病原性球菌及检验
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
液体：沉淀生长（絮状或颗粒状）。 普通琼脂平板：不生长。 血液琼脂平板：
（三）生化反应
活泼 分解多种糖类、蛋白质、氨基酸。 菊糖（-） 胆汁溶菌试验（-） （区别甲链与肺链） optochin敏感试验（-） 触酶（-）（区别于葡萄球菌属）
（四）抗原构造
１、多糖抗原（C抗原）： 群特异性。
２、蛋白抗原（M、T、R、S） 型特异性，与致病有关的是M蛋白抗原。
条件：营养要求较高，兼性厌氧菌， 5-10% C02生长
最好。 产生自溶酶。
液体：培养24h呈均匀混浊，后期因产生自溶而变得澄
清。
普通琼脂平板：不生长。
血液琼脂平板：灰白色，圆形，扁平，较小，周围有
草绿色溶血环（α溶血）
（三）生化反应
活泼 分解多种糖类。
菊糖（多数 + ）
胆汁溶菌试验（+） Optochin试验(+)
荚膜变异：有荚膜的光滑（S）型菌有毒力， 失去荚膜的粗糙（R）型毒力减低或消失。
二、致病性和免疫性
（一）致病物质
1、荚膜： 肺炎球菌的致病力，主要是荚膜的抗吞噬作用。
2、蛋白粘附素、脂磷壁酸、肺炎链球菌溶素O等 溶血毒素“O”：自溶后释放，能溶解人和动物
的红细胞，高浓度对动物有坏死及致死作用。
（二）所致疾病
（四）结果评价和报告
1、金黄色葡萄球菌：无论任何标本中分离到 均 应鉴定并报告临床。
2、表皮葡萄球菌及腐生葡萄球菌：从输液导 管、人工植入组织中分离到，应视为致病菌。
3、尿培养计数：>103-104为阳性菌尿标准。 4、其他凝固酶阴性葡萄球菌：引起感染流行
或治疗失败时，应鉴定到种。 5、金黄色葡萄球菌（MRSA)：头孢菌素类
２、按凝固酶分类：
凝固酶阴性、凝固酶阳性葡萄球菌
３、按噬菌体分类：金葡菌分为5群26型
4. 据色素、生化反应分：
金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌
三种葡萄球菌的主要性状
性状
金黄色 葡萄球菌
色素
金黄色
血浆凝固酶
+
α溶血素
+
耐热核酸酶
+
甘露醇
+
SPA
+
致病性
强
表皮 葡萄球菌
白色 － － －
－
－ 弱
区别甲链与肺链
（四）抗原构造
１、荚膜多糖抗原： 据此将肺炎链球菌分85型，对人致病的有20 多型。 Ⅰ-Ⅲ型引起大叶性肺炎。 ２、菌体多糖抗原： 可与CRP反应，产生沉淀。 3、M蛋白抗原： 型特异性。
（五）抵抗力
较弱，加热56℃ ，20min即死亡。 对一般消毒剂敏感，对干燥抵抗力较强。
（六）变异性
（五）分类
２、按抗原结构分类：
按C抗原分群：ABCD…20群，对人致病的以A 群为主。
按M蛋白分型：如A群：100个型，B群：4型， C群：13个型。
（六）抵抗力 不强，60℃30min杀死，对多种消毒剂敏 感。 乙链：对青霉素、四环素、红霉素等敏感。
二、致病性和免疫性
（一）致病物质
1、链球菌溶血素 （1）链球菌溶血素O (SLO) SLO抗体 抗链球菌溶血素O试验：协助诊断风湿热（>1:400) （2）链球菌溶血素S (SLS)：无抗原性。 2、致热外毒素（猩红热毒素/红疹毒素） 3、M蛋白
学习目的与要求
1. 简述病原性球菌的概念及种类。 2. 熟悉常见病原性球菌的主要生物学特性、
临床意义。 3. 说出葡萄球菌、链球菌、脑膜炎奈瑟菌和 淋病奈瑟菌的检验程序和检验方法。
对人有致病性的球菌主要引起化脓性炎症, 又称化脓性球菌。主要包括有
1、G+球菌：葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌。
