色谱分析法导论优秀课件

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3. 色谱峰（peak）是流出曲线上的突起部分。 正常色谱峰、拖尾峰和前延峰
•对称因子fs
(symmetry factor) ：
fs W 0 .0 5 h /2 A ( A B )/2 A
0.95~1.05 <0.95 >1.05
对称峰 前延峰 拖尾峰
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2、按操作形式分类
（1）柱色谱：
填充柱色谱—固定相填充到柱管内 毛细管柱色谱—把固定相涂在毛细管内壁上， 中间是空的。
（2）纸色谱：滤纸为固定相的色谱法，流动相
是含一定比例水的有机溶剂，样品在滤纸上展开 进行分离。
（3）薄层色谱：把固体固定相压成或涂成薄膜
的色谱法。
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3、按分离原理分类
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▪ 色谱法中共使用两相
固定相—固定不动的相 CaCO3 流动相—推动混合物流动的液体 石 油醚
▪ 色谱法：混合物在流动相的携带下通过 色谱柱分离出几种组分的方法。
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固定相：
（1）固体吸附剂：CaCO3、Al 2O3等 （2）液体固定相（载体+固定液——高沸点有
机化合物，涂在载体上）
（二） 色谱保留值——定性的依据
组分在色谱柱中停留的数值，可用时间t 和所 消耗流动相的体积来表示。组分在固定相中溶解性 能越好，或固定相的吸附性越强，在柱中滞留的时 间越长，消耗的流动相体积越大，固定相、流动相 固定，条件一定时，组分的保留值是个定值。
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1.死时间(dead time) t0——不被固定相吸附或溶解的组 分流经色谱柱所需的时间。
固定相
分离机制
吸附色谱
吸附剂
吸附能力
分配色谱
离子交换色 谱
分子排阻色 谱
液体 离子交换剂 凝胶或分子筛
分配系数或溶解 度
交换能力或亲和 力
阻滞或渗透作用
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色谱与光谱的区别：
色谱具有分离与分析两种功能 光谱没有分离功能
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第二节 色谱过程和基本原理
一、色谱过程 实现色谱操作的基本条件是必须具备相对运
（1）气固色谱：气体作流动相，固体吸附剂作固 定相。
（2）气液色谱：气体作流动相，固定液作固定相。
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液相色谱—液体作流动相
（1）液固色谱：液体作流动相，固体吸附剂作固 体相。
（2）液液色谱：液体作流动相，固定液作固定相。
超临界液体色谱——超临界流体作色谱 流动相。
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两组分的调整保留值之比பைடு நூலகம்
r2,1
t' R2
t' R1
V' R2
V' R1
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(三) 定量参数
1. 色谱峰的高度h(peak height)-色谱峰最高点与基线 之间的距离，可用mm ,mV， mA表示。峰高低与组 分浓度有关，峰越高越窄越好。
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2.保留时间 tR(retention time) 组分流经色谱柱时 所需时间。进样开 始到柱后出现最大 值时所需的时间。 操作条件不变时， 一种组分有一个tR定 值，定性参数。
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3.调整保留时间t’R
(adjusted retention
t’R
time)—扣除了死时间
动的两相，固定相(stationary phase)和流动 相(mobile phase)。
色谱过程是组分的分子在流动相和固定相间 多次“分配”的过程。
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二、色谱图中的基本术语
（一）色谱流出曲线与色谱峰
1.色谱图（chromatogram） 混合物样品（A+B）→色谱柱中分离→检测器→记录
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（1）CaCO3 吸附，使色素在柱中停滞下来。 （2）被石油醚溶解，使色素向下移动
各种色素结构不同，受两种作用力大小 不同，经过一段时间洗脱后，色素在柱子上 分开，形成了各种颜色的谱带，这种分离方 法称为色谱法。
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Tsweet的实验
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下来。组分从色谱柱流出时，各个组分在检测器上所产 生的信号随时间变化，所形成的曲线叫色谱图。
记录了各个组分流出色谱柱的情况，又叫色谱流出 曲线。
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2.基线（baseline）
在实验操作条件下， 色谱柱后没有组分 流出的曲线叫基线。
稳定情况下，一 条直线。
基线上下波动称 为噪音。
中载气所占的体积。
V0＝t0 Fc
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6.调整保留体积
V
' R
(adjusted retention
volume)：由保留体积扣除死体积后的体积
V R ' V RV 0tR ' F c
注意：VR’是定值，tR’与FC成反比
7.相对保留值r(relative retention) ：
的保留时间。t’R=tR-t0 又称校正保留时间，实
际保留时间。
t’R体现的是组分在 柱中被吸附或溶解的时
间。
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• 4. 保留体积VR(retention volumn)-从进样
开始到某个组分在柱后出现浓度极大时，所 需通过色谱柱的流动相体积。
VR tR Fc
5.死体积V0（dead volumn）—不被固定相滞留的组 分流经色谱柱所消耗的流动相体积称死体积，色谱柱
一次 可以测多种样品 应用范围广——气体，液体、固体物质
化学衍生化再色谱分离、分析
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2. 色谱法的发展
柱色谱
薄层色谱 纸色谱
气相色谱
经典液相色谱法
色谱－光谱联用 多维色谱 智能色谱
高效液相色谱 超临界流体色谱
毛细管电泳法
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二、色谱分析法分类
1、按两相状态分类
气相色谱—气体作流动相
色谱分离法一定是先分离。后分析
一定具有两相；固定相和流动相
分离：利用组分在两相中分配系数或吸附能力的 差异进行分离
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色谱法的特点
✓ “三高”、“一快”、“一广”
高选择性——可将性质相似的组分分开 高效能——反复多次利用组分性质的差异
产生很好分离效果 高灵敏度——10-11~10-13g，适于痕量分析 分析速度快——几~几十分钟完成分离
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第一节 概述
一、色谱分析法简介
1、色谱法的产生
色谱法是一种分离技术，它是 俄国植物学家茨维特1906年创立的。 分离植物叶子中的色素时，将叶片的 石油醚（饱和烃混合物）提取液倒入 玻璃管中，柱中填充CaCO3粉末 （CaCO3 有吸附能力)，用纯石油醚 洗脱（淋洗）。