农业类转基因动物技术及其研究进展PPT优秀课件
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(二)基因表达技术 在乳腺生物反应器中还需
要构建乳腺特异表达载体,以 驱动目的基因在乳腺中特异和 高效表达。分离和克隆动物各 种蛋白的染色体基因,并改造 成能带动目的基因在乳腺中表 达的载体。
(三)外源基因的导入方法
1. DNA显微注射法: 用精细的显微注射针将外源基因
直接注入单细胞受精卵的核中,使外 源基因整合到动物的基因组中。是目 前最常用的方法,优点是基因用量省, 导入确实可靠,准确性较高,但成功 率很低,一般为1—2%。
显微注射法转基因的效率
动物种类 注射胚胎数 后代数 转基因动物% 备注
小鼠 12314
1847 2.6
18次
家兔 1904
218 1.5
1次
大鼠 1403
353 4.4
5次
绵羊 5424
556 0.9
10次
猪
19397
1920 0.9
20次
牛
1018
193 0.7
7次
2. 扎刺法: 先将胚胎放在含有目的基因的培
4. 逆转录病毒感染法: RNA病毒感染宿主细胞后,
反转录成相应的DNA,并整合 到宿主的染色体DFra Baidu bibliotekA上,得到
转基因动物。目前只有小鼠与 鸡上有成功的报导。
5. 胚胎干细胞介导法: ES细胞可以在体外大量培养,并
导入外源基因,然后将其植入正常发 育的囊胚腔中,ES细胞会很快地与受 体内细胞团聚集在一起共同参与正常 胚泡的发育,从而发生个体基因的转 移。
特点:
1. 表达产物生物活性稳定; 2. 转基因动物可以繁殖扩群,进行 大规模生产;
3. 产品成本低,多为草食动物,乳 房又是高效合成蛋白的器官;
4. 产品已提纯,质量高; 5. 对转基因动物自身并无不良影响。
当前用动物乳腺反应器生产开发的主要产品
产品
抗血凝酶III 抗胰蛋白酶 葡萄糖苷酶 C蛋白
1968,鸡; 1974,鼠; 1982,超级小鼠; 1994,超级猪; 现已获得了多种基因、多畜种、多个体的转基因 动物。
(2)通过建立人类疾病的转基因动物模型, 揭示人类疾病的发病过程、机理及探索治疗途径;
(3)把目的基因在血液循环系统或乳腺中表达的
转基因动物叫动物生物反应器,其中在乳腺中表达的 称为动物乳腺生物反应器。
动物
山羊
绵羊
家兔
猪
医疗功能 生产水平
后天缺乏症 肺囊性纤维 糖元贮积病 凝血病 化
14 克/升 15 克/升 8克/升 10 克/升
市场需求量 75 千克 5000千克 20 千克 1000千克
开发状况 三期临床 二期临床 二期临床 不详
开发单位 Genzyme 公 PPL 公 司 Pharming 公 北卡大学 司(美) (英) 司(荷) (美)
国内也已加大研究力度,但与国外 水平差距仍然比较大。
四、转基因猪研究进展
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养液中,然后用细针扎到细胞或细胞 核里,针快速拔出,此时外源基因就 进入细胞核,细胞膜结构的流动性随 之而关闭,胚胎中流入的溶液很少。 此法比显微注射快,对胚胎损害小, 但转基因频率更低。
3. 精子载体法: 将精子与目的基因共育,在一定条
件下使精子携带外源基因并进行人工 授精,这样可将外源基因导入。此法 简单易行,但可靠性很差,仍有争议。
(四)动物克隆技术 对转基因动物进行克隆,可以由
一头转基因动物生产出性能一致的群 体。
(五)产品的纯化或利用 获得的转基因动物要进行合理的
饲养管理和利用。从乳腺反应器获得 的产品作药用,纯度极高,需要纯化 技术。
三、动物乳腺反应器的研究开 发现状与进展
动物乳腺生物反应器是20世纪90年代才出现 的利用转基因动物的乳房作为生物发酵工厂,大 规模生产某些生物活性物质或药用蛋白的高新技 术。目前主要从下列两个方面进行研究和开发: 第一,提高乳的营养价值,如导入乳铁蛋白基因, 提高乳铁蛋白在乳中的不足;第二,生产药用珍 稀蛋白。
利用转基因动物作为生物反应器,生产稀有的、 用其它方法不易得到的有生物活性的人类药用蛋白, 这方面最具有诱惑力和商业价值,1991年美国DNA公 司成功获得了能生产人血红蛋白的转基因猪,通过这 些能高效表达的转基因猪来提供大量安全、廉价的血 红蛋白,既可节约医药费,又能避免使用过期、有传 染性(如肝炎、爱滋病等)的血液;
现已成功地在山羊、绵羊与猪的奶中获得了纤维 蛋白溶酶原激活因子和抗凝集因子;在转基因家畜血 中得到了人免疫球蛋白、干扰素、胰蛋白酶和生长激 素等。
(4)利用转基因猪生产人体器官,为人体器 官移植提供供体。
二、技术路线
(一)目的基因的分离和改造 为了改进产品的功能和知识产权,需
对外源基因进行有目的的改造。目前国际 上竟争最激烈的是人类基因。
转基因动物技术及其研究进展
一、概述
转基因技术就是把某一特殊基因从动物细胞中分 离出来,或人为构建外源目的基因,然后再将其转移 至另一动物的生殖细胞或早期胚胎,使其稳定地整合 到动物基因组中,并使该动物获得前者的遗传性而且 能遗传给后代,从而改变动物品种,获取人类所需的 特殊物质。利用该项技术获得的动物就是转基因动物。