生物化学实验教学大纲

生物化学实验教学大纲
课程编号：080145 适用专业：生物科学
学时数：24学分数： 1.5
1.课程类别：生物化学实验是生物科学专业的专业基础课。

2.教学目的：巩固学生生物化学知识、培养学生基本技能、训练学生创造性思维，为将来从事中学教学打下基础。

3.教学内容：本大纲共编写实验内容包括17个实验，43学时，其中必做实验7个，16学时，选做实验10个27学时。

根据教学计划，本实验课程应开设10个，计24学时，除了开设必作实验7个，16学时，约占总学时的67%外；应根据情况选做实验3个，共8学时，约占总学时的33%。

实验大纲中验证性实验16个，共40学时，占总学时的93.02%，综合性实验1个，共3学时，占总学时的6.98% 。

实验一蛋白质及氨基酸的呈色反应
重点难点：重点：几种常用的鉴定蛋白质和氨基酸的方法。

难点：蛋白质和氨基酸几种鉴定方法的特点。

教学要求：了解蛋白质和某些氨基酸的呈色反应原理；掌握几种常用的鉴定蛋白质和氨基酸的方法。

实验内容：观察蛋白质和某些氨基酸的呈色反应。

实验二氨基酸的分离鉴定——纸层析法
重点难点：重点：纸层析法的操作方法。

难点：对影响Rf 值主要因素的控制。

教学要求：了解纸层析法的基本原理；理解氨基酸纸层析法的原理；掌握纸层析法的操作方法。

实验内容：制备扩展剂，氨基酸的分离鉴定。

实验三蛋白质的等电点测定和沉淀反应
重点难点：重点：测定蛋白质等电点的一种方法。

难点：测定蛋白质等电点时，各种试剂的浓度和加入量的准确性。

教学要求：了解沉淀蛋白质的几种方法及其实用意义；理解蛋白质的两性解离性质；掌握测定蛋白质等电点的一种方法。

实验内容：酪蛋白等电点的测定，观察蛋白质的沉淀反应。

实验四血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳
重点难点：重点：醋酸纤维薄膜的电泳操作技术。

难点：加样量。

教学要求：了解电泳的一般原理；理解醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白的原理；掌握醋酸纤维薄膜的电泳操作技术。