2、G-球菌：脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、卡他 布兰汉菌等。
（三）生化反应 活泼 分解多种糖类、蛋白质、氨基酸。
(如：葡萄糖，麦芽糖，蔗糖，甘露醇） 触酶（＋）（区别于链球菌属）
（四）抗原构造 １、蛋白抗原（ＳＰＡ） ２、多糖抗原
金黄色葡萄球菌：核糖醇磷壁酸 （检测磷壁酸Ａｂ有助于金葡菌感染诊断）
凝固酶（－）：甘油磷壁酸
（五）分类:
３２个种及亚种
１、按色素分类：金、白、柠
Optochin敏感试验阳性： 取肉汤培养液均匀涂 于血平板上用optochin纸 片贴于接种区中央（或分 区划线法，纸片贴于1-2 区），35℃需氧培养过夜， 抑菌圈 >18mm。
Optochin test
肺炎链球菌的主要鉴定依据
1、镜下形态：革兰阳性球菌，矛头状成双 排列，平端相对，尖端向外；
第一节 葡萄球菌属
(Staphylococcus)
一、生 物 学 特 性
（一）形态与染色
G+， 球形，无鞭毛、无芽孢，呈葡萄串状排列。
（二）培养特性
营养：要求不高，耐盐。 液体：均匀浑浊生长 普通琼脂平板： 血液琼脂平板： 高盐甘露醇平板：金黄色葡萄球菌为淡橙黄色菌落；
其他葡萄球菌为白色菌落。
抗生素体外药敏试验为敏感时，不应报告， 因体内试验已证实MRSA对该类抗生素耐药。
第二节 链球菌属
(Streptococcus)
一、 链 球 菌
一、生 物 学 特 性
（一）形态与染色 G+，球形或椭
圆形，呈链状排列， 无鞭毛、无芽胞， 有荚膜。
一、生 物 学 特 性
（二）培养特性
条件：营养要求较高，多数为兼性厌氧菌，少 数专性厌氧。
3、核蛋白抗原：无特异性。
链球菌抗原构造模式图
核蛋白 抗原
多糖抗原 蛋白质抗原 荚膜
（五）分类 40个种及亚种
１、按溶血情况分类： （1）甲型溶血性链球菌：菌落周围有1～2mm宽的 草绿溶血环，称甲型溶血或α溶血。为条件致病菌。 （2）乙型溶血性链球菌：菌落周围形成一个2～ 4mm宽的透明溶血环，称乙型溶血或β溶血。又称溶 血性链球菌。致病力强，引起多种疾病。 （3）丙型链球菌：无溶血环，不致病
有草绿色溶血环（α溶血）
3、鉴定试验 （1）荚膜肿胀试验
（2）胆汁溶菌试验：+
（3）Optochin试验：+
（4）菊糖发酵试验：+ （5）小鼠毒力试验：
有毒力的菌株，接种后12-36h，死亡。
胆汁溶菌试验阳性：
加入胆汁 或10%去氧胆 酸钠，37℃， 5-10min，激 活本菌的自溶 酶，出现溶菌 现象。
⑥抗O试验：
风湿性关节炎、急性肾小球肾炎，
效价>400为+
二、肺炎链球菌
(S.pneumoniae)
属链球菌科，链球菌属。 广泛分布于自然界，主要寄生于人类上呼吸道， 多数不致病。
一、生 物 学 特 性
（一）形态与染色 G+， 矛头状，
成双（或短链）排 列，无鞭毛、无芽 胞，有荚膜。
（二）培养特性
分：结合型凝固酶、游离型凝固酶。 鉴别金黄色葡萄球菌的重要指标。 2．葡萄球菌溶血素（staphylolysin）
3．杀白细胞素（leukocidin） 4．肠毒素（enterotoxin）：
（A、B、C1、C2、C3、D、E、G、H 9个 血清型） 5．表皮剥脱毒素（exfoliative toxin） 6. 毒性休克综合征毒素1（toxic shock syndrome toxin 1, TSST1）
初报
分离培养
（血平板）
挑选可疑菌落 纯培养
增菌培养（葡萄糖肉 汤、硫酸镁肉汤）
兔血清肉汤 小白鼠毒力试验
胆汁溶菌试验 菊糖发酵 Optochin试验 药敏试验
涂片 荚膜肿胀试验
