猪胸膜肺炎试剂盒说明书
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为保证不同样品孵育时间一致，可用 96 孔板盛装待检样本和对照，然
后用多道移液器转移到 ELISA 微量滴定板中。
洗涤液的准备：浓缩洗涤液（20X）使用前恢复至室温（18-25℃）并充分 混匀保证充分溶解。
用蒸馏水按照 1：20 的比例的稀释浓缩洗涤液（20X）制备洗涤液（1X） （1 份浓缩洗涤液加 19 份蒸馏水）
实验原理：
微量滴定板已经用 APP1-12 血清型抗原包被。加入样本和对照，经过孵育， 如样本中含有抗体，将形成抗原-抗体复合物。经过洗板，加入过氧化物酶 结合物，它与 APP 抗原-抗体结合物再结合。洗板洗掉过量没结合的没结合 物，加入含底物 TMB 液。
呈色反应是与样本中抗体含量成正比 若存在抗体，溶液将呈现蓝色，并在加入终止液后转为黄色。 无抗体存在的情况下将不呈现任何显色反应。 在 450nm 波长检测 OD 值。
检测步骤： 在使用前，所有的试剂盒组分都必须回复到室温（21℃±5℃）。试剂
应通过轻轻涡旋、旋转混合均匀。 血清和血浆样品 –稀释 1/51: 1.加样：
孔 A1 和 B1 分别加入 100μL 阴性对照。 孔 C1 和 D1 分别加入 100μL 阳性对照。 剩下其他孔内加入 250μL 样品稀释液 2 和 5μL 待检测样品 肉汁样品 –稀释 1/2: 1. 加样 : 孔 A1 和 B1 分别加入 100μL 阴性对照。 孔 C1 和 D1 分别加入 100μL 阳性对照。 剩下其他孔内加入 50μL 洗涤缓冲液和 50μL 待检测样品 对所有样品类型： 2.孵育30 min 3 min at 21°C (5°C). 3.甩干板中液体，用 300μL 左右的洗涤液洗涤每个板孔 3 次，洗涤过程中 避免孔壁变干。 4.用稀释液缓冲液19（1X）按照1：10的比例的稀释浓缩酶标结合物（10X） 制备酶标结合物（1X）（1份浓缩洗涤液加9份稀释液）。 5.吸取100μL的酶标记结合物（1X）加入到每孔中。
实验有效性：
在下列情形下实验有效： 阳性对照的平均 OD 大于 0.35
ODPC > 0.35
阴性对照平均 OD 值小于阳性对照的 30% OD NC/ ODPC ＜ 0.3
结果判定：
对于每个样品，计算其 S/P 百分比（S/P%）
OD OD sample
NC
S/P%=
x100
ODPC ODNC
6. 孵育 30 min 3 min at 21°C (5°C). 7. 甩干板中液体，用300μL左右的洗涤液洗涤每个板孔3次，洗涤过程中 避免孔壁变干。 8. 吸取100μL的底物溶液加入到每孔中。 9.21℃（±5℃）下暗室避光孵育15 min 2 min。 10. 在每孔中加入100μL 的终止液终止显色反应。 11. 在酶标仪的 450nm 波长读结果。
IDVET 放线杆菌胸膜肺炎（APP）间接初筛试剂盒
（中文翻译仅供参考，以英文原著为准） 间接酶联免疫法检测血清或肉中所有血清型 APP（1-12 型）抗体
体外诊断适用
成都德麟科技有限公司
ＩＤＶ．ＶＥＴ技术中心
概述
放线杆菌胸膜肺炎（APP）至少有15种不同血清型，有些会导致严重的疾 病。 APP间接酶联免疫试剂盒可以检测猪血清中所有血清型APP抗体（1-12型）， 没有血清预稀释步骤。
每个样品得出一个（S/P%）
值
结果
S/P%＜25%
阴性
25%≤S/P%＜30%
可疑
S/P%≥30%
阳性
试剂盒内容
试剂 包被的微量滴定板（1-12 型 APP 包被） 酶结合物标准液（10X） 阳性对照 阴性对照
ຫໍສະໝຸດ Baidu
稀释缓冲液 2 稀释缓冲液 19 浓缩洗涤液（20X） 底物溶液 终止液（H2SO4 0.5M）
* 提供的量试剂盒标签标明. 1. 酶结合物、阴阳性对照以及底物溶液必须在 5℃（±3℃）下贮存。 2. 其它试剂可放置+2℃～+26℃保存。 3. 相同名称的洗涤液和样品稀释液可用于ID VET所有系列产品。 自备材料： 1. 微量移液器，10μL、100μL、200μL 的单道或多道微量移液器。 2. 一次性移液器吸头。 3. 96 孔酶标仪。 4. 蒸馏水 5. 手动或自动洗涤设备。 注意事项: 1. 严禁用嘴吸液 2. 底物对皮肤有刺激作用。 3. 终止液（H2SO4 0.5M）可导致严重烧伤。若接触到皮肤或眼睛，请及时 用大量清水洗涤和就医。 4. 避免底物照到强光或接触到氧化物。 5.所有单独使用的材料应净化消毒，浸在新配的 5%次氯酸钠溶液中最少 1 小时或 120℃高压灭菌。 样品准备：
