神经实验7 家兔大脑皮层刺激效应及诱发电位引导
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实验7 家兔大脑皮层刺激效应(一)
一、实验目的
1.学习哺乳动物的开颅方法。
2.观察大脑皮层运动区的刺激效应。
二、实验原理
大脑皮层运动区是躯体运动机能的最高级中枢,电刺激该区的不同部位,可以引起躯体不同部位的肌肉运动。
三、实验器材
家兔、常用手术器械、咬骨钳、骨钻、止血钳、剪毛剪、计算机采集系统、银丝电极(双电极)、突体手术台、石蜡油、20%氨基甲酸乙酯、棉球、温热生理盐水。
四、实验步骤
1.取一只家兔,耳缘静脉注射氨基甲酸乙酯(1g/kg体重),将其麻醉后腹位
固定于手术台上。剪毛剪将头顶部被毛剪去,再用手术刀由眉骨至枕骨部纵向切开皮肤,沿中线切开骨膜。用手术刀柄自切口处向两侧剖开骨膜,暴露额骨和顶骨。用骨钻在一侧的顶骨上开孔(勿伤及脑组织)后,将咬骨钳小心伸入孔内,自孔处向四周咬骨以扩展创口。向前开颅至额骨前部,向后开至顶骨后部及人字缝之前(切勿掀动人字缝之前的顶骨,以免出血不止)。
按开颅区域,暴露双侧大脑半球。
2.用眼科剪小心剪开脑膜,暴露脑组织。将温热生理盐水浸湿的薄棉片盖在
裸露的大脑皮层上(或滴几滴石蜡油)防止干燥。
3.放松动物四肢,用棉球吸干脑表面的液体,。将无关电极固定在头部切开
的皮肤上,先用刺激电极接触皮下肌肉,调节刺激强度。以引起肌肉收缩的最小刺激强度及25~30Hz的频率刺激大脑皮层的不同区域,观察躯体肌肉活动的反应。绘出大脑半球背面的轮廓图,标出躯体肌肉运动的代表区域。思考题:根据实验结果,说明大脑皮层运动区的机能特征。
实验 7 家兔皮层诱发电位(二)
一、实验目的
1、学习记录大脑皮层诱发电位的方法。
2、观察大脑皮层诱发电位的波形。
二、实验原理
大脑皮层诱发电位是指感觉传入系统受到刺激时,在大脑皮层上某一局限区域所引导的电位变化。本实验是以适当的电刺激作用于左前肢的浅桡神经,在右侧大脑皮层的感觉区引导家兔的诱发电位。用这种方法可以确定动物的皮层感觉区,在研发皮层机能定位上起着重要作用。由于大脑皮层随时都存在自发电活动,诱发电位经常出现在自发电活动的背景上。为了压低自发电活动,使诱发电位清晰的引导出来,实验时常将动物深度麻醉。
三、实验器材
家兔、常用手术器械、骨钻、骨钳、手术台、马蹄形头固定器、示波器、前置放大器、刺激器、屏蔽箱、皮层引导电极(直径1mm银丝,顶端呈球形)、保护电极、1%氯醛糖与10%氨基甲酸乙酯等量混合麻醉剂、骨蜡。石蜡油、生理盐水。
四、实验步骤
1、麻醉
取家兔一只,称重,以1%氯醛糖与10%氨基甲酸乙酯混合麻醉剂(5ml/kg体重)耳缘静脉注射。在实验过程中,以每小时0.5ml/kg体重的维持量皮下注射补充麻醉剂,维持一定深度的麻醉水平。麻醉深度一般以呼吸频率为20次/min为宜。此时皮层自发性电活动较小。
2、动物的固定
在左、右颧骨突处剪毛后作一小切口,分离骨膜,用骨钻在颧骨突上钻一小孔。将家兔俯卧位,用马蹄形头固定器两侧的尖头金属棒分别嵌入左、右两侧的小孔内。将固定器前方的金属棒尖端插在两上门齿的齿缝之间。三点固定稳妥后,旋紧螺旋。此时家兔头部处于水平位置并略高于躯干部。
3、浅桡神经的分离
在左前肢肘部桡侧剪毛,切开皮肤,寻找分离浅桡神经约3cm,用蘸有温热石蜡油(38℃)的药棉包裹保护之,并将皮肤切口关闭备用。
4、暴露大脑皮层
按实验的方法开颅,暴露大脑半球。
5、仪器的连接与参数的调整
皮层引导电极与前置放大器输入端连接,输出端连接示波器上线。刺激电极连接刺激器输出。前置放大器增益为100,高频滤波为100Hz,时间常数为1秒。示波器灵敏度为50~100mV/cm,扫描与刺激器同步外触发,扫描速度为
20~100ms/cm。刺激频率1Hz,波宽0.2ms。
6、将引导电极置于大脑皮层右侧的前肢一感觉区。无关电极夹于头皮切口边缘,动物需另外接地。
7、调节示波器呈连续扫描状态,观察大脑皮层的自发电活动。
8、调节示波器的扫描方式为与刺激器同步触发扫描。以单个脉冲刺激浅桡神经,可见同侧肢体轻微抖动,并在荧光屏上出现刺激伪迹。逐渐增加刺激强度,可在伪迹后观察到诱发电位。仔细调整引导电极在皮层表面的位置,逐点探测,引导出振幅较大的诱发电位。注意观察诱发电位的潜伏期、主反应与后发放的时程,以及主反应的相位与振幅。
五.注意事项
1、实验需在屏蔽室或屏蔽箱内进行,以防干扰。
2、皮层诱发电位对温度十分敏感,在剪开脑膜后,要经常更换温热石蜡油。
3、皮层引导电极以轻触皮层为佳,不可过分压迫皮层,以免影响观察。
思考题
1、皮层诱发电位包括哪些波形成分?
2、皮层诱发电位是怎样产生的?主反应与后反应与什么躯体感觉系统传入相关?