报告
检验方法
1、直接镜检 适用于：痰、脓、脑脊液标本。 报告：“找到肺炎链球菌”
2、分离培养 硫酸镁肉汤：均匀混浊生长，有绿色荧光。 血平板：灰白色，圆形，扁平，较小，周围
肉汤增菌
② 脓液、咽拭子等 血平板分离
（3）鉴定链球菌的主要试验： 根据形态、菌落、溶血情况进行： ①杆菌肽敏感试验：A群敏感(d>10mm) ②Optochin敏感试验：肺炎链球菌d>18mm，
d<15mm为阴性。
③胆汁溶菌试验：肺炎链球菌+ ④CAMP试验：Ｂ群无乳链球菌为＋
⑤血清学鉴定：
试剂盒STREPTEX。用亚硝酸抽提待测 菌的群特异性抗原，分别与包被有抗体的 胶乳颗粒反应。
腐生 葡萄球菌 白色或柠檬色
－ － －
－
－ 无
（六）抵抗力 无芽胞菌中最强，耐干燥，对石炭酸、
升汞、龙胆紫敏感。 易产生耐药性变异，如：耐甲氧西林金
黄色葡萄球菌（MRSA）。MRSA常呈多 重耐药，对青霉素、氧氟沙星及红霉素的 敏感率分别为1.3%、3%及14%。
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）
2、血平板菌落特点：直径0.5-1.5mm，灰白 色，半透明，光滑（有些菌株为粘液状），扁平， 周围有草绿色溶血环。
培养或放置24h以上，菌落中央可塌陷，呈脐 窝状。
4、透明质酸酶 5、链激酶 6、链道酶
（二）所致疾病
主要由A群链球菌引起。 1、化脓性感染：由皮肤伤口侵入，经呼吸道侵入，其他
途径（如产褥热、蜂窝组织炎）
特点：病灶界限不清,脓汁稀薄
2．中毒性疾病：猩红热 由产生致热外毒素的A族 链球菌所致的急性呼吸道传染病。
二、致病性和免疫性
3．变态反应性疾病： 风湿热 急性肾小球肾炎
（一）标本采集 根据病情采集标本 种类：脓液、伤口分泌物、穿刺液、
血液、尿液、痰液、脑脊液、粪便等。 注意：无菌操作，避免污染。
（二）葡萄球菌检验程序
脓液、咽拭子、穿刺液 尿液、痰液
脑脊液
血液
粪便、呕吐 物
直接涂片染色
初报
分离培养 （血平板）
分离培养
增菌培养 （高盐甘露醇 平板）
涂片染色 血浆凝固酶 耐热核酸酶 其他鉴定试验
取可疑菌落
鉴定试验
药敏试验
报告
（三）检验方法
1、直接涂片
适用于：正常情况下无菌的标本（如脑脊液） 伴有炎症细胞的其他体液标本、脓液等
初步报告： “查见革兰阳性葡萄状排列球菌，疑
为葡萄球菌” 或：“查见类似葡萄球菌的革兰阳性球
菌”
2、分离培养
血液标本5ml
脑脊液、脓液、
50ml葡萄糖肉汤（增菌） 穿刺液、咽拭、 尿液
分离培养
血平板（5%CO2）
增菌培养 (5%CO2葡萄糖肉汤)
可ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ菌落 鉴定试验
血清学鉴定 杆菌肽试验 optochin 胆汁溶菌试验 其他鉴定
（分群）
敏感试验
试验
（三） 链球菌的检验方法
（1）直接镜检： （痰、脓、穿刺液、
咽拭子等） 初报：发现G+球菌，
呈链状排列
（2）分离培养： ① 血液、脑脊液
粪便、 呕吐物
无菌（7天）
浑浊
报告： 无菌生长
血平板
高盐甘露 醇平板
（三）检验方法
3、鉴定试验
（1）血浆凝固酶试验：金黄色葡萄球菌（+） （2）甘露醇发酵试验：金黄色葡萄球菌（+） （3）耐热核酸酶试验：金黄色葡萄球菌（+） （４）肠毒素测定： 金黄色葡萄球菌产生 （5）SPA检测： 金黄色葡萄球菌 （6）凝固酶阳性和凝固酶阴性的葡萄球菌鉴定 （7）API葡萄球菌鉴定试剂盒
（二）所致疾病
1．侵袭性疾病： （1）皮肤软组织感染 特点：病灶局限且脓汁粘稠
（2）内脏器官感染 （3）全身感染 （4）尿路感染