实验内容：血清蛋白的醋酸纤维薄膜电泳。

实验五酪蛋白的制备及分离
重点难点：重点：从牛乳中制备酪蛋白的方法。

难点：将牛乳的PH值调整至酪蛋白的等电点。

教学要求：了解从牛乳中制备酪蛋白的原理；理解等电点时溶解度最低的原理；掌握从牛乳中制备酪蛋白的方法。

实验内容：从牛乳中制备酪蛋白。

实验六甲醛滴定法测定氨基氮
重点难点：重点：甲醛滴定法测定氨基氮含量的原理和操作要点。

难点：微量滴定法基本操作技术。

教学要求：了解甲醛滴定法测定氨基氮含量的意义；掌握甲醛滴定法测定氨基氮含量的原理和操作要点。

实验内容：甲醛滴定法测定氨基氮。

实验七酵母核糖核酸的分离及组分鉴定
重点难点：重点：鉴定核糖核酸组分的方法。

难点：酵母核糖核酸的分离。

教学要求：了解核糖核酸组分；理解酵母核糖核酸的分离及组分鉴定的原理；掌握鉴定核糖核酸组分的方法。

实验内容：RNA的提取，RNA的水解及组分鉴定。

实验八菜花（花椰菜）中核酸的分离和鉴定重点难点：重点：从菜花中分离核酸的方法，RNA 、DNA的定性检定。

难点：从菜花中分离核酸的方法。

教学要求：了解核酸分离时除去小分子物质和脂类物质的原因；理解菜花中核酸的分离和鉴定原理；掌握从菜花中分离核酸的方法，RNA 、DNA的定性检定。

实验内容：核酸的分离，RNA、DNA的定性检定。

实验九醋酸纤维薄膜电泳分离核苷酸
重点难点：重点：核糖核苷酸的醋酸纤维薄膜电泳的原理和方法。

难点：核糖核苷酸的醋酸纤维薄膜电泳的方法。

教学要求：了解核糖核酸碱水解的方法；理解核糖核酸碱水解的原理；掌握核糖核苷酸的醋酸纤维薄膜电泳的原理和方法。

实验内容：核糖核苷酸的醋酸纤维薄膜电泳。

实验十薄层层析法分离AMP、ADP、ATP
重点难点：重点：薄层层析法的操作方法，应用DEAE—纤维素薄层层析分离鉴定核苷酸。

难点：应用DEAE—纤维素薄层层析分离鉴定核苷酸。

教学要求：了解薄层层析法的优点；理解薄层层析法的基本原理；掌握薄层层析法的操作方法，应用DEAE—纤维素薄层层析分离鉴定核苷酸。

实验内容：薄层层析法分离AMP、ADP和ATP。

实验十一酶的特性
重点难点：重点：温度、pH等对酶活力的影响。

难点：反应条件的控制。

教学要求：了解酶的特性；理解温度、pH等影响酶活力的原理；掌握温度、pH等对酶活力的影响。

实验内容：温度、pH值、激活剂、抑制剂对酶促反应的影响。

实验十二维生素C的定量测定
重点难点：重点：维生素C定量测定的原理和方法。

难点：微量滴定法的基本操作技术。

教学要求：了解维生素C的生理意义；理解2.6—二氯酚靛酚滴定法的优缺点；掌握维生素C定量测定的原理和方法。

实验内容：2，6一二氯酚靛酚滴定法测定维生素C的含量。

实验十三肌糖的酵解作用
重点难点：重点：检定糖酵解作用的原理和方法。

难点：检定糖酵解作用的方法。

教学要求：了解糖酵解作用在糖代谢过程中的地位；理解糖酵解作用在糖代谢过程中的生理意义；掌握检定糖酵解作用的原理和方法。

实验内容：制备肌肉糜，肌肉糜的糖酵解、乳酸的测定。

实验十四小麦萌发前后淀粉酶活力的比较重点难点：重点：测定淀粉酶活力的方法，分光光度计的使用方法。

难点：测定淀粉酶活力的方法。

教学要求：了解小麦萌发前后淀粉酶活力的变化；理解分光光度法的原理；掌握测定淀粉酶活力的方法，分光光度计的使用方法。

实验内容：种子发芽，酶液提取，酶活力测定并计算。

实验十五发酵过程中无机磷的利用
重点难点：重点：定磷法的原理和操作技术。

难点：定磷法的操作技术。

教学要求：了解发酵过程中无机磷的作用；理解发酵过程中无机磷的消耗；掌握定磷法的原理和操作技术。

实验内容：标准曲线制定，酵母发酵，无机磷的测定。

实验十六脂肪酸的β一氧化
重点难点：重点：脂肪酸的β—氧化______酮体的生成及测定。

难点：酮体的测定。

教学要求：了解三氯乙酸在此实验中的作用；理解脂肪酸的β—氧化作用；掌握脂肪酸的β—氧化_____酮体的生成及测定。

实验内容：肝脏匀浆的制备，酮体的生成和测定。

实验十七血液中转氨酶活力的测定（分光光度法）重点难点：重点：转氨酶活力测定的原理和方法。

难点：转氨酶活力测定的方法。

教学要求：了解转氨酶在代谢过程中的重要作用；理解分光光度法的原理；掌握转氨酶活力测定的原理和方法。

实验内容：绘制标准曲线，酶活力的测定。

附录：
1.考核：技能考试占50%，笔试占30%，实验报告占20%。

2.建议教材：王秀奇等编.《基础生物化学实验》.高等教育出版社.
3.参考教材：[1] 赵亚华主编.《生物化学实验技术教程》.华南理工大学出版.[2] 李建武等.《生物化学实验原理和方法》.北京大学出版社.。