疼痛研究的动物模型(李熳)已上传

d 出现自发痛（如
轻到中度的自残，自卫，过度的舔爪以及损伤 同侧后肢的跛行，负重能力降低等）、热痛
敏、触诱发痛和冷痛敏。 在14～15 d达到高峰。 术后15～130 d所有的痛行为均持续存在, 但敏感程度较高峰期明显下降。
Copyright 2001 by Allyn & Bacon
3 模拟人类疾病
（三）脊神经结扎模型（ SNL ）
1
制备：麻醉状态下结扎L5 和L6 脊神 经，结扎后迅速出现机械性痛敏,冷痛敏 和热痛敏也会在术后1 d内出现,这种现 象可持续4 个月。
PSL
Copyright 2001 by Allyn & Bacon
2 SNL模型的优缺点
脊神经结扎模型与CCI模型和PSNL模型相比, 其结扎部位和结扎强度的变异减小,而且可将 脊髓损伤节段和未损伤节段完全分开。 该模型表现出较长时间的机械性痛敏和触诱 发痛,且操作相对简单,使此模型在研究中被经 常采用。 但此大鼠模型有时也会出现自残现象,表明此 模型存在缺陷。
纯的感觉神经, 并且坐骨神经损伤产生的 行为影响还涉及到隐神经, 因此也使此方 法有一定的局限性。
Copyright 2001 by Allyn & Bacon
（二）部分坐骨神经结扎模型（ PSNL ）
1
制备方法：在动物麻醉状态下,用8-0丝 线将坐骨神经干结扎1 /2或1 /3,然后检测 动物痛行为表现,建立坐骨神经部分损伤 模型。
疼痛 研究的动物模型
神经生物学系：李熳 Liman7322@hotmail.com
Copyright 2001 by Allyn & Bacon
疼痛检测
痛
阈
是引起痛觉感知的最小刺激量（在 人才有感知觉，可通过诉痛告知， 不一定有可见的痛行为反应）。 对痛刺激引发痛反应或痛行为的最 低阈值（动物实验多看痛的行为反 应）。 一般多反映感觉成分。

Copyright 2001 by Allyn & Bacon
测痛方法应符合以下要求：
① 刺激强度能精确定量 ② 反复刺激不引起组织损伤及 适应 ③ 反应终点便于识别 ④ 刺激与反应之间的相应关系 稳定
Copyright 2001 by Allyn & Bacon
常用的测痛方法有：
物理性测痛方法

Copyright 2001 by Allyn & Bacon
3 改良SNL大鼠模型
用健康SD大鼠,在深
麻醉状态下显露并 咬断双侧L5 横突,仔 细分离其下的L5 脊 神经,于靠脊柱侧用 5-0丝线二道结扎,在 结扎处外1 mm剪断 L5 脊神经。
Copyright 2001 by Allyn & Bacon
非麻醉性镇痛药敏感
Copyright 2001 by Allyn & Bacon 常用痛模型
皮肤炎症痛模型
3 紫外线致炎
紫外线照射鼠后 肢跖部皮肤
局部炎症
动物行为反应 （舔咬足爪）
痛觉过敏
Copyright 2001 by Allyn & Bacon 常用痛模型
（二）关节炎痛模型
1 单关节炎
角叉菜胶或尿酸 关节动脉注射膝 关节 痛觉过敏 2-3d单关节炎症
动物功能障碍， 保护性反应
*
福氏佐剂造成的单关节炎可持续6周
Copyright 2001 by Allyn & Bacon 常用痛模型
关节炎痛模型
2 多关节炎
大鼠尾根部 或背部皮下 多点注射注 射福氏佐剂 免疫性疾病 慢性佐剂关节炎症 与人的关节炎相似
形成需要几周，持续几个月
Copyright 2001 by Allyn & Bacon 常用痛模型
Copyright 2001 by Allyn & Bacon
Copyright 2001 by Allyn & Bacon
Copyright 2001 by Allyn & Bacon
皮肤炎症痛模型
2 致炎剂模型 鼠爪跖部皮下注射角 叉菜胶、蜂毒、酵母 动物行为反应 （舔咬足爪）
局部炎症
痛觉过敏

