甾醇检验操作规程

Ksample 的值为待测样 1 的色谱图中的各甾醇组分（菜籽甾醇、菜油甾醇、 豆甾醇、β-谷甾醇）与内标物的峰面积之比，即： Ksample= A sample A IS
则通过下式可计算出甾醇中各组分的含量：
A [%] = Ksample/Kstandard × Р Ksample --待测样 1 的相关系数
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� 加入约 8ml 的乙酸乙酯 � 超声处理至固体物质完全溶解 � 用乙酸乙酯定容 � 吸取 1.0ml 待测样品溶液与 1.0ml 的内标液 A 混合 4.1.5 待测样品溶液 2（定性测定）的配制 � 精确称取待测样品 20.0mg 于 10.0ml 容量瓶中 � 加入约 8ml 的乙酸乙酯 � 超声处理至固体物质完全溶解 � 用乙酸乙酯定容 4.2 检测步骤 � 如 3 中给定的温度等条件对气象色谱的色谱柱、进样器和检测器进行设 置 � 进空白样 1μl � 进 1μl 的工作标样 C ，确定各甾醇单体的保留时间 各甾醇组分相对于内标胆固醇的相对保留时间为：菜籽甾醇约为 1.06， 菜油甾醇约为 1.18，豆甾醇约为 1.25，β-谷甾醇约为 1.38.（色谱柱型 号为 DB-1HT） � 重复进两针工作标样 � 进待测样溶液 1 � 进待测样溶液 2 � 对获得的气相色谱图进行定量计算 4.3 数据处理及结果计算 用内标法分析计算各甾醇的百分含量 4.3.1 定量计算 Kstandard 的值为工作标样 C 的色谱图中的各甾醇组分（菜籽甾醇、菜油甾 醇、豆甾醇、β-谷甾醇）与内标物的峰面积之比，即： Kstandard= A standard A IS
Kstandard --标准品的相关系数 Р --所用的菜籽甾醇、菜油甾醇、豆甾醇和β-谷甾醇标准品的百
分含量 4.3.2 待测样组成成分的测定 对由待测样 2 得到的气相色谱图中除去溶剂峰的所有峰进行归一化 基于峰面积确定待测甾醇的组成成分
甾醇检测标准操作规程 1. 试剂： 1.1 胆固醇 1.2 标准品 菜籽甾醇，SG，96.9% 菜油甾醇，Sigma，min65% 豆甾醇， 1.3 乙酸乙酯 2. 仪器： 气相色谱 检测器：氢焰离子检测器 色谱柱：HP-5 或 DB-1HT 3. 色谱条件： 色谱柱温度：270℃ 进样口温度：300℃ 检测器温度：300℃ 载气和流速：氮气，35ml/min 4. 检验步骤： 4.1 标准品溶液的配制 4.1.1 内标液 A 的配制（胆固醇 2mg/ml） � 精确称取 20.0mg 的内标物胆固醇于 10.0ml 的容量瓶内 � 加入约 8ml 乙酸乙酯 � 超声处理至胆固醇完全溶解 � 用乙酸乙酯定容 4.1.2 甾醇标准品溶液 B 的配制（菜籽甾醇，菜油甾醇，豆甾醇，β-谷甾醇） � 精确称取各甾醇标品（菜籽甾醇，菜油甾醇， 豆甾醇，β-谷甾醇）80.0mg 于四个 10.0ml 的容量瓶中 � 分别加入约 8ml 的乙酸乙酯 � 超声处理至固体颗粒完全溶解 � 用乙酸乙酯定容 4.1.3 工作标样溶液 C 的配制 � 分别吸取甾醇标准溶液 B（菜籽甾醇，菜油甾醇，豆甾醇，β-谷甾醇） 各 1.0ml 混合得到混合甾醇标准溶液 D � 吸取混合甾醇标准溶液 D1.0ml 与 1.0ml 的内标液 A 混合得到工作标样 C 4.1.4 待测样品溶液 1（定量测定）的配制 � 精确称取待测样品 20.0mg 于 10.0ml 容量瓶中 Sigma，95% 谷甾醇 ， Sigma，97%