NKT细胞-慢性淋巴增殖性疾病

NR or PD
Clinical trail Alternate regimens
15
2015/5/14
T-PLL的整 体治疗策略
FCM 改良HyperCVAD
大颗粒淋巴细胞白血病
16
2015/5/14
LGLL：概况
• LGL(large granular lyphocytes) 占正常人外周血单个核细胞10-15%， 其中85%为CD3-NK细胞，15%CD3+T细胞 • T-LGL为胸腺后、抗原激活细胞毒性CD8+T淋巴细胞 • LGLL分类
T幼淋细胞白血病
9
2015/5/14
定
义
• 外周血淋巴细胞中幼淋细胞比例55%； 2% chronic lymphoid leukemia – T-PLL 20% – B-PLL 80%
T-PLL
• • • • • • • • 一种少见的成熟胸腺后T细胞肿瘤 1/3白血病期成熟T细胞肿瘤 大多数呈侵袭性病程 15%的患者诊断时无症状，可持续几年；进展不可避免，一 旦出现可能非常快 中位年龄61岁，M:F=2:1 2/3脾肿大；半数肝(40%)/淋巴结(53%)肿大，少见巨块型 20%皮肤表现：结节、皮疹、红斑 眼眶周围/结膜水肿，T-PLL特征性表现
Garand R,et al. Br J Haematol.1998,103:488
13
2015/5/14
T-PLL in Japan: is it a variant?
OS
Kameoka J,et al. Int J Hematol.2012,95:660
Eur J Haematol.2015 Apr 3
无细胞形态学、免 疫表型异常T细胞 者，TCR重排不能 诊断T细胞肿瘤 突变分型： STAT3/STAT5B
Patients with unexplained cytopenias or RA should be tested for circulating LGLs
Zhang D, Loughran TP Jr. Hematology.2013,652
Lefevre G,et al.Haematologica.2015.online
CD3-CD4+T淋巴细胞的典型免疫表型
5
2015/5/14
TCRV 限制性 表达
R2 R1
包含24种抗 体，两种荧光 素，识别70％ Vβ亚家族
TCRV 18
TCRV
6源自文库
2015/5/14
KIR:monotypic
Qiu ZY,et al. J Hematol Oncol.2013
Comparison of clinical characteristics between T-LGLL patients with or without PRCA
21
2015/5/14
TFS according to the STAT3 mutation status, serum LDH levels and serum β2-MG levels determined at diagnosis. Low LDH group: 250 U/L, and high LDH group: >250 U/L. Low β2-MG group: 3.0 mg/L, and high β2-MG group: >3.0 mg/L. Analysis identified that the shorter TFS in the STAT3 mutation group (p=0.008) and high β2-MG group (p=0.003).
一般临床过程呈惰性，生存期长达10年：
Blood.2012,120:3048
18
2015/5/14
STAT3的Exon21突 变导致STAT3活化及 下游信号途径的激活
Koskela HLM,et al.N Engl J Med. 2012,366:1905
LGLL的类型、STAT3 突变状态不影响患者 的生存
– T细胞LGLL：占LGLL的85%（T-LGLL） – 侵袭性NK或T细胞LGL – 慢性淋巴细胞增殖性疾病NK-细胞型（CLPD-NK）
细胞形态学
LGL
LGL
外周血涂片：大淋 巴细胞，肾形或圆 形细胞核，胞质丰 富，含嗜天青颗粒
LGL：BM
17
2015/5/14
T-LGLL：发病机理--疾病演化
• TCR基因重排：PCR或Southern blotting • 多参数流式细胞术
– 一个或几个T细胞抗原(CD2、CD3、CD5、 CD4、 CD7、 CD8)的丢失或表达减低 – 检测TCR链可变区(TCRV)表达：快速、敏感、特异，可 以同时检测克隆性及T细胞抗原异常的LGL数；缺点：仅覆 盖70%的TCRV，贵(25种针对V单抗) • 某种V过度表达(直接识别) • 限制性表达(25种单抗检测阴性，间接识别) – >50%T-LGLL表达NK细胞受体：KIRs、CD94/NKG2；均 一性表达单个(或多个)KIR同种型 – T细胞克隆存在于CD4+、CD8+、CD4-CD8-、 CD4+CD8+，后二者很少见 • 异常：CD3-淋巴细胞在淋巴细胞中>3%、CD2 >15%
PRCA与CLPD
Vlachaki E,et al. Sci World J.2012,Article ID 475313
20
2015/5/14
南京医科大学第一附属医院
28例T-LGL患者中，男11例、女17例(男/女:0.647)； 中位诊断年龄是58岁(38–72岁)； 中位随访时间17个月(3-60月)，随访期间没有患者死亡； T-LGL合并PRCA患者7例，发生率25%； T-LGL合并中性粒细胞减少15例，发生率53.6%
Monotypic expression
CD158i
R1
外周血流式细胞学：以FSC/SSC设门，淋巴细胞占有核细胞56.1%， CD3+CD8+：84.8%，CD158i：83.8%，CD158a：0.2%，CD158b： 0.4%，CD158e：2.1%，CD161：87.5%，CD94：2.9%，CD160：34%
11
