KX-078芒果苷的提取与分离研究

摘要

芒果叶为漆树科植物芒果的干燥叶，含有止咳化痰作用的有效成分芒果苷[1]，是生产芒果止咳片、银花芒果颗粒剂等中成药的主要原料。芒果苷的现代药理研究表明，其还具有免疫调节、抗菌、抗病毒、抗肿瘤等作用[2-4]。本实验采用聚酰胺对芒果叶的总黄酮物质进行分离提纯，重点考察此过程中利用再生聚酰胺分离芒果苷的效果，然后采用红外光谱法、高效液相色谱等方法进行纯度分析。实验结果表明，芒果叶经过酒精提取，再生后的聚酰胺柱仍能分离得到纯度较高的芒果苷。在分离纯化的过程中，酒精的浓度以及含量，聚酰胺的再生处理以及实验时间等等都对实验有较大的影响。

关键词：芒果叶；芒果苷；聚酰胺；分离精制

ABSTRACT

Mango leaves dry sumac leaves of plants,The role of containing the active ingredient in cough and phlegm is inside mangiferin,It is the production of cough mango slices,mango Yinhua the main raw material of proprietary Chinese medicines particulate agents Mangiferin modern pharmacological studies have shown that It also has immunomodulatory,antimicrobial,anti-virus, anti-tumor effects In this study, polyamide resin，mango leaves on the separation and purification of total flavonoids,and then analyzed by high performance liquid chromatography purity. The results showed that mango leaves after alcohol extraction, separation and purification of polyamide column with high purity can be mangiferin. In the extraction and purification process,the alcohol concentration and content,processing and recycling of polyamide experimental time,and so are a great influence on the experiment. KEYWORDS: Mango leaves;mango glycosides;extraction

芒果苷的提取与分离研究

1 绪论

1.1 前言

芒果苷(mangiferin)，又名芒果素、知母宁，分子式为C19H18O11，分子量为422，熔点267～272℃，在紫外检测下240nm，258nm，316 nm，366 nm有明显的吸收，淡灰黄色针状结晶（50%乙醇）。熔点267～272℃（分解）。旋光度+43.3°（c=0.9，吡啶），32°（乙醇）。略溶于甲醇、乙醇、水、可溶于热稀甲醇、热稀乙醇，不溶于非极性溶剂，与fecl3试剂反应呈污绿色，对Hcl-mg反应呈橙红色。芒果苷是一种四经基毗酮的碳糖昔，属双苯毗酮类黄酮类化合物，在多种植物中存在，芒果苷具有广泛的药理活性，除了传统意义上的抗氧化，抗炎，抗变态反应，抗病毒，保肝等生物活性外，近年来对其治疗糖尿病，降血脂，免疫调节以及抗治疗肿瘤作用的研究日趋深入，开发芒果苷作为治疗糖尿病，降血脂，治疗自身免疫性疾病以及防治肿瘤药物的前景十分广阔[6]。因此，芒果苷制品将更受人们欢迎而获得迅速发展。

1.2 芒果苷药理作用研究概况

1.2.1对中枢神经系统的作用

芒果苷具有明显的中枢神经系统兴奋作用，50~100 mg/kg剂量的芒果苷腹腔注射可使所有受试动物出现动作震颤、竖毛、强迫性撕打和自主活动增加等症状。黄华艺等[7]的研究认为，芒果苷具有清除脑组织中过氧化脂质的作用，减轻过氧化脂质对神经元的损伤，从而保护神经元的正常功能。

1.2.2对呼吸系统的作用

邓家刚等[8]的研究表明，芒果苷对豚鼠组胺、乙酰胆碱混合引喘有明显延长引喘潜伏期作用；对小鼠浓氨水引咳可明显延长引咳潜伏期，并明显减少小鼠咳嗽次数;对小鼠醋酸所致腹腔毛细血管通透性增高有明显抑制作用；对小鼠气管酚红排泌有明显促进作用。芒果苷具有肾上腺糖皮质激素样抗炎作用，可降低毛细血管通透性，其抗炎反应率达38%。

1.2.3对心血管系统的作用

1~2 mg剂量的芒果苷对正常或功能低下的离体Ringer' s液灌注蛙心均有短暂，确切的增强心肌收缩力的作用，且该作用不被普萘洛尔所阻断。因此，它可能是一种心脏直接刺激剂[8]。在心肌缺血再灌注损伤中，芒果苷能清除心肌缺血再灌注产生的NO和活性氧，降低缺血再灌注心脏冠状动脉流出物中乳酸脱氢酶和肌酸激酶的活力，保护心肌缺血再灌注损伤，0.1mmol/L芒果苷的保护作用与1 500 U/ml SOD和过氧化氢酶相同[9]。

1.2.4抗病毒作用

Zheng等[10]使用组织培养技术研究了芒果苷在单纯疱疹病毒中的抗病毒效应，表明芒果苷具有体外抗I型单纯疱疹病毒(HSV-I)作用，空斑减少率为56.8%，其抗病毒作用归因于它抑制细胞内病毒复制的能力。

1.3 芒果苷的常用提取和纯化方法

1.3.1有机溶剂萃取

这是目前国内外使用最广泛的方法，很容易实现工业化生成。其原理是利用黄酮类化合物与混入杂质极性不同，选用不同的溶剂萃取。常用的有机溶剂有甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等，一般采取乙醇为提取溶剂。高浓度的乙醇(如90%~95%)适于提取苷元，浓度60%左右的乙醇适于提取苷类。提取次数一般为2~4次，提取方法有热回流提取和冷浸提取两种方式。传统的热回流提取法具有成本低、安全性高、适合工业生产等优点。缺点是：①总黄酮提取率低；②温度过高导致部分黄酮类化合物分解；③由于提取溶剂中含水，在加热状态下，一些溶于水的杂质如糖类、蛋白质等一并进入提取液中，加大了进一步分离的困难。

1.3.2 热水提取

此方法只限于提取苷类。虽然设备简单，但因提取杂质多、黄酮收率低，故不常使用。

1.3.3 碱性稀醇或碱性水提取

黄酮类成分大多具有酚羟基，可用碱性水或碱性稀醇浸出，浸出液经酸化后析出类黄酮化合物。需要注意的是，应用此方法时，所用碱的浓度不宜过高，以免在强碱条件下加热破坏黄酮类化合物的母核。

1.3.4系统溶剂提取

用极性由小到大的溶剂依次提取，可以提取出大多数游离的黄酮化合物，但此法目前仅用于实验室，很难工业化。

1.3.5超滤法提取

选用超滤法可以提高提取物的纯度，并且在提取生产过程中，可以减少废水排放，避免臭水、污水产生，环保且降低生产成本。

2 实验部分

2.1 芒果叶中总黄酮的提取

2.1.1 材料仪器与试剂

试剂：分析纯无水乙醇、石油醚、柠檬酸、蒸馏水等

材料：芒果叶（采自广东海洋大学校园内，洗净晾干切碎备用）

2.1.2 实验仪器设备

UNIC UV-2202 紫外可见分光光度计

SHB 循环水式多用真空泵

RE-52C 型旋转蒸发器

PHS-3C 型数字酸度计

恒温水浴锅等。

2.1.3总黄酮提取方法

工艺流程：芒果叶粉碎→多次乙醇回流提取→滤液合并→滤液浓缩→石油醚