2．毒素性疾病
（1）食物中毒 （2）烫伤样皮肤综合征 由表皮剥脱毒素引起。 （3）毒性休克综合征 由TSST1引起 （4）假膜性肠炎
3、凝固酶阴性葡萄球菌的致病性
人类凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）感染中 以表皮葡萄球菌的感染最为常见。
长期住院、反复使用各种广谱抗菌药物、烧伤或 有伤口的病人及与MRSA定植或感染的病人接触都 是造成院内MRSA流行的危险因素。MRSA定植或 感染的人员及院内环境污染是引起院内流行的主要 来源。
MRSA定植或感染的人员及院内环境污染是引 起院内流行的主要来源。
二、致病性和免疫性
(一)致病物质
金黄色葡萄球菌产生多种侵袭性酶与外毒素。 1．血浆凝固酶（coagulase)：
CNS主要引起以下几种感染：泌尿系感染， 细菌性心内膜炎，败血症等，其中大多为医 院内感染。此外，心脏起搏器安装、置换人 工心脏瓣膜、长期腹膜透析、静脉滴注等亦 可造成凝固酶阴性葡萄球菌的感染。
三、微 生 物 学 检 验
（一）标本采集 （二）检验程序 （三）检验方法
三、微 生 物 学 检 验
存在于正常人上呼吸道，为条件致病菌，仅在人 体抵抗力下降时才引起疾病。
可引起：大叶性肺炎，胸膜炎，脓胸，慢性支 气管炎，中耳炎，脑膜炎，败血症等。
三、微生物学检验
（一）标本采集
痰液，脓液，血液，脑脊液等。
（二）检验程序 （三）检验方法
检验程序
痰、脓
脑脊液
血液
直接涂片
革兰染色、美兰染色 荚膜肿胀试验
4．其他疾病： 甲型（草绿色）链球菌：引起亚急性细菌性心内
膜炎。
三、微生物学检验
（一）标本采集 （二）检验程序 （三）检验方法
（一）标本采集 根据病情采集标本 种类：脓液、鼻咽拭子、血液等 风湿热查血清抗体
（二） 链球菌的检验程序
痰、脓、穿刺 液咽拭子等
脑脊液
血液
直接涂片 测抗原 染色
初步报告
（三）生化反应
活泼 分解多种糖类、蛋白质、氨基酸。 菊糖（-） 胆汁溶菌试验（-） （区别甲链与肺链） optochin敏感试验（-） 触酶（-）（区别于葡萄球菌属）
（四）抗原构造
１、多糖抗原（C抗原）： 群特异性。
２、蛋白抗原（M、T、R、S） 型特异性，与致病有关的是M蛋白抗原。
条件：营养要求较高，兼性厌氧菌， 5-10% C02生长
最好。 产生自溶酶。
液体：培养24h呈均匀混浊，后期因产生自溶而变得澄
清。
普通琼脂平板：不生长。
血液琼脂平板：灰白色，圆形，扁平，较小，周围有
草绿色溶血环（α溶血）
（三）生化反应
活泼 分解多种糖类。
菊糖（多数 + ）
胆汁溶菌试验（+） Optochin试验(+)
荚膜变异：有荚膜的光滑（S）型菌有毒力， 失去荚膜的粗糙（R）型毒力减低或消失。
二、致病性和免疫性
（一）致病物质
1、荚膜： 肺炎球菌的致病力，主要是荚膜的抗吞噬作用。
2、蛋白粘附素、脂磷壁酸、肺炎链球菌溶素O等 溶血毒素“O”：自溶后释放，能溶解人和动物
的红细胞，高浓度对动物有坏死及致死作用。
（二）所致疾病
（四）结果评价和报告
1、金黄色葡萄球菌：无论任何标本中分离到 均 应鉴定并报告临床。
2、表皮葡萄球菌及腐生葡萄球菌：从输液导 管、人工植入组织中分离到，应视为致病菌。
3、尿培养计数：>103-104为阳性菌尿标准。 4、其他凝固酶阴性葡萄球菌：引起感染流行
或治疗失败时，应鉴定到种。 5、金黄色葡萄球菌（MRSA)：头孢菌素类
２、按凝固酶分类：
凝固酶阴性、凝固酶阳性葡萄球菌
３、按噬菌体分类：金葡菌分为5群26型
4. 据色素、生化反应分：