Copyright 2001 by Allyn & Bacon
疼痛检测
耐 痛 阈
是指对疼痛刺激的最大忍耐程度，或指对疼 痛刺激引发躲避反应或防御行为的阈值。 变异性很大，常受多种生理、心理、病理因 素的影响；在人可用受试者的语言、情感反 映，而动物实验则比较困难。 一般多反映情感成分。在动物实验中，一般 多用痛阈为观察指标。
药理学、神经病学、麻醉科学、康 复科学和中西医结合基础
Copyright 2001 by Allyn & Bacon
爪 触 觉 测 痛 系 统
Copyright 2001 by Allyn & Bacon
热 辐 射 测 痛 系 统
Copyright 2001 by Allyn & Bacon
热 辐 射 测 痛 系 统
1 福尔马林模型
鼠爪跖部皮下注射 福尔马林1%-5%
早时相（立即产生）
化学刺激直接兴奋感受器
动物行为反应 （舔咬足爪） 迟时相（15-60min产生）
组织炎症
Copyright 2001 by Allyn & Bacon 常用痛模型
spontaneous pain--pain in the absence of an evoking stimulus.
3 PSNL模型的缺陷
由于Biblioteka Baidu结扎水平支配外周区域的神经纤
维, 在坐骨神经中的分布是随机的,所以 这种处理方法不会造成特定区域的感觉 丧失。 由于损伤纤维的数量不能固定,因此难以 确定神经纤维的损伤程度,故其重复性和 定量分析较差,从不同动物得到的结果差 异较大。
Copyright 2001 by Allyn & Bacon
Copyright 2001 by Allyn & Bacon
一 炎症痛动物模型
按部位分：脚掌炎症痛、关节炎症痛 按致炎剂分：福尔马林、角叉菜胶、弗 氏佐剂、胶原 其它有钾离子皮下透入致痛模型、扭体 （醋酸溶液）疼痛模型等等

Copyright 2001 by Allyn & Bacon
（一）皮肤炎症痛模型
Copyright 2001 by Allyn & Bacon

脊神经结扎模型（ Tight ligation of spinal nerves ，SNL ）： Kim and Chung (1992). 坐骨神经分支选择切断模型 （Spared nerve injury ，SNL): Decosterd and Woolf (2000).
5 CCI模型的缺陷
铬肠线的结扎松紧度取决于实验者的操
作,由此所导致的神经纤维的损伤数目和 类型难以控制。 有的研究者还认为该模型的神经损伤在 一定程度上是由于铬肠线所含的化学物 质的毒性作用所致。
Copyright 2001 by Allyn & Bacon
坐骨神经中含有明显的运动成份,不是单
Copyright 2001 by Allyn & Bacon
神经病理性痛模型
1 CCI模型制备方法
分离坐骨神经 轻度结扎
慢性痛过敏 * 较老的动物的CCI不产生触诱发痛 * 应用最广的慢性痛模型
Copyright 2001 by Allyn & Bacon 常用痛模型
2 术后痛行为表现
大鼠模型在术后1～15
热刺激 辐射热-甩尾法 辐射热-抬脚法 辐射热-摆头法 热板-抬脚法 机械-抬脚法 压脚- 屈腿法 电刺激-甩尾法 电刺激-嘶叫法 甩尾法电刺激-
机械刺激 电刺激
Copyright 2001 by Allyn & Bacon
化学性测痛方法
钾离子皮下透入法：
饱和氯化钾溶液，采用一定强度的 直流电经动物不同部位的皮下透入，可 以使家兔缩腿，挣扎，或使大鼠甩尾， 嘶叫等。
外周神经损伤, 肿瘤压迫神经 重金属离子中毒（汞、铅中毒等，喝豆
浆、牛奶解毒） 缺氧或代谢异常等诱发的神经病理性慢 性痛的症状和行为表现极为相似。
Copyright 2001 by Allyn & Bacon
4 病理表现
周围神经压迫性损伤后10
d,受压区神经
水肿。 距损伤区1 cm 以上的近心端神经内有髓 和无髓纤维的轴突全部正常。 靠近损伤区( < 1 cm) 的轴突广泛变性,神 经内水肿。 损伤区远端神经内广泛的水肿和髓鞘变 性。
Copyright 2001 by Allyn & Bacon
伤害性刺激反应模型建立
化学性刺激 物理性刺激
动物
痛反应指标：嘶叫，缩腿，舔爪，甩头， 甩尾，挣扎，皮肤、肌肉抽搐。
Copyright 2001 by Allyn & Bacon
疼痛检测仪器设备简介
热辐射测痛系统和爪触觉测痛系统 适用于大小鼠的热痛和机械痛检测 设备覆盖学科：神经生物学、神经
Copyright 2001 by Allyn & Bacon
相邻的未损伤纤维的兴奋性增加 在神经损伤之后，不仅受损的神经纤 维和DRG神经元发生了剧烈的改变，与其 相邻的未损伤的DRG神经元，乃至它支配 的外周纤维和感受器，也发生了巨大的 变化。 这些变化是由损伤的神经纤维发生华 勒氏变性造成的。

