枸杞中总黄酮的分析方法及提取工艺研究

枸杞中总黄酮的分析方法及提取工艺研究

作者：李铭芳, 李淑芳,汪小强,阮红强

来源：《天津农业科学》2011年第01期

摘要：以乙醇为溶剂，采用回流提取法提取宁夏枸杞中的总黄酮。通过正交试验，对影响提取效果的主要因素包括提取温度、提取时间、乙醇浓度和固液比进行优化。通过试验研究发现最优提取条件为：提取温度70 ℃,提取时间2.0 h,乙醇浓度70%,固液比为1∶20。此法为枸杞中黄酮类化合物的提取提供了参考。

关键词：宁夏枸杞；总黄酮；正交设计；回流提取

中图分类号：R931.7文献标识码：ADOI编码：10.3969/j.issn.1006-6500.2011.01.012

Analysis and Extractions of Bio-Flavonoid from Lycium Barbarum

LI Ming-fang1, LI Shu-fang2, WANG Xiao-qiang1, RUAN Hong-qiang1

（1. College of Science, Jiangxi Aricultural University, Nanchang, Jiangxi 330045, China; 2. Chemistry Group, Jiangxi Dongxiang No.1 Middle School, Dong xiang, Jiangxi 330018, China）

Abstract：In this paper, ethanol as solvent，refluxing extraction method used to extract total flavonoids of Ningxia Lycium barbarum. Optimize the impact of extraction of the major factors by orthogonal experiments, included extraction temperature, extraction time, ethanol concentration and the ratio of solid to liquid. The experiment found that the optimal extraction conditions were as follows: extraction temperature 70 ℃, extraction time 2.0 h, the concentration of 70% ethanol, the solid-liquid ratio of 1∶20. This method for extraction of flavonoid compounds to provide a reference.

Key words: Ningxia lycium barbarum; total flavonoids; orthogonal design; reflux extraction

植物宁夏枸杞(Lycium barbarum L. )的成熟干燥果实,具有滋补肝肾、益精明目之功效,现代临床上广泛用于调节免疫功能、降血脂、降血糖、保肝、抗肿瘤及抗衰老等[1]。枸杞之所以具有上述功能,一般认为与其所含黄酮类化合物、枸杞多糖、类胡萝卜素和甜菜碱等活性成分有关,特别是与枸杞中黄酮类化合物密切相关[2]。随着黄酮类化合物研究开发的热潮,宁夏枸杞中黄酮类化合物的抗氧化活性开始得到关注[3-5]。

黄酮类化合物( Flavonoids) 是植物经光合作用产生的一大类化合物, 其结构母核是以C6-

C3- C6 为骨架的2-苯基色原酮。它的存在形式有两种, 一种是游离的苷元, 另一种是与糖等结

合的苷。黄酮类化合物作为一种功效成分, 具有多种有益的生理功能和药理作用, 越来越引起人们的重视。黄酮类化合物的生理活性作用较为广泛, 具有生物抗氧化性、清除自由基作用、抗衰老、治疗心脑血管疾病、降血脂降血压作用、降低血糖作用、抗癌作用、镇痛作用、免疫作用、抗炎作用、抗菌作用、对消化性溃疡的保护作用等药用保健功能。由于黄酮优越的生理功能特性,使其可广泛应用于功能性食品中, 涉及功能食品的许多方面, 如防衰、防癌、提高免疫力、降脂、降压食品等。此外，黄酮类化合物还可作为天然保健性食品添加剂,如天然甜味剂、天然色素、天然抗氧化剂等广泛地应用在各类食品中[3-6]。

目前，黄酮类化合物提取方法采用较多的有：(1)有机溶剂提取法；(2)微波提取法；(3)超临界萃取法；(4)超声波辅助提取法。可用的检测方法有：(1)分光光度法； (2)纸色谱法；(3)薄层色谱法（TLC）；(4)极谱法； (5)气相色谱法；(6)高效液相色谱法( HPLC)；(7)毛细管电泳法[7-9]。根据以上各种提取方法及分析方法的特点，结合实际情况，我们选择了以乙醇为有机溶剂的回流提取法进行提取，以分光光度法测定总黄酮的含量。本试验通过对宁夏枸杞中总黄酮的提取方法研究，为宁夏枸杞品质的正确评价、进一步综合开发利用宁夏枸杞资源奠定理论基础，提供科学的依据和参考。

1 材料与方法

1.1 材料

试验材料为宁夏枸杞。

仪器：723 PCS光栅分光光度计（上海欣茂仪器有限公司，723型），电子天平（奥豪斯（上海）公司，NO.AR2140），电热恒温水浴锅（江苏省金坛市京华仪器有限公司，DF-Ⅱ），电热鼓风干燥箱（上海三发科学仪器有限公司，DHG-9101-2型），高速万能粉碎机（FW-100型）。

试剂：芦丁(rutin)标准品（比利时进口，北京化学试剂有限公司），亚硝酸钠

（NaNO2）、硝酸铝（Al(NO3)3 ），氢氧化钠（NaOH），乙醇。

1.2 方法

1.2.1 标准溶液的配制标准溶液的配制：准确称取芦丁标准品0.005 0 g,以70%乙醇溶解,待溶解后用70%的乙醇定容到100 mL容量瓶中，即得浓度为 0.5 mg·mL-1的标准溶液。

1.2.2标准曲线的绘制分别吸取0.50，1.00，