提取溶剂的选取

提取溶剂的选取

赤芍中所含苷类成分极性较大，在水、乙醇等亲水性溶剂中溶解度较好。以芍药苷的含量为评价指标，考察水和不同浓度的乙醇对芍药苷的提取效率，筛选赤芍药材的最佳提取溶剂。见表1。

不同提取溶媒芍药苷含量

提取溶媒水50%乙醇70%乙醇溶媒用量(倍)666提取次数(次)222提取时间(h)1.51.51.5芍药苷含量(%)

提取方法的选取

色谱条件与系统适用性

色谱柱；

流动相：甲醇-水(45∶55)；

流速：1 mL/min；

柱温25 ℃；

检测波长274 nm。

在此色谱条件下,理论塔板数大于13 000,分离度大于1.5。

2.2 对照品溶液的制备

精密称取丹皮酚对照品2.6 mg 置25 mL 量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得每1 mL 对照品溶液含丹皮酚104 μg。

2.3 供试品溶液的制备

取样品粗粉(过40 目)约1.0 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50 mL,密塞,摇匀,称定重量,超声处理(功率200 W,频率50 Hz)30 min,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀滤过。精密取续滤液1 mL,置10 mL 量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀即得,备用。

取样品粗粉(过40 目)约1.0 g,精密称定,置圆底烧瓶中,加入8 倍量75%乙醇,于80 ℃回流30 min,低温挥干乙醇,加甲醇溶解,精密取续滤液1 mL,置10 mL 量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀即得,备用。

取样品粗粉(过40 目)约1.0 g,精密称定,置圆底烧瓶中，以40％乙醇作为提取溶剂，在80℃的温度下进行提取，控制好提取的时间间隔，最好一小时一至两次。精密取煎煮液1 mL,置10 mL 量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀即得,备用。

精确称量25g赤芍粉末，将赤芍粉末置于超临界CO2萃取容器中，在18兆帕压强，25℃的温度和1.5h提取时间条件下提取，以高浓度乙醇作为萃取剂，在萃取后使用低浓度乙醇作为母液，将乙醇溶解溶解在一个500ml容量瓶中，从容量瓶中取出5mL的乙醇溶解液在稀释至100ml，然后精细微孔膜进行过滤操作，精密取续滤液1 mL,置10 mL 量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀即得,备用。

提取工艺参数的优选

表1 试验因素水平表

根据上表，若试验水平为A1B1C1，即表示该试验号赤芍药材200g，加入1 200mL、800mL40% 乙醇回流提取两次，每次1h。合并提取液，以高效液相色谱法检测芍药苷得率。其余依此类推。

考核指标的选择芍药苷为赤芍药材中的主要化学成分，本正交试验选用芍药苷的提取率及干浸膏得率为指标，考核工艺的合理性。

数据处理与分析精密量取上述样品溶液，稀释后分别应用高效液相色谱仪进行测定，按照芍药苷提取率= 芍药苷提取量/ 药材中芍药苷含量×100%，计算出样品中芍药苷的转移率，

试验安排

表2 正交试验安排及结果表

评价指标的选择