提取人参皂苷并且检验以及在过程的一些注意事项

1.人参皂苷提取

人参为五加科植物人参(Panax ginseng)的干燥根，是传统名贵中药，始载于我国第一部本草专著《神农本草经》。其栽培者称为“园参”，野生者称为“山参”。人参具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神之功能，用于体虚欲脱、肢冷脉微、脾虚食少、肺虚喘咳、津伤口渴、内热消渴、久病虚羸、惊悸失眠、阳痿宫冷、心力衰竭、心源性休克等的治疗。

人参皂甙和稀HCl在醇液中进行温和酸水解，可得到三种皂甙元，齐墩果酸、人参二醇和人参三醇。而不能得到原人参二醇和原人参三醇，这是因为在酸水解过程中侧链的20－位碳原子上的羟基（－OH）与该链上的双键（C＝C）易闭环，而形成带有三甲基四氢吡喃环的人参二醇和人参三醇。水解后，除去醇、氯仿萃取物经硅胶柱层析分离即可得到三种单体皂甙元，经重结晶获得纯品，分别与已知皂甙的红外光谱相一致。

2.人参皂甙提取和甙元分离工艺流程

①人参皂甙提取工艺：

人参茎叶粗粉20g

热水提取1小时，粗滤，（棉花）

提取液药渣

加0.6g是会乳沉淀，并调至PH9－10，放置10分钟，抽滤

沉淀物滤液

浓硫酸调PH7，放置10分钟。

中性提取液

回收后，上大孔树脂柱，先用水洗至无色，再用

70％氨性醇洗至绿色。

乙醇洗脱液

回收乙醇

人参总皂甙（黄白色）

a)人参皂甙元的水解和甙元的分离流程

人参总皂甙

加含5％HCl的50％乙醇液，

加热回流2小时

沉淀水解液

（酸性皂甙元部分）加水稀释，水浴蒸去醇，氯仿萃取

3次（10，5，5ml）

水层氯仿层

干燥，

无水NaSO

4

回收氯仿

总皂甙元

少量苯溶解，硅胶柱

层析，用苯－乙酸乙脂

（8：2）洗脱组分Ⅰ组分Ⅱ组分Ⅲ

95％乙醇重 95％乙醇重 丙酮结晶 结晶3次 结晶3次

2次 齐墩果酸 人参二醇

人参三醇 mp299-301℃ mp245-250℃

mp244-246℃

1. 操作方法

人参总皂甙的提取：取人参茎叶粗粉20g ，放入烧杯用热水（80℃－90℃）提取1小时，然后用棉花粗滤，在所得滤液中加入0.6g 水石灰乳除杂并调PH9－10放置10分钟左右，过滤，再将滤液用浓硫酸（少量）调PH7，放置10分钟左右，回收提取液至少量（5－10ml ），再上大孔树脂柱（注：此柱应提前洗好，清洗办法略）先用蒸馏水洗至无色，再用70％的乙醇洗至无色，分别用小瓶接收。便得到了乙醇洗脱液，回收乙醇，便得到了人参总皂甙（黄白色）。

人参皂甙的水解

称取人参皂甙（）4－5g （不足时由老师提供），加20倍量含5％HCl 的50％乙醇溶液，加热回流2小时，放冷，加0.5倍水，水浴去醇，转入分液漏斗中，用氯仿萃取3此（10，5，5ml ），合并氯仿层，加少量无水硫酸钠干燥，回收氯仿即得总皂甙元。

甙元柱层析分离

称取100－200目硅胶（105℃活化30分钟）50g ，用苯做洗脱剂湿法装柱，柱顶放一层脱脂棉，压上数个玻璃球，放出多余的苯（至高于吸附剂1cm ），计算保留体积。总皂甙元用少量苯溶解上柱，用苯－乙酸乙脂（8：2）洗脱，薄层检识（与甙元标准品对照）相同组分合并，回收溶剂。齐墩果酸、人参二醇用95％乙醇重结晶，人参三醇用丙酮重结晶，纯品80℃干燥，收集于小瓶中。 2.人参皂甙的检验

（一）显色反应

1.醋酐—浓硫酸反应（Liebermamm-Burchand 反应）取人参皂甙样品少许，溶于冰醋酸中，加醋酐—浓硫酸试剂（19：1）数滴，混匀，呈红紫色。

2.泡沫反应：取人参皂甙样品少许于试管中，加水2－3ml 溶解，密塞，用力振摇1分钟，产生大量持久泡沫。

（二）薄层层析

1.人参皂甙TLC ：

吸附剂：硅胶G 板

展开剂：Ⅰ正定醇—乙酸乙脂—水（8：2：10）上层。

Ⅱ氯仿—甲醇—水（13：7：2）下层。

对照品：根x R 、叶x R 、花x R 甲醇液(10mg/ml)

显色剂：10％42SO H 乙醇液（V/V ），110℃加热10分钟，至棕红色斑点出现。

2.人参皂甙元TLC

吸附剂：硅胶G 板

展开剂：苯—乙酸乙脂（1：1）

对照品：人参二醇、人参三醇、齐墩果酸甲醇液

显色剂：同皂甙

（三）光谱数据

齐墩果酸：

IR 1m ax -cm L KBr ：3301，1700

NMR(3CDCl )δ：5.30，1.85，1.63，1.24，0.91，0.75

人参二醇：

IR 1m ax -cm L KBr ：3301，1626

NMR(3CDCl )δ：3.60，3.13，1.88，1.65，1.33，0.90

人参三醇：

IR 1m ax -cm L KBr ：3340，1617

NMR(3CDCl )δ：6.32，4.60，3.62，1.95，1.60，1.30，1.16，1.04，0.90，0.82

3.提取过程中的注意事项

1.萃取操作时，注意振摇不能过度剧烈，以防产生乳化现象。

2.在连续回流提取过程中，水浴温度不宜过高，应与溶剂沸点相适应。此外可加快冷凝水的流速，以增加冷凝效果。

3..在使用旋转蒸发器进行甲醇提取液减压浓缩时，因含皂苷易产生大量泡沫发生倒吸现象。故应注意观察随时调整水浴温度及旋转蒸发器转速，避免事故的发生。

4.在连续提取过程中，欲检查有效成分是否提取完全，可取提取器中提取液数滴，滴于白瓷皿中，挥散溶剂，观察有无残留物，或滴于滤纸片上，然后进行醋酐－浓硫酸反应或三氯化锑氯仿饱和溶液反应。若反应呈阴性，示已提尽。

5..回收乙醚的蒸馏操作，不必另换蒸馏装置。只将索氏提取器中的滤纸筒取出，再照原样装好，继续加热回收烧瓶中的溶剂，待溶剂液面增加至高虹吸管顶部弯曲处1cm 处，暂停回收，取下提取器，将其中乙醚移置另外容器中，如此反复操作，即可完成回收乙醚的操作。

4. 本实验具体引用到的参考文献

1.Luiz E;Bermuder Z;Martin Wu 1991（05）