３８倍 ；ＴＯ 等 观 察 到 加 强 化 疗 ３周 后 ， 循 环 中 ＣＦＵ—ＧＭ数 量增 加 ２５倍 。
要收集 到 足够移 植数 量 的 ＰＢＳＣ，需 要 使用 血细胞 分 离 器（Ｖ３０、Ｖ５０、ＣＳ３０００等）。
现 在 ，普遍 采 用 ＣＳ一３０００或 ＣＳ一３０００ｐｌｕｓ血细 胞分 离 器 ，其 特点 为采 用持 续流 动方式 ，可迅 速处 理大 量血 ， 运行 过 程 由计算 机控 制 ，分 离效果 较好 。 常用 方法 如下 是 ：采 用程 序 ３（淋 巴细胞 收集程 序 。其特点 为收获 的单 个 核细 胞产 量高 ，但 带 有大量 的红 细胞 ，需去 除 ）。或修 改 的程序 １（血 小板 收集 程序 ：采用 粒细胞 分离 夹和 收集 夹 ，将 病人 的血细胞 比容 输入 分离器 ，界面探 测值 为 １５， 离 心 速 度 调 整 到 １６００ｒｐｍ）。
２０１０年 ４月下 第 ２卷 第 ８期
Ｖｏ１．２ Ｎｏ．８
中国 中医药咨讯
Ｊｏｕｒ ｎ ａｌ ｏｆ Ｃｈｉｎａ ＴｒａｄｉｔｉｏｎＭ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｉｎｆｏｒｍ￣ｉｏｎ
·５７ ·
外周 血造血干细胞 的采集
孙 萍 孙 莉 山东省淄博市 中心血站 山东 淄博 ２５５０３３ 山东省淄博市Βιβλιοθήκη Baidu张店 区第二人 民医院 山东 淄博 ２５５０３３
总之 ，ＰＢＳＣＴ由于其 灵 活性 和 独特 的优 点在 未来 的 应用将 更加 广泛 ，今后 应 深入探 讨高 效 收获 ＰＢＳＣ的方 法 ，以适 应 ＰＢＳＣＴ 的需 要 。
【关键词 】 外周血 干细胞 的动员 ；采集
近年 来 ，自体 外周 血干 细 胞 移植 （ＡＢＳＣＴ）已 成 为 继 自体 骨髓 移 植 之后 治 疗恶 性 血 液病 和 某 些 实体 肿 瘤 的 又一有 效 的辅助 方 法。与 骨髓 移植 比较 ，其特点 为 造血 及免疫 功能恢 复快 ，来源 方便 ，痛苦 小等 优点 ，但外 周 血 的祖细 胞和 多能造 血干 细胞 只 占骨 的 １／１０～１％，为 了采 集更 多数 量 的外周 血 造血 干细 胞 （ＰＢＳＣ），需要 用 血 细胞 分 离器采 集多 次 ，同时 ，也 需要 借助 造血 干细胞 动 员剂 ， 使 骨髓 或其 他部位 的造血 干细 胞进 入 血流 ，以提 高 ＰＢ— ｓｃ的单 次采集 效果 。本文将 介绍 近年来 采集 ＰＢＳＣ方 面 的 研 究 进 展 。 １ ＰＢＳＣ 的 动 员
ＣＳ３０００血 细 胞分 离 器 收 集儿 童 ＰＢＳＣ的方 法 与成 人 稍有 区别 。由于儿 童特 别是 幼儿 血液 总量 少 ，按 常规 方 法 进 入分 离 管道 的血 液常 常 大 于其 本 身 血液 总 量 的 ５０％，因此 ，常规 方法 可改 为 ：在仪 器用 盐水 初 始化 完成 后 ，在进 行 第 ２次初 始 化 ，其 液体 ：Ｔａｋａｕｅ用 ４００ｍｌ去除 白细胞 的红细 胞再 次初 始 化 ；Ｌａｓｋｕｙ用 ２５０ｍｌ照 射 的浓 缩 红 细 胞 ＋２００ｍｌ新 鲜 冷 冻 血浆 ，收 集 ＰＢＳＣ过 程 中用 ＡＣＤ—Ａ作 抗 凝 剂 ，其 与 全 血 比例 １：１３；或 者 液 体 用 ２５０ｍｌ照 射 的 浓 缩 红 细 胞 ＋１００ｍｌ新 鲜 冷 冻 血 浆 ＋１００ｍ１５％白蛋 白，抗凝 剂 ＡＣＤ—Ａ 中加 人肝 素 ，控制 肝素 剂 量 为 １５００ｕ／ｈ，ＡＣＤ：全 血 流 速 为 １：２０～１：２５。 