单克隆抗体课件

细胞获得单抗的 方法
有限稀释法培养 筛选 单克隆 抗体
4.单克隆抗体的优点
特异性强、灵敏度高、产量大
5.单克隆抗体的应用
诊断试剂——准确、高效、简易、快速 治疗疾病——癌症 运载药物 (“生物导弹” —单抗做导向，药物为弹头)
课堂练习
下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的实验方案 A 制备单克隆抗体 1、该实验方案的目的是__________ 2、该方案能达到预期效果吗？为什么？ 3、A是从小鼠的脾脏中取得 _______, B细胞 该细胞能够产生______ 抗体 4、图中B为细胞融合 ________过程，常用 灭活病毒 作为诱导剂，该细胞继 _________ 双亲细胞 的遗传特性，既能 承___________ 分泌抗体 又能___________ 无限增殖 。 __________, B 骨髓瘤细胞 杂交瘤细胞 C 足够数量的细胞群 体外培养 注射到 小鼠腹腔
机体受抗原刺激后，浆细胞产生的，能与抗原发生 特异性结合的具有免疫功能的免疫球蛋白
抗体的传统生产方法
抗原 抗 原
免疫
动 物 体 内
多 种 浆 细 胞
多 种 抗 体
从 血 清 中 分 离 抗 体
注射抗原，血清分离
该法制备抗体的缺点： 抗血清 产量低、纯度低，且 抗体的特异性差
1.单克隆抗体的概念
读下面一段文字资料，找出单克隆抗体的概念 人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内 的浆细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体， 但是每个浆细胞只分泌一种化学性质单一、特异性 强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个 浆细胞进行无性繁殖，即克隆。
选择性培养基 筛选 专一抗 体检测 克隆化 多种杂 交细胞
5.为何要进行克隆化培 养和专一抗体检测，多 次筛选？
有限稀释法培养
筛选 单克隆 抗体
有限稀释法
计 数
103/ ml
102/ ml
10/ ml
1个细胞Fra Baidu bibliotek/ 孔
克隆化培养
抗体检测
注射抗原
B淋巴细胞 融合 骨髓瘤细胞
6.大量增殖杂交瘤
选择性培养基 筛选 专一抗 体检测 克隆化 多种杂 交细胞
• 单: 单个细胞
特异性强的抗体
克隆: 无性繁殖
• 单克隆抗体:单个细胞克隆产生的化学性质单一
2.单克隆抗体的制备的设计方案
问题：如何大量生产单克隆抗体？
提示1：对B细胞进行细胞培养可行吗？ 提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？ 提示3：如何使一种细胞既能产生特异性抗体， 又能大量繁殖？
分泌一种特异性抗体的B淋巴细胞 能无限增殖的骨髓瘤细胞 杂交瘤细胞
2.诱导细胞融合的 方法有哪些？
单克隆 抗体
注射抗原
B淋巴细胞 融合 骨髓瘤细胞
3.若细胞两两融合后， 有几种融合情况？
多种杂 交细胞
单克隆 抗体
注射抗原
B淋巴细胞 融合 骨髓瘤细胞
选择性培养基 筛选
4.怎样筛选出杂交瘤 细胞，杂交瘤细胞 有何优点？
单克隆 抗体
注射抗原
B淋巴细胞 融合 骨髓瘤细胞
1975年科学家米尔斯坦和柯勒的制备单克隆抗体实验
3.单克隆抗体的制备过程
阅读并分组讨论，单抗制备过程分哪几步？请用箭头把 下列各图解的字母按正确顺序连接起来。顺序是？
注射抗原
B淋巴细胞 骨髓瘤细胞
1.注射抗原的目的 是什么？
多种杂 交细胞
单克隆 抗体
注射抗原
B淋巴细胞 融合 骨髓瘤细胞
多种杂 交细胞
“生物导弹”
肺癌在全国的发病率居肿瘤之首，小细胞肺 癌是恶性程度最高的一种，上海肿瘤研究所 细胞与分子免疫研究室在国内率先研制出一 种名叫“2F7”的靶向生物导弹。这种生物导 弹对小细胞肺癌具有特定靶向性。
这个“生物导弹”与你知道的哪个物质有关？
问题：
什么是抗体？ 抗体由什么细胞产生？ 与抗原作用的特点？ 其化学本质是什么？