病原微生物检测技术进展_张艳秋

中国继续医学教育 第7卷 第9期 175

病原微生物检测技术进展

【摘要】 快速鉴定病原微生物的检验技术的更新换代非常迅速，其主

要原因在于微生物的生理特性，它们种类繁多且变异迅速。对病原体进行快速、准确的检测是十分必要的。常规的检测方法操作复杂，耗时长，且对操作人员的要求极高，已经远远不能满足现在对各种病原体的诊断和流行病学研究，微生物检测技术必须得到快速发展，才能适应未来发展的要求。【关键词】微生物；检测技术；进展【中图分类号】R446.5 【文献标识码】B 【文章编号】1674-9308（2015）09-0175-02doi ：10.3969/j.issn.1674-9308.2015.09.151

Progress Pathogen Detection Technology

ZHANG Yanqiu, Mulan County Disease Control and prevention Center, Haerbin 151900, China

[Abstract] Rapid identification of pathogenic microorganisms upgrading inspection techniques very quickly, mainly due to microbial physiological characteristics, the variety and variability of their rapidly. Pathogens rapid and accurate detection is essential. Conventional detection methods complex operation, time-consuming, and extremely high demands on the operator, has been far from satisfying a variety of pathogens present diagnostic and epidemiological studies, rapid microbial detection technology must be developed in order to adapt to the future development of Claim.[Key words] Microorganism, Detection technology, Progress

作者单位：

151900 哈尔滨市木兰县疾病预防控制中心张艳秋

特点，一旦治疗不及时或治疗不当很容易导致患儿死亡。细菌是引发小儿感染性腹泻的主要病原，主要包括沙门菌、志贺氏菌、大肠埃希菌及弧菌等病原菌[4]。近年来，随着抗生素在临床上的逐渐应用，感染性腹泻的发病率及病死率得到了有效的控制，但是许多临床医师在使用抗生素时存在着明显的滥用情况，严重影响了患儿的治疗[5]。本次研究结果显示，本组检出的84株病原菌中沙门氏菌共有56株，占所有检出病原菌的66.7%，其中鼠伤寒沙门菌33株（58.9%）。20株大肠埃希菌对于多种抗菌药物均普遍具有耐药性，其中对于氨苄西林和哌拉西林的耐药率均非常高，共检出6株ESBL 菌株，共占30.0%。沙门菌和志贺氏菌对于第3代头孢菌素和头孢哌酮/舒巴坦为基本敏感。所有菌株对于哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南类药物均比较敏感。由此可见，儿童感染性腹泻分离的病原菌中主要以沙门氏菌为主，大肠埃希菌对于ESBLs 类抗菌药物的耐药则比较

严重，故临床上应根据病原菌的分布及耐药性情况来选择合理的抗菌药物。

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病原学诊断已从病原体水平，深入到分子水平、基因水平，如PCR 技术、基因芯片技术等。这些技术通过自动化完成检测，耗时短，准确性和灵敏度都很高。这样的现代生物科学技术能够对病原微生物做出及时的诊断和鉴定，可大大减少人类对其感染的致病率和死亡率。本文对一些微生物检测技术进行简要介绍。1 病原微生物检测传统方法

病原微生物传统的实验室检查方法是将标本涂片染色后在显微下进行镜检和采用在培养基上接种后进行分离培养。1.1 涂片镜检

由于传统的镜检方法方便快捷，因此对于类似螺旋体感染、淋球菌感染、结核分枝杆菌等具有特殊形态病原微生物感染的初步诊断，实验室里仍然将镜检方法作为重要检测手段。1.2 分离培养

分离培养用于从检验标本或培养物的多种细菌中分离出某一种细菌的检验，但传统的分离培养方法存在着检测周期较长且不能批量处理样本的缺陷。随着检验设备的技术性进步，目前生产出的自动培养和鉴定系统克服了传统方法的缺陷，较先进的全自动微生物分析仪，不但可以批量处理，而且可同时做细菌鉴定和药敏试验缩短了检测周期。2 酶联免疫与免疫磁珠分离技术2.1 酶联免疫

酶联免疫测试技术是通过已知的抗体或抗原检测病原体的抗原或抗体的一种血清学检测技术，此技术可以对病原体进行快速鉴定。酶联免疫技不但可以检测样本中病原体抗原，而且可以检测机体的抗体成分，此技术的应用在很大程度上提升了血清学检测的特异性和敏感性，全自动免疫分析仪就因其具有高灵敏度和耗用时间短的特点而受到重视。2.2 免疫磁珠分离技术

免疫磁珠分离技术（IMBS）是将特定病原体的单抗或多抗或二抗偶联到磁珠微球上并通过抗原抗体反应形成磁珠，通过外部磁场磁力，将目标病原体分离出来的微生物检测技术。作为微生物检测领域中的一种新技术，IMBS 在近年来得到了广泛应用，目前已经开发出了针对各种病原体的免疫磁珠。免疫磁珠分离技术(IMBS)特点是不但减少检测耗时，而且可提高检测限。3 基因检测

由于病原微生物的核酸序列具有特异性，因此鉴别病原微生物可能过检测其特有的基因片段序列来实现。3.1 核酸杂交技术