金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌
三种葡萄球菌的主要性状
性状
金黄色 葡萄球菌
色素
金黄色
血浆凝固酶
+
α溶血素
+
耐热核酸酶
+
甘露醇
+
SPA
+
致病性
强
表皮 葡萄球菌
白色 － － －
－
－ 弱
区别甲链与肺链
（四）抗原构造
１、荚膜多糖抗原： 据此将肺炎链球菌分85型，对人致病的有20 多型。 Ⅰ-Ⅲ型引起大叶性肺炎。 ２、菌体多糖抗原： 可与CRP反应，产生沉淀。 3、M蛋白抗原： 型特异性。
（五）抵抗力
较弱，加热56℃ ，20min即死亡。 对一般消毒剂敏感，对干燥抵抗力较强。
（六）变异性
（五）分类
２、按抗原结构分类：
按C抗原分群：ABCD…20群，对人致病的以A 群为主。
按M蛋白分型：如A群：100个型，B群：4型， C群：13个型。
（六）抵抗力 不强，60℃30min杀死，对多种消毒剂敏 感。 乙链：对青霉素、四环素、红霉素等敏感。
二、致病性和免疫性
（一）致病物质
1、链球菌溶血素 （1）链球菌溶血素O (SLO) SLO抗体 抗链球菌溶血素O试验：协助诊断风湿热（>1:400) （2）链球菌溶血素S (SLS)：无抗原性。 2、致热外毒素（猩红热毒素/红疹毒素） 3、M蛋白
学习目的与要求
1. 简述病原性球菌的概念及种类。 2. 熟悉常见病原性球菌的主要生物学特性、
临床意义。 3. 说出葡萄球菌、链球菌、脑膜炎奈瑟菌和 淋病奈瑟菌的检验程序和检验方法。
对人有致病性的球菌主要引起化脓性炎症, 又称化脓性球菌。主要包括有
1、G+球菌：葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌。
2、G-球菌：脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、卡他 布兰汉菌等。
（三）生化反应 活泼 分解多种糖类、蛋白质、氨基酸。
(如：葡萄糖，麦芽糖，蔗糖，甘露醇） 触酶（＋）（区别于链球菌属）
（四）抗原构造 １、蛋白抗原（ＳＰＡ） ２、多糖抗原
金黄色葡萄球菌：核糖醇磷壁酸 （检测磷壁酸Ａｂ有助于金葡菌感染诊断）
凝固酶（－）：甘油磷壁酸
（五）分类:
３２个种及亚种
１、按色素分类：金、白、柠
Optochin敏感试验阳性： 取肉汤培养液均匀涂 于血平板上用optochin纸 片贴于接种区中央（或分 区划线法，纸片贴于1-2 区），35℃需氧培养过夜， 抑菌圈 >18mm。
Optochin test
肺炎链球菌的主要鉴定依据
1、镜下形态：革兰阳性球菌，矛头状成双 排列，平端相对，尖端向外；
第一节 葡萄球菌属
(Staphylococcus)
一、生 物 学 特 性
（一）形态与染色
G+， 球形，无鞭毛、无芽孢，呈葡萄串状排列。
（二）培养特性
营养：要求不高，耐盐。 液体：均匀浑浊生长 普通琼脂平板： 血液琼脂平板： 高盐甘露醇平板：金黄色葡萄球菌为淡橙黄色菌落；
其他葡萄球菌为白色菌落。
抗生素体外药敏试验为敏感时，不应报告， 因体内试验已证实MRSA对该类抗生素耐药。
第二节 链球菌属
(Streptococcus)
一、 链 球 菌
一、生 物 学 特 性
（一）形态与染色 G+，球形或椭
圆形，呈链状排列， 无鞭毛、无芽胞， 有荚膜。
一、生 物 学 特 性
（二）培养特性
条件：营养要求较高，多数为兼性厌氧菌，少 数专性厌氧。
3、核蛋白抗原：无特异性。
链球菌抗原构造模式图
核蛋白 抗原
多糖抗原 蛋白质抗原 荚膜
（五）分类 40个种及亚种