2015/5/14
典型：1-7；小细胞变异型：8-12；脑回型：13
CD2
CD3
CD7
CD4/CD8
CD5/CD20
T-PLL免疫表型
12
2015/5/14
Initially indolent OS=51 mon Initially progressive OS=12 mon Secondary progression OS=9 mon
10
2015/5/14
诊
断
• 临床特征 • 形态学：75%，典型（幼淋细胞）；变异型：20% 小细 胞型、5% 脑回型，免疫表型、细胞遗传学及临床特征同 典型PLL • 免疫表型：TdT-、CD1a-、CD2+、CD5+、CD7+(强阳 性，其他成熟T细胞肿瘤弱表达或阴性)；CD4+CD860%，CD4+CD8+ 25%，CD4-CD8+少见；大多TCR、 TCR少见
Blood.2012,120:3048
19
2015/5/14
T-LGLL：临床表现
• T-LGLL约2/3患者发生：(通常LGL计数可>2.0109/L (正常 0.2~0.4109 /L)) 中性粒细胞减少：发生率达80%，反复细菌感染, 45%患者存 在严重粒缺 (<0.5109/L) 红细胞减少：发生率达50-60%，纯红再障的最主要病因！ 血小板减少：发生率约20% ，严重的血小板减少:少见 • BM浸润程度（LGL细胞）与细胞减少程度和系统症状的严重性 无相关关系 • BM活检免疫组化检查发现85%患者有LGL侵袭 • B症状（发热、盗汗、体重减轻）：发生率20-40% • 轻中度脾肿大：发生率20-50%，淋巴结肿大少见
(SSC)
CD45(LCA,白血病共同抗原)
3
2015/5/14
提示T细胞肿瘤的免疫标志
• CD4和CD8表达模式异常 – 共表达 – 均不表达 – CD4/CD8比例变化 • T细胞标志不表达 – CD2 – CD5 – CD7 • 异常表达：CD10 • T细胞标志表达强度变化
4
2015/5/14
2015/5/14
NK/T细胞-慢性淋巴增殖性疾病 (NK/T-CLPD)的诊断与治疗
南京医科大学第一附属医院 江苏省人民医院
李建勇
2015.05.16 金陵论坛
1
2015/5/14
南京医科大学第一附属医院血液科T/NK-NHL
初诊373例，2008-01-01至2014-10-01
侵袭性NK细胞淋巴瘤/白血病 12% 结外NK/T细胞淋巴瘤，鼻型 17% T淋巴母细胞淋巴瘤 8% 血管免疫母细胞性T细胞淋 13% 巴瘤
23
2015/5/14
LGLL的治疗指证
Zhang D, Loughran TP. Hematology.2012,652
• 染色体核型异常 • 特定的基因突变（STAT3突变）
侧 向 散 射
CD34、 TdT阳性提 示T-ALL或 T-LBL
骨髓细胞CD45/SSC 图中分布情况设门(gating)圈定各类细胞 • R1 门：成熟淋巴细胞；R2 门：正常单核细胞；R3 门：正常 粒细胞；R4 门：幼稚淋巴细胞；R5 门：有核红细胞或细胞碎 片；R6 门：幼稚髓细胞 • 急性白血病细胞通常会在R4、 R6 两门位置处出现
T-LGLL伴发其他自身免疫性疾病：
SLE 、桥本甲状腺炎、干燥综合征、Sjogren综合征
22
2015/5/14
LGLL的诊断
>6月
排除反应性LGL增多症：小克隆(<0.5109/L)或 多克隆LGL增多症的无症状患者6月内重复PB FCM及TCR/重排
CD3+CD8+CD16+CD57+CD56-CD28-CD5dimCD7dim CD45RA+CD62L-TCR+TIA+颗粒酶B/M+
T-LGLL与自身免疫性疾病：
• T-LGLL患者40-60%可表现为免疫异常，包括：RF+、 ANA+、多克隆Ig、CIC、抗中性粒细胞抗体 • T-LGLL最常并发自身免疫性疾病：
类风湿关节炎 Felty综合征 -----25-33%患者 -----类风关、中性粒细胞减少、巨脾（类似 TLGLL伴类风关） 二者均有HLA-DR4单倍体高表达---二者可能为 同一疾病不同临床症侯 LD-MTX可控制二者关节炎和LGLL
NK T
CD158a,b,e,i
TCRV : monoclonal
正常T、NK细胞表达NK细胞相关抗原
Morice WG,et al. Br J Haematol,2003,120:1026
7
2015/5/14
NK-LGL
NK LGL白血病免疫表型
8
2015/5/14
KIR
T-LGL白血病患者免疫表型
– 2/3细胞膜表达CD3和TCR，1/3细胞膜不表达CD3和TCR、但 细胞质表达 – CD52高表达(阿仑单抗) – T细胞活化标志CD25、CD38、HLA-DR不同程度表达 – 细胞毒T细胞标志TIA-1阴性，即使CD8+T-PLL
• 几乎所有患者TCR和/或基因重排
T-PLL
• 胸腔积液、腹水(14%) • CNS受累 • 外周血淋巴细胞显著增高，常 >100109/L(75%)、幼稚淋巴细胞>90% • 半数贫血(36%)/血小板减少(51%) • LDH常增高，高钙血症少见(ATLL常见)
未分类 5% 肠道病相关性T细胞淋巴瘤 3% 1% 皮下脂膜炎样T细胞淋巴瘤 3% 原发于皮肤T细胞淋巴瘤 间变性大细胞淋性巴瘤 4%
NK/T-CLPD的诊断
WHO分型 （临床+MICM综合诊断） • 临床 • 细胞形态学 • 免疫表型 • 染色体 • 分子生物学
2
2015/5/14
T细胞的克隆性检测
14
2015/5/14
惰性T-PLL的起始治疗
NCCN V2. 2015
T-PLL
Allo-SCT Clinical trial (preferred)
PR or CR
Symptomatic disease
IV alemtuzumab alone
Alemtuzumab-containing regimens: FMC followed by IV alemtuzumab IV alemtuzumab and pentostain