长春碱的提取分离

1.长春碱简介

分子式：C46H58N4O9

性质：又称长春质，又名长春花碱。吲哚类生物碱。

存在于夹竹桃科植物长春花中。

相对分子质量810.96，针状结晶（甲醇），熔点211~216.

溶于醇、丙酮、乙酸乙酯和氯仿，几乎不溶于水和石油醚。

硫酸盐C46H60N4O13S,熔点284~285.

2.长春花简介

学名：catharanthus

roseus

⑴基本资料：

英文名：Madagascar periwinkle

科属：夹竹桃科，长春花属

别名：五瓣莲、日日草、山矾花

形态特征：多年生草本，做一年生栽培，全草长30-50cm。叶对生，长椭圆状，基本楔形，短柄，全缘，两面光滑，主脉白色明显，长3-6cm，宽1．5-2．5cm，先端钝圆，具短尖。花单生或数朵腋生，花筒细长，约3cm，花冠五裂片，花色为蔷薇红，纯白及白色，喉部具红黄斑。萼片线状。气微，味微甘、苦。花期春至深秋。此植物，喜欢温暖、稍干燥和阳光充足的环境，若生长在荫庇处，叶片会发黄、落叶。

⑵药用历史及药用前景：

长春花最早为观赏植物，也为南非、斯里兰卡和印度等的传统民间用药，多用于治疗糖尿病，后被发现具有抗癌作用，现为国际上应用最多的抗癌植物之一，在中国长春花作为药用，始于《植物名实图考》，主要产于非洲及中国南方各省区。

随着当今世界肿瘤发病率日益增高，对抗肿瘤药物的需求与日剧增，长春花具有显著而独特的抗肿瘤作用，已成为当今抗肿瘤的重要药物，由于传统方法提取生物碱收率低，故化学合成和生物合成技术已应用于该领域，今后在扩大长春花生物碱的来源和产量的同时，应着眼于降低生物碱的毒性和增强对肿瘤细胞的靶向性，将长春花的抗

肿瘤作用更好的用于临床。

3.长春花中长春碱的提取

首先取成熟的长春花地上全株，烘干，待用。

（1）所用试剂：

苯6%酒石酸溶液氯仿，氨水无水乙醇，5%硫酸甲醇氧化铝蒸馏水75%乙醇

⑵基本思路：

长春花预处理提取

过滤萃取浓缩

溶解再浓缩萃取

层析提取成品精制

（2）具体流程：

长春花全草干粉

1：0.3（生药：水）拌匀

①

渗出液 酸水液

6%酒石酸萃取 氨水调节ph6~7 氯仿萃取 氯仿液 静置、脱水、减压蒸干 ② ③

⑤ ⑥ ⑦

纯化总生物碱

生物碱硫酸盐结晶

①加无水乙醇（2g/ml ）

②加5%体积分数硫酸与无水乙醇的混

合液调节ph 至3.8~4.1、放置

加水溶解、加氨碱化、加氯

仿提取 氯仿液

加无水硫酸钠、兑水、蒸干

溶于无水乙醇 加5%无水乙醇 与硫酸的混合液 调节ph 至3.8~4.1， 放置 溶于无水乙醇

加5%无水乙

醇与硫酸的混

合液调节

ph 至3.8~4.1， 放置 硫酸长春碱

硫酸长春新碱

具体说明：

①渗漉：长春花全草干粉（过80目筛孔），加自来水以1:0.3的比例

拌匀，放置约0.5小时，投入预先放好苯的渗漉桶中浸没，加盖密闭48小时后开始渗漉，随时添加苯以防表面流干。

②萃取：收集生药粉5倍量的苯渗漉液，与6%的酒石酸在四支串连

的玻璃管中，进行液液逆流萃取，当第一管的酸水PH为4时，放出，换入新配置的酒石酸溶液继续萃取，直至苯液全部交换完，放出1~3管中的酸水液，置分液漏斗中。

③再萃取：先加入0.4倍的氯仿，然后加约14%氨水调节PH至6~7，

振摇，放出氯仿层，以后又用水溶液体积的0.2倍氯仿振摇3次，氯仿提取液静置去水。减压蒸干，然后加少量丙酮抽松，得总弱生物碱。

④纯化：将总弱生物碱加1~1.5倍甲醇溶解，放置过夜，滤去结晶，

收集甲醇滤液减压蒸干、抽松。

⑤再纯化：将上一步得到的游离碱加0.5倍无水乙醇溶解成浓溶液，

然后加5%硫酸乙醇溶液至PH3.8~4.1，放置过夜，析出混合长春碱硫酸盐。滤出结晶。

⑥萃取提纯：将上步的结晶，加1.5~2倍的蒸馏水溶解，移入分液

漏斗中，先加1.5倍量氯仿，然后加约14%的氨水调节PH至8~9，摇晃，将游离碱提入氯仿，直至最后振摇的氯仿不呈现明显的生物碱反应为止，共约提6次，氯仿提取液加无水硫酸钠干燥，滤

出硫酸钠，滤液减压蒸干，得纯化游离弱碱。

⑦长春碱长春新碱的分离：将上述纯化游离弱碱，在真空干燥器中

充分干燥后，按1g用30g氧化铝的比例，在氧化铝柱上层析分离，洗脱溶剂为苯—氯仿混合液（相对密度1.30）。

⑧后处理：

将前段洗脱液抽干（放入P2O5的真空干燥器中干燥12小时以上），称重，加无水乙醇1.5~2倍溶解，再加5%

的硫酸乙醇混合液调节PH至2.8~4.1，密塞再25。C下放

置48小时，析出长春碱硫酸盐结晶，滤出少量无水乙醇，

立即移至真空干燥器中干燥，即为硫酸长春碱粗品。

中段洗脱液为长春次碱及交叉混合物。

后段洗脱液经减压蒸干，置真空干燥器中干燥后称重，加无水乙醇1.5~2倍溶解，再加5%硫酸乙醇混合液调节PH

至3.8~4.1“（偏3.8），在25。C下放置48小时，析出的晶

体即为长春新碱的硫酸盐粗品。

⑨精制：（补充）

加蒸馏水和甲醇使硫酸长春碱粗品在60C左右全部溶解，过滤，容器用甲醇洗涤，滤液合并，减压回收甲醇，立

即将150倍量预先加热至沸的无水乙醇加入，迅速摇匀后放

置，很快析出白色结晶，放置一段时间之后，滤出针晶，干

燥，既得硫酸长春碱精品，熔点284C