１、按溶血情况分类： （1）甲型溶血性链球菌：菌落周围有1～2mm宽的 草绿溶血环，称甲型溶血或α溶血。为条件致病菌。 （2）乙型溶血性链球菌：菌落周围形成一个2～ 4mm宽的透明溶血环，称乙型溶血或β溶血。又称溶 血性链球菌。致病力强，引起多种疾病。 （3）丙型链球菌：无溶血环，不致病
有草绿色溶血环（α溶血）
3、鉴定试验 （1）荚膜肿胀试验
（2）胆汁溶菌试验：+
（3）Optochin试验：+
（4）菊糖发酵试验：+ （5）小鼠毒力试验：
有毒力的菌株，接种后12-36h，死亡。
胆汁溶菌试验阳性：
加入胆汁 或10%去氧胆 酸钠，37℃， 5-10min，激 活本菌的自溶 酶，出现溶菌 现象。
⑥抗O试验：
风湿性关节炎、急性肾小球肾炎，
效价>400为+
二、肺炎链球菌
(S.pneumoniae)
属链球菌科，链球菌属。 广泛分布于自然界，主要寄生于人类上呼吸道， 多数不致病。
一、生 物 学 特 性
（一）形态与染色 G+， 矛头状，
成双（或短链）排 列，无鞭毛、无芽 胞，有荚膜。
（二）培养特性
分：结合型凝固酶、游离型凝固酶。 鉴别金黄色葡萄球菌的重要指标。 2．葡萄球菌溶血素（staphylolysin）
3．杀白细胞素（leukocidin） 4．肠毒素（enterotoxin）：
（A、B、C1、C2、C3、D、E、G、H 9个 血清型） 5．表皮剥脱毒素（exfoliative toxin） 6. 毒性休克综合征毒素1（toxic shock syndrome toxin 1, TSST1）
初报
分离培养
（血平板）
挑选可疑菌落 纯培养
增菌培养（葡萄糖肉 汤、硫酸镁肉汤）
兔血清肉汤 小白鼠毒力试验
胆汁溶菌试验 菊糖发酵 Optochin试验 药敏试验
涂片 荚膜肿胀试验
报告
检验方法
1、直接镜检 适用于：痰、脓、脑脊液标本。 报告：“找到肺炎链球菌”
2、分离培养 硫酸镁肉汤：均匀混浊生长，有绿色荧光。 血平板：灰白色，圆形，扁平，较小，周围
肉汤增菌
② 脓液、咽拭子等 血平板分离
（3）鉴定链球菌的主要试验： 根据形态、菌落、溶血情况进行： ①杆菌肽敏感试验：A群敏感(d>10mm) ②Optochin敏感试验：肺炎链球菌d>18mm，
d<15mm为阴性。
③胆汁溶菌试验：肺炎链球菌+ ④CAMP试验：Ｂ群无乳链球菌为＋
⑤血清学鉴定：
试剂盒STREPTEX。用亚硝酸抽提待测 菌的群特异性抗原，分别与包被有抗体的 胶乳颗粒反应。
腐生 葡萄球菌 白色或柠檬色
－ － －
－
－ 无
（六）抵抗力 无芽胞菌中最强，耐干燥，对石炭酸、
升汞、龙胆紫敏感。 易产生耐药性变异，如：耐甲氧西林金
黄色葡萄球菌（MRSA）。MRSA常呈多 重耐药，对青霉素、氧氟沙星及红霉素的 敏感率分别为1.3%、3%及14%。
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）
2、血平板菌落特点：直径0.5-1.5mm，灰白 色，半透明，光滑（有些菌株为粘液状），扁平， 周围有草绿色溶血环。
培养或放置24h以上，菌落中央可塌陷，呈脐 窝状。
4、透明质酸酶 5、链激酶 6、链道酶
（二）所致疾病
主要由A群链球菌引起。 1、化脓性感染：由皮肤伤口侵入，经呼吸道侵入，其他
途径（如产褥热、蜂窝组织炎）
特点：病灶界限不清,脓汁稀薄
2．中毒性疾病：猩红热 由产生致热外毒素的A族 链球菌所致的急性呼吸道传染病。
二、致病性和免疫性
3．变态反应性疾病： 风湿热 急性肾小球肾炎
（一）标本采集 根据病情采集标本 种类：脓液、伤口分泌物、穿刺液、
血液、尿液、痰液、脑脊液、粪便等。 注意：无菌操作，避免污染。
（二）葡萄球菌检验程序
脓液、咽拭子、穿刺液 尿液、痰液
