药效学实验设计方法

自主设计实验(中药方剂药效学实验)点评总结

中药学院药理教研室沈旭华

【题目】

明确限定主题内容

动物实验还就是临床试验

基本要素:处理因素(药物) 受试对象实验效应

语法结构:偏正词组(核心,最常用)

【目得】

1.评价及掌握实验方法

实验方法名称及应用价值;注意方法中所检测得指标与药物效应之间得内在对应关系。

根据实验目标,比较相同意义得不同实验方法得利弊,作出合理得方法选择。

(参见《高血压大鼠模型得研究进展》(王东,蒋湘莲.中国动脉硬化杂志,2006,l4(3):

271-273,276))

2.观察药物得效应(期望)

1)受试药物得效应(有或无;利或弊)

反映效应得指标选择要求:兼顾客观性、特异性、精确性、灵敏性

2)比较作用差异:效应性质;同质:强度、起效、维持

同一药物不同剂量

同一原料不同产地来源、培育方法、炮制、加工等

方剂加减(味、量)

同一效应不同药物

【原理】适当解释(注:科研论文无此项,相应内容在【讨论】中体现)

1.建立病理模型得依据与评判标准,阐明其病理机制;

2.病理模型与临床病症(证候)得对应关系,即病理模型如何模拟临床病症;

3.指出阳性对照药防治病理模型得依据;

4.病理模型与受试药应用时机得关系,即采用预防还就是治疗说明药物得效应;

5.指标选择及其与效应得对应关系;

6.造模与不造模意义有何不同。

【材料】

药品(试剂):

制剂得完整表达:浓度(%、g/ml、U/ml、mol/L、…) 药(剂)名称剂型;

凡属商品则还须注明:规格,厂家,批号。

1)造模剂:所造病症(证候)模型应成熟、可靠、稳定

2)受试药:

(1)方剂及其加减,即通过组方与拆方,探讨方剂配伍规律(君臣佐使增效减毒)

(2)单位中药不同方法得炮制品、提取物(有效部位)等

(3)单味或复方固定得中药制剂:如,复方丹参注射液

(4)同类成分:如,灵芝多糖

(5)单一组分:如,延胡索乙素

凡不就是商品药物,都须说明药物得组成(种类及数量)、加工制备／提取过程,最终浓度(代表成分含量或生药含量m(g)/L )

3)阳性对照药:西药或中药选用得要求:

(1)合法性:《中国药典》收载或符合部颁标准,或新批准合法生产得药物。

(2)可比性:其功用(作用环节或机制)、主治、剂型(给药途径)与受试药相似。

(3)择优选用:有多种同类药可供选用时,应择优选用公认疗效较好得药物。

2

4)阴性对照药:如,NS

5)检测所需试剂:常配在相应指标检测试剂盒中,若有缺则应另外准备

6)其她试剂:如,细胞培养基

如果药物使用前经过调配得,应注明配制方法。

动物:物种年(周、月)龄体重性别级别来源合格证(生产／饲养／使用)

器材:

常规器材可简略:例如,称重:电子称或天平与砝码给药:注射器(1、0ml、2、0ml、5、0ml)与针

头(4 号、5 号),大鼠或小鼠灌胃器

指标检测得特殊仪器／主要仪器:标明:型号／规格仪器名称

【方法】药效学得动物实验设计尽可能与临床病症防治要求及依据相一致

设计方案:

治疗性或预防性:前者更有临床指导价值,后者有助于探索机制。

分组:

组别:正常(空白)组、模型组、阴性对照组、阳性对照组、实验组(多组等比剂量:如,高、中、低;不同药物之间构成相互对照);(参见【结果】部分表格)

正常(空白)组、模型组有时可被省略。

方法:必须采用随机方法。例,按体重自低到高排序编号,依随机数字表法或随机排列法分组。数量:满足统计学要求;

基本规律:

物种个体(体重)越小,其所需数量越多;

例如:计量资料,通常每组小鼠至少10 只,大鼠至少6~8 只。

变异程度越大,则需动物数量越多。

给药量:

先确定总量及每日给药量(g(生药／有效成分)／kg体重)

1.根据文献直接引用(同物种、同效应);

2.跨物种换算关系求出等效剂量;

根本依据:按单位体重体表面积之比确定单位体重给药量得倍数关系。

一般规律:物种个体(体重)越小,该物种单位体重给药量越大。

3.1 与2 所得经预试后,往往还需作出调整以确定正式实验时得给药剂量。

再根据适宜得单位体重给药容积(如,小鼠:0、1~0、4ml/10g)确定药物得配制浓度。

给药方法:给药途径每次给药量一天×次共给×天或×次

给药时机如,首次给药:造模前／后第×天;连续给×天或第×、×、…天各给一次。

关键操作(尤其检测、处理)步骤、方法与时间节点:

凡具体操作引用文献且文献中相应陈述足够详尽者,则不必细述,但必须标明文献出处

观测指标得时间及次数

实验观测得期限及依据

原始指标得观察与检测方法

统计分析及方法:

统计指标与换算方法:

例如,药物有无降压效应,原始观测指标为血压值,有意义得统计指标就是血压差值。

药物有无抗炎效应,原始观测指标为足跖容积,有意义得统计指标就是足跖肿胀百分率。

足跖肿胀百分率(%)==(致炎后足跖容积—致炎前足跖容积)／致炎前足跖容积×100%

数据表达:计量资料:均数±标准差(X ±S)(假定数据服从正态分布)

检验水平:α=0、05,一般取双侧(因事先不能肯定相比较得两者一定就是“＞”或“＜”得关系)

统计软件:名称及版本号,如:SPSS 12、0;SAS 5、0

药效学中最常涉及如下得统计检验:(具体选用方法与实验设计及数据特征等相关)

计量资料检验:单因素方差分析组间比较用q 检验

计数资料检验:χ2 检验

3

不同具体情况得统计检验归纳如下:

(摘自王洁贞主编,《医学统计学》,2002 年第1 版,郑州大学出版社,P117)

4

【结果】

假设上表内容为观察受试药对病理模型有无治疗作用,则2 组可省去,若造模以自身前后为对照作判断,则1 组也可省去,3~11 组都先造模后用药。

若指标值属计量资料,且假定各组数据呈正态分布,则其统计分析可用单因素方差分析,组间比较用q 检验。

统计分析过程:(统计软件在输入原始数据后按程序运行即可给出最终所需统计结果,但具体统计方法必须由人合理选择,故必须知道其统计学原理)

按上表3~11 组实验设计为例:

F 值法判断各组总体均数相等或不全相等。

若各组总体均数相等,则表明造模未成功,实验失败。

若各组总体均数不全相等,则可用q 检验作组间两两比较。

3 造模前后比较,若差别有统计学意义且为期望方向改变,则表明造模成功(a);

4 与3 造模前后同时段比较,若差别有统计学意义且为改善作用,则表明阳性药发挥药效

(b);