醋酸、5-HT、ACH、缓激肽、硫酸镁等
腹腔注射 扭体反应 腹部肌肉收缩，同时伴有一侧后肢外伸
Copyright 2001 by Allyn & Bacon
2 乙状结肠痛模型
乙状结肠壁（距肛门35mm处）
注射5%甲醛0.1ｍl
舔下腹或下肢、伸展肢体、腹部收缩、 肋腹肌收缩、弓背
Copyright 2001 by Allyn & Bacon
（三）实验性肌炎模型
角叉菜胶、BK、 低pH生理盐水 电生理观察
注射
肌肉
肌肉痛
Copyright 2001 by Allyn & Bacon 常用痛模型
（四）手术创伤痛模型
切断膝关节十字韧带
创伤性骨关节炎 术后疼痛模型
Copyright 2001 by Allyn & Bacon 常用痛模型
（五）炎症性内脏痛模型 1 扭体试验
改良SNL神经病理痛大鼠术后出现痛觉过
敏、触诱发痛等神经病理痛症状,并被认 为机械性刺激痛敏的发展和存在与完整 的未损伤神经纤维有关。
Copyright 2001 by Allyn & Bacon
4 改良SNL模型的致痛机制
（1）受损的神经纤维
、雪旺氏细胞以及巨 噬细胞释放多种炎性 因子，作用于相邻未 损伤的神经纤维和末 梢，引起未损伤纤维 的兴奋性增加。

Copyright 2001 by Allyn & Bacon
（一）坐骨神经慢性压迫性损伤模型（CCI)

大鼠大腿中部坐骨神经上结扎四道铬制羊肠线， CCI大鼠表现自发性疼痛、冷痛觉超敏（非伤害 性冷刺激引起的伤害性缩足反应） 、触诱发痛、 伤害性热、机械性痛觉过敏。疼痛行为可持续2月 以上。
PSL
炎症性内脏痛模型
二 神经病理痛动物模型
坐骨神经慢性压迫性损伤模型
（Chronic constriction injury by the loose ligation of the sciatic nerve ，CCI) ：Bennett and Xie (1988).
部分坐骨神经结扎模型
（ Tight ligation of the partial sciatic nerve ，PSNL ） ：Seltzer et al. (1990).
Copyright 2001 by Allyn & Bacon
2 术后痛行为表现
该模型也出现抬足舔足等自发痛行为,但
无自残现象。 术后动物损伤侧肢体出现触诱发痛和热 痛敏。 与CC I模型不同的是,该模型出现痛行为 的时间较早,一般在几个小时之后,持续几 个月。
Copyright 2001 by Allyn & Bacon
Copyright 2001 by Allyn & Bacon
大的有髓轴突(Aα和Aβ)
明显丧失。 小的有髓轴突(Aδ) 和无髓轴突丧失不 明显。 神经损伤2 wk后,损伤区远端的有髓纤维 几乎完全丧失,而无髓纤维较近心端减少 34% ～84%。
Copyright 2001 by Allyn & Bacon

Copyright 2001 by Allyn & Bacon

受损的神经纤维、雪 旺氏细胞以及巨噬细 胞释放NGF以及胶质 细胞源性神经营养因 子等多种营养因子并 释放白细胞介素1、白 细胞介素6和肿瘤坏死 因子等多种炎性因子 ，作用于相邻未损伤 的神经纤维和末梢， 引起未损伤纤维的兴 奋性增加。