脑脊液
血液
粪便、呕吐 物
直接涂片染色
初报
分离培养 （血平板）
分离培养
增菌培养 （高盐甘露醇 平板）
涂片染色 血浆凝固酶 耐热核酸酶 其他鉴定试验
取可疑菌落
鉴定试验
药敏试验
报告
（三）检验方法
1、直接涂片
适用于：正常情况下无菌的标本（如脑脊液） 伴有炎症细胞的其他体液标本、脓液等
初步报告： “查见革兰阳性葡萄状排列球菌，疑
为葡萄球菌” 或：“查见类似葡萄球菌的革兰阳性球
菌”
2、分离培养
血液标本5ml
脑脊液、脓液、
50ml葡萄糖肉汤（增菌） 穿刺液、咽拭、 尿液
分离培养
血平板（5%CO2）
增菌培养 (5%CO2葡萄糖肉汤)
可ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ菌落 鉴定试验
血清学鉴定 杆菌肽试验 optochin 胆汁溶菌试验 其他鉴定
（分群）
敏感试验
试验
（三） 链球菌的检验方法
（1）直接镜检： （痰、脓、穿刺液、
咽拭子等） 初报：发现G+球菌，
呈链状排列
（2）分离培养： ① 血液、脑脊液
粪便、 呕吐物
无菌（7天）
浑浊
报告： 无菌生长
血平板
高盐甘露 醇平板
（三）检验方法
3、鉴定试验
（1）血浆凝固酶试验：金黄色葡萄球菌（+） （2）甘露醇发酵试验：金黄色葡萄球菌（+） （3）耐热核酸酶试验：金黄色葡萄球菌（+） （４）肠毒素测定： 金黄色葡萄球菌产生 （5）SPA检测： 金黄色葡萄球菌 （6）凝固酶阳性和凝固酶阴性的葡萄球菌鉴定 （7）API葡萄球菌鉴定试剂盒
（二）所致疾病
1．侵袭性疾病： （1）皮肤软组织感染 特点：病灶局限且脓汁粘稠
（2）内脏器官感染 （3）全身感染 （4）尿路感染
2．毒素性疾病
（1）食物中毒 （2）烫伤样皮肤综合征 由表皮剥脱毒素引起。 （3）毒性休克综合征 由TSST1引起 （4）假膜性肠炎
3、凝固酶阴性葡萄球菌的致病性
人类凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）感染中 以表皮葡萄球菌的感染最为常见。
长期住院、反复使用各种广谱抗菌药物、烧伤或 有伤口的病人及与MRSA定植或感染的病人接触都 是造成院内MRSA流行的危险因素。MRSA定植或 感染的人员及院内环境污染是引起院内流行的主要 来源。
MRSA定植或感染的人员及院内环境污染是引 起院内流行的主要来源。
二、致病性和免疫性
(一)致病物质
金黄色葡萄球菌产生多种侵袭性酶与外毒素。 1．血浆凝固酶（coagulase)：
CNS主要引起以下几种感染：泌尿系感染， 细菌性心内膜炎，败血症等，其中大多为医 院内感染。此外，心脏起搏器安装、置换人 工心脏瓣膜、长期腹膜透析、静脉滴注等亦 可造成凝固酶阴性葡萄球菌的感染。
三、微 生 物 学 检 验
（一）标本采集 （二）检验程序 （三）检验方法
三、微 生 物 学 检 验
存在于正常人上呼吸道，为条件致病菌，仅在人 体抵抗力下降时才引起疾病。
可引起：大叶性肺炎，胸膜炎，脓胸，慢性支 气管炎，中耳炎，脑膜炎，败血症等。
三、微生物学检验
（一）标本采集
痰液，脓液，血液，脑脊液等。
（二）检验程序 （三）检验方法
检验程序
痰、脓
脑脊液
血液
直接涂片
革兰染色、美兰染色 荚膜肿胀试验
4．其他疾病： 甲型（草绿色）链球菌：引起亚急性细菌性心内
膜炎。
三、微生物学检验
（一）标本采集 （二）检验程序 （三）检验方法
（一）标本采集 根据病情采集标本 种类：脓液、鼻咽拭子、血液等 风湿热查血清抗体
（二） 链球菌的检验程序
痰、脓、穿刺 液咽拭子等
脑脊液
血液
直接涂片 测抗原 染色
初步报告