维生素C及其制剂的质量控制研究

《药物分析》设计性实验维生素C及其制剂的含量测定

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维生素C及其制剂的含量测定

[摘要] 目的了解并归纳国内对维生素C原料药及其片剂、注射液的含量测定的方法。方法以“维生素C 含量测定”和“抗坏血酸含量测定”为检索词对1992 ~ 2012年中国期刊网全文数据库(CNKI) 中的全部文献进行全文检索，对所得有关维生素C含量测定的方法进行归纳。结果归纳有维生素C原料药5种，片剂4种，注射液6种的测定方法。结论维生素C及其制剂的含量测定方法种类多样，各有特点，应根据实际检测的需求采用合适的方法。

[关键词] 维生素C；片剂；注射液；含量测定；方法

前言

维生素C（又称L-抗坏血酸）是一种酸性的己糖衍生物，是烯醇式己糖酸内脂。立体结构与糖类相似，可发生氧化与还原互变。氧化型和还原型都有生物活性。分子中第二、三两位碳上烯醇羟基的氢容易生成H+而释出，故抗坏血酸虽然不含自由羟基，仍具有有机酸的性质。在水中的溶解度为0.3g/ml。熔点190~192℃。pH=4时氧化还原电位E0=0.166V。其电离常数PK1=4.17 ，PK2=11.57 。最大吸收波长245nm（酸性）与265nm（中性）。在碱性与酸性介质中均能迅速被氧和金属离子氧化成脱氢抗坏血酸（DHAA），脱氢抗坏血酸可进一步氧化成二酮古乐糖酸（DKG）。【1】维生素C是维持人体生理机能需要的重要营养素，也是人体需要量最大的一种维生素，它具有抗氧化、清除自由基以及促进许多酶和激素形成，有效防止血管脆性，促进铁吸收，提高机体免疫功能等作用。还具有防治血管硬化、肝胆疾病、过敏性疾病，促进创伤愈合等作用。【2】由于维生素C对人类非常重要，近年来发展了一些新的测定方法，而经典方法也得到了不少改进。本文对近二十年来国内维生素C含量测定方法进行了总结。

1维生素C原料药

1.1间接光度法

实验原理：该方法基于在弱酸性介质中，有盐酸羟胺、碘酸存在下，抗坏血酸还原对氨基苯磺酸与N-1-萘乙二胺盐酸盐混合体系生成的有色物质，体系的最大吸收波长为540nm，工作曲线的线性范围为0.5~ 4.0μg/ml。方法灵敏度高，选择性好，对药用维生素C中抗坏血酸含量进行测定，结果满意。

1.1.1试剂规格

维生素C标准液：10μg/ml ；碘酸钾溶液：20μg/ml ；硫酸：0.125mol/L ；对氨基苯磺酸溶液：2g/L ；盐酸羟胺溶液：2.5g#L ；N-1-萘乙二胺盐酸盐溶液：

0.5g/L 。

1.1.2试验方法

准确吸取碘酸钾溶液1.0ml 与0.125mol/L硫酸0.8ml混合后加入10μg/ml 维生素C溶液2ml。用水稀释至5ml，加入2g/L对氨基苯磺酸溶液1. 1ml，2. 5g/L盐酸羟胺溶液1. 0ml，混合物静置25min后，加入N-1-萘乙二胺盐酸盐溶

液1.2ml ， 用蒸馏水稀释至10ml ， 在540nm 波长处测定其吸光度，试验过程中每加入一种溶液，均必须振荡使之混合均匀。

1.1.3 吸收曲线

按试验方法，在不同的波长下测定吸光度，并做空白试验，结果表明，本体系的最大吸收波长为540nm 。

1.1.4 样品分析

精密称取一定质量的样品，溶解于10g/L 草酸溶液中，过滤后用10g/L 草酸溶液定容于1L 容量瓶中，吸取10ml 于100ml 容量瓶中，用10g/L 草酸溶液稀