运 行 开 始 时 ，调全 血 流速 为 １０ｍ￣ｍｉｎ，然后 逐渐 增加 到合 适 的速 度 。用 以上 方 法 已成 功 地 为 体 重 小 于 １０ｋｇ的 幼 儿 行 ＰＢＳＣ移 植 ，并 取 得 了 满 意 的效 果 。
一 般于 化疗 后 １６ ２６天 ，即血 液恢 复 期 间 ，嗜 中性 和血 小板迅 速升 高时 ，收集 ＰＢＳＣ，每个 病人 收集 ５～８ 次 ，一般 于 上午 ９～１０时 采集 ，间隔 １～３天 ，每次 处 理 全血 限制 于 １００００ ｍｌ（一 般 ７０００—９０００ｍ１），全血 流速 为 ５０ｍ￣ｍｉｎ，ＡＣＤ—Ａ：全 血流 速 为 １：８～１：１０，每 次分 离可 获 得单 个 核细 胞 和 ＣＦＵ—ＧＭ，收 获 的 ＰＢＳＣ悬 浮 于 自体 血 浆和 ｌＯ％Ｚ．甲亚砜 中 ，按梯 度 降温法 保存 于液 氮液 中 ， 回输 时将其快 速投 入 ４２。Ｃ温水 中 ，融 化后 ，迅速输 给 患 者 。一 般 ＰＢＳＣ移 植后 ，血 液 系统 很快 得 到恢复 ：嗜 中性 细胞 的时间为 １０天左右 ，血小板的时间为 １１天左右。正常 人 ＰＢＳＣ在 一１９６。Ｃ保存 ４年其 ＣＲＵ—ＧＭ存活率为 ８６％。
细 胞 因 子 对 ＰＢＳＣ也 具 有 较 好 的 动 员 效 果 。 Ｓｏｃｉｎｓｋｉ 检测 恶性 肿瘤 患者 在接受 ＧＭ—ＣＳＦ后 ，血 液 中造血 前 体 细 胞 明显 增 加 ，Ｄｕｈｒｓｅｎ也 证 实 ＧＭ—ＣＳＦ可使 外 周 血 中 红 系 和 巨 核 细 胞 系 增 加 １００倍 ，其 高 峰 为 第 ４天 ，比 较 Ｇ—ＣＳＦ和 ＧＭ—ＣＳＦ在 动员 造血 前体 细胞 的效果 上发 现 ， Ｇ—ＣＳＦ作用较 好 。另外 ，ＩＬ—Ｉ能使 ＰＢＳＣ增 加 ２０倍 ，在治 疗 的第 ５天 达 到高 峰 ；叶酸 、聚阴 离子 化 合物 如 硫 酸 葡 聚糖 、肾上腺 皮质激 素等对 ＰＢＳＣ也 具有 明显 的动 员效 果 。同时 ，化 疗药 物与 细胞 因子 以及 细胞 因子 之间 在动 员 ＰＢＳＣ上具 有协 同作用 。 ２ ＰＢＳＣ 的 采 集 与 回 输
抗 肿瘤药 物对 造血 干 细胞有 不 同程度 的动 员作 用 ， 其 中，对环磷 酰胺 的干细胞 动员 作用 有进 一步 的研 究 。 如 ：环 磷 酰胺 静 注后 １周 ，外 周 血 ＣＦＵ—ＧＭ 浓度 增 至 ６．５～３８倍 ；ＴＯ 等 观 察 到 加 强 化 疗 ３周 后 ， 循 环 中 ＣＦＵ—ＧＭ数 量增 加 ２５倍 。
要收集 到 足够移 植数 量 的 ＰＢＳＣ，需 要 使用 血细胞 分 离 器（Ｖ３０、Ｖ５０、ＣＳ３０００等）。
