松杉灵芝的化学成分研究_

收峰为吡喃糖环C -O -C 的对称振动峰。

4种多糖的紫外光谱结果分析:多糖PPQ 50-1、PPQ50-2、PPQ 70-1和PPQ70-2水溶液在260nm 和280nm 处均无紫外吸收,表明4种多糖中均不含蛋
白及核酸,即它们均非糖蛋白复合物。

PPQ50-2的NaIO 4氧化反应:由于每含1mo L (1→4)糖苷键,在NaIO 4氧化中消耗1m oL NaIO 4,而每1moL (1→6)糖苷键,在NaIO 4氧化中消耗2moL NaIO 4,1m oL PPQ 50-2单糖残基消耗1.22moL NaIO 4,证明在PPQ50-2中既含有(1→4)糖苷键,又含有(1→6)糖苷键。

此外,甲酸测定实验表明,1moL 单糖残基生成0.12m oL 甲酸。

在PPQ50-2的1H-NM R 谱中,D 5.02,5.16,5.21,5.30显示该多糖有4个异头碳上的氢质子信号,D 3.6～4.8则为糖基上的其他氢质子信号。

在PPQ 50-2的13C -NM R 谱中,D 98.57、99.04、99.63、99.98表示该多糖有4个异头碳信号,根据文献报道[15]
可知:A -D -葡聚糖的异头碳化学位移小于103,B -D -葡聚糖的异头碳化学位移大于103,故PPQ 50-2的葡萄糖应为A
-构型。

D 77.55、73.25、72.35处化学位移表明葡萄糖中有未发生取代的C-2、C-3和C-4,而D 78～85内有很弱的可见峰,则表明该多糖中也存在少数在C -2、C -3和C -4位发生取代的葡萄糖残基。

D 69附近的化学位移表明有发生取代的C-6,D 58.61和61.03的化学位移表明还存在未取代的C -6,因此可能还具有A 分支结构。

综合以上各项分析可知,PPQ 50-2糖链的主链结构应为A -吡喃型D -葡聚糖。

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松杉灵芝的化学成分研究(Ⅱ)
刘　超1,普琼惠2,王洪庆1,陈若芸1*
X
(1.中国医学科学院中国协和医科大学药物研究所,北京　100050; 2.武警总队医院药局,云南昆明　650111)摘　要:目的　研究松杉灵芝子实体的化学成分。

方法　采用硅胶、凝胶色谱法进行分离纯化,波谱法进行结构鉴定。

结果　从乙醇提取物的醋酸乙酯部分分离得到8个三萜类化合物。

结构鉴定为:灵芝醇A (gano der io l A ,Ⅰ)、灵芝酮三醇(g anodermano nt riol ,Ⅱ)、灵芝三醇(ganoder matr iol ,Ⅲ)、灵芝酸C (g ano der ic acid C ,Ⅳ)、灵芝酸A (g an-oderic acid A ,Ⅴ)、
赤芝酮A (lucido ne A ,Ⅵ),赤芝酸C (lucidenic acid C ,Ⅶ)、赤芝酸L M 1(lucidenic acid L M 1,・1610・中草药　C hinese Traditional and Herbal Drugs 第38卷第11