释至刻度，按试验方法进行测定。【3】

1.2 直接碘量法

实验原理：抗坏血酸分子中的烯二醇基具有还原性，与I 2反应定量地被氧化生成二酮基。反应式如下：

以淀粉为指示剂，用碘的标准溶液滴定抗坏血酸，过量的碘标准溶液与淀粉发生反应使溶液呈蓝色，即达到滴定终点。

1.2.1 含量测定

精密称取样品0.2g ，放入250ml 锥形瓶中，加入新煮沸过放冷的蒸馏水100ml ，再加入2mol/L 冰醋酸溶液1ml ，0.5%淀粉指示液2ml ，摇匀，立即用标定过的碘标准溶液滴定，直至溶液呈蓝色在30s 内不褪色为止。

此方法常用作食品或药剂中抗坏血酸含量的测定。方便实用，但准确度不高，

误差较大。【4】

1.3 间接碘量法

实验原理：先加过量的碘标准溶液与配制好的维生素C 溶液反应完全，用硫代硫酸钠滴定过量的碘至蓝色刚好消失。

222234622I S O I S O ---+=+

相比直接碘量法有如下优点：消除了不溶物吸附作用的影响，缩短了维生素

C 溶液与空气的接触时间，避免了碘的挥发对实验结果造成的影响。【4】

1.4反滴定碘量法

药典中常采用将碘溶解在KI溶液中以增大碘的溶解度。此实验取20%的KI 溶液5 ml于250 ml锥形瓶中，精确量取0.01 mol/L CuSO4溶液1 ml加入锥形瓶中使其充分反应，再加2 ml淀粉指示液。VC液溶于冰乙酸介质中，用其进行滴定至恰使蓝色消失为止。CuI2不稳定随即分解为Cu2I2 和游离的碘。

2CuSO4+4 KI=CuI2+2 K2SO4

2CuI2= Cu2I2+I2

空白试验：取20%的KI 溶液5 ml于锥形瓶中，加蒸馏水1 ml，再加10 滴淀粉指示剂溶液，然后用溶于冰乙酸介质中的VC 液进行滴定，边摇边滴定，直至与测定颜色一致为止。

反滴定碘量法的空白实验消除了因KI 中含有碘而产生的系统误差，也消除了人眼对溶液变色的敏感程度不同而对实验造成的误差。由于样品液能与KI 中本身含有的碘作用，也消除了因KI 中含有的碘产生的误差。反滴定法比滴定法更准确，但操作较繁琐，适合测定少批量样品。【4】

1.52，6-二氯吲哚酚滴定法

实验原理：2，6-二氯吲哚酚即为一染料，其氧化型在酸性溶液中显红色，碱性溶液中为蓝色。当与抗坏血酸反应后，转变为无色的酚亚胺（还原型）。因此，抗坏血酸可在酸性溶液中用2，6-二氯吲哚酚标准液滴定，至溶液显玫瑰红色时即为终点。

1.5.1含量测定

精密称取约0.0020g VC，放入50 ml锥形瓶中，加入新煮沸过的冷蒸馏水10 ml，加偏磷酸－醋酸试液5 ml，用二氯吲哚酚标准液滴定，至溶液显玫瑰红色在5 s 内不褪色为止；另取偏磷酸－醋酸试液5.5ml，加水15ml作为空白，用二氯吲哚酚标准液滴定，进行校正。

2，6- 二氯吲哚酚滴定法的专属性较碘量法为高，多用于含维生素C 的制剂和食品的分析。而且此法不是维生素C 的专一反应，其他还原性物质对测定有干扰。由于维生素C 的氧化速度远高于其他还原性物质，所以此法必须快速滴定才可减少干扰物质的影响。【4】

2 维生素C片

2.1 薄层扫描法

《中国药典》2000年版规定维生素C片剂的含量测定用碘量法。（2010年版中国药典所用同为碘量法）该方法操作比较繁杂，重现性较差，分析周期较长。实验原理：维生素C具有较强还原性，可使蓝色染料2，6-二氯靛酚钠定量地还原成无色的酚亚胺，而本身被氧化成去氧抗坏血酸。此反应为维生素C的特征反应。

2.1.1 试纸的制备