后用多道移液器转移到 ELISA 微量滴定板中。
洗涤液的准备：浓缩洗涤液（20X）使用前恢复至室温（18-25℃）并充分 混匀保证充分溶解。
用蒸馏水按照 1：20 的比例的稀释浓缩洗涤液（20X）制备洗涤液（1X） （1 份浓缩洗涤液加 19 份蒸馏水）
实验原理：
微量滴定板已经用 APP1-12 血清型抗原包被。加入样本和对照，经过孵育， 如样本中含有抗体，将形成抗原-抗体复合物。经过洗板，加入过氧化物酶 结合物，它与 APP 抗原-抗体结合物再结合。洗板洗掉过量没结合的没结合 物，加入含底物 TMB 液。
呈色反应是与样本中抗体含量成正比 若存在抗体，溶液将呈现蓝色，并在加入终止液后转为黄色。 无抗体存在的情况下将不呈现任何显色反应。 在 450nm 波长检测 OD 值。
检测步骤： 在使用前，所有的试剂盒组分都必须回复到室温（21℃±5℃）。试剂
应通过轻轻涡旋、旋转混合均匀。 血清和血浆样品 –稀释 1/51: 1.加样：
孔 A1 和 B1 分别加入 100μL 阴性对照。 孔 C1 和 D1 分别加入 100μL 阳性对照。 剩下其他孔内加入 250μL 样品稀释液 2 和 5μL 待检测样品 肉汁样品 –稀释 1/2: 1. 加样 : 孔 A1 和 B1 分别加入 100μL 阴性对照。 孔 C1 和 D1 分别加入 100μL 阳性对照。 剩下其他孔内加入 50μL 洗涤缓冲液和 50μL 待检测样品 对所有样品类型： 2.孵育30 min 3 min at 21°C (5°C). 3.甩干板中液体，用 300μL 左右的洗涤液洗涤每个板孔 3 次，洗涤过程中 避免孔壁变干。 4.用稀释液缓冲液19（1X）按照1：10的比例的稀释浓缩酶标结合物（10X） 制备酶标结合物（1X）（1份浓缩洗涤液加9份稀释液）。 5.吸取100μL的酶标记结合物（1X）加入到每孔中。
实验有效性：
在下列情形下实验有效： 阳性对照的平均 OD 大于 0.35
ODPC > 0.35
阴性对照平均 OD 值小于阳性对照的 30% OD NC/ ODPC ＜ 0.3
结果判定：
对于每个样品，计算其 S/P 百分比（S/P%）
OD OD sample
NC
S/P%=
x100
ODPC ODNC
6. 孵育 30 min 3 min at 21°C (5°C). 7. 甩干板中液体，用300μL左右的洗涤液洗涤每个板孔3次，洗涤过程中 避免孔壁变干。 8. 吸取100μL的底物溶液加入到每孔中。 9.21℃（±5℃）下暗室避光孵育15 min 2 min。 10. 在每孔中加入100μL 的终止液终止显色反应。 11. 在酶标仪的 450nm 波长读结果。
IDVET 放线杆菌胸膜肺炎（APP）间接初筛试剂盒
（中文翻译仅供参考，以英文原著为准） 间接酶联免疫法检测血清或肉中所有血清型 APP（1-12 型）抗体
体外诊断适用
成都德麟科技有限公司
ＩＤＶ．ＶＥＴ技术中心
概述
放线杆菌胸膜肺炎（APP）至少有15种不同血清型，有些会导致严重的疾 病。 APP间接酶联免疫试剂盒可以检测猪血清中所有血清型APP抗体（1-12型）， 没有血清预稀释步骤。
每个样品得出一个（S/P%）
值
结果
S/P%＜25%
阴性
25%≤S/P%＜30%
可疑
S/P%≥30%
阳性
试剂盒内容
试剂 包被的微量滴定板（1-12 型 APP 包被） 酶结合物标准液（10X） 阳性对照 阴性对照
ຫໍສະໝຸດ Baidu
稀释缓冲液 2 稀释缓冲液 19 浓缩洗涤液（20X） 底物溶液 终止液（H2SO4 0.5M）
* 提供的量试剂盒标签标明. 1. 酶结合物、阴阳性对照以及底物溶液必须在 5℃（±3℃）下贮存。 2. 其它试剂可放置+2℃～+26℃保存。 3. 相同名称的洗涤液和样品稀释液可用于ID VET所有系列产品。 自备材料： 1. 微量移液器，10μL、100μL、200μL 的单道或多道微量移液器。 2. 一次性移液器吸头。 3. 96 孔酶标仪。 4. 蒸馏水 5. 手动或自动洗涤设备。 注意事项: 1. 严禁用嘴吸液 2. 底物对皮肤有刺激作用。 3. 终止液（H2SO4 0.5M）可导致严重烧伤。若接触到皮肤或眼睛，请及时 用大量清水洗涤和就医。 4. 避免底物照到强光或接触到氧化物。 5.所有单独使用的材料应净化消毒，浸在新配的 5%次氯酸钠溶液中最少 1 小时或 120℃高压灭菌。 样品准备：