现 在 ，普遍 采 用 ＣＳ一３０００或 ＣＳ一３０００ｐｌｕｓ血细 胞分 离 器 ，其 特点 为采 用持 续流 动方式 ，可迅 速处 理大 量血 ， 运行 过 程 由计算 机控 制 ，分 离效果 较好 。 常用 方法 如下 是 ：采 用程 序 ３（淋 巴细胞 收集程 序 。其特点 为收获 的单 个 核细 胞产 量高 ，但 带 有大量 的红 细胞 ，需去 除 ）。或修 改 的程序 １（血 小板 收集 程序 ：采用 粒细胞 分离 夹和 收集 夹 ，将 病人 的血细胞 比容 输入 分离器 ，界面探 测值 为 １５， 离 心 速 度 调 整 到 １６００ｒｐｍ）。
２０１０年 ４月下 第 ２卷 第 ８期
Ｖｏ１．２ Ｎｏ．８
中国 中医药咨讯
Ｊｏｕｒ ｎ ａｌ ｏｆ Ｃｈｉｎａ ＴｒａｄｉｔｉｏｎＭ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｉｎｆｏｒｍ￣ｉｏｎ
·５７ ·
外周 血造血干细胞 的采集
孙 萍 孙 莉 山东省淄博市 中心血站 山东 淄博 ２５５０３３ 山东省淄博市Βιβλιοθήκη Baidu张店 区第二人 民医院 山东 淄博 ２５５０３３
总之 ，ＰＢＳＣＴ由于其 灵 活性 和 独特 的优 点在 未来 的 应用将 更加 广泛 ，今后 应 深入探 讨高 效 收获 ＰＢＳＣ的方 法 ，以适 应 ＰＢＳＣＴ 的需 要 。
【关键词 】 外周血 干细胞 的动员 ；采集
近年 来 ，自体 外周 血干 细 胞 移植 （ＡＢＳＣＴ）已 成 为 继 自体 骨髓 移 植 之后 治 疗恶 性 血 液病 和 某 些 实体 肿 瘤 的 又一有 效 的辅助 方 法。与 骨髓 移植 比较 ，其特点 为 造血 及免疫 功能恢 复快 ，来源 方便 ，痛苦 小等 优点 ，但外 周 血 的祖细 胞和 多能造 血干 细胞 只 占骨 的 １／１０～１％，为 了采 集更 多数 量 的外周 血 造血 干细 胞 （ＰＢＳＣ），需要 用 血 细胞 分 离器采 集多 次 ，同时 ，也 需要 借助 造血 干细胞 动 员剂 ， 使 骨髓 或其 他部位 的造血 干细 胞进 入 血流 ，以提 高 ＰＢ— ｓｃ的单 次采集 效果 。本文将 介绍 近年来 采集 ＰＢＳＣ方 面 的 研 究 进 展 。 １ ＰＢＳＣ 的 动 员
ＣＳ３０００血 细 胞分 离 器 收 集儿 童 ＰＢＳＣ的方 法 与成 人 稍有 区别 。由于儿 童特 别是 幼儿 血液 总量 少 ，按 常规 方 法 进 入分 离 管道 的血 液常 常 大 于其 本 身 血液 总 量 的 ５０％，因此 ，常规 方法 可改 为 ：在仪 器用 盐水 初 始化 完成 后 ，在进 行 第 ２次初 始 化 ，其 液体 ：Ｔａｋａｕｅ用 ４００ｍｌ去除 白细胞 的红细 胞再 次初 始 化 ；Ｌａｓｋｕｙ用 ２５０ｍｌ照 射 的浓 缩 红 细 胞 ＋２００ｍｌ新 鲜 冷 冻 血浆 ，收 集 ＰＢＳＣ过 程 中用 ＡＣＤ—Ａ作 抗 凝 剂 ，其 与 全 血 比例 １：１３；或 者 液 体 用 ２５０ｍｌ照 射 的 浓 缩 红 细 胞 ＋１００ｍｌ新 鲜 冷 冻 血 浆 ＋１００ｍ１５％白蛋 白，抗凝 剂 ＡＣＤ—Ａ 中加 人肝 素 ，控制 肝素 剂 量 为 １５００ｕ／ｈ，ＡＣＤ：全 血 流 速 为 １：２０～１：２５。 运 行 开 始 时 ，调全 血 流速 为 １０ｍ￣ｍｉｎ，然后 逐渐 增加 到合 适 的速 度 。用 以上 方 法 已成 功 地 为 体 重 小 于 １０ｋｇ的 幼 儿 行 ＰＢＳＣ移 植 ，并 取 得 了 满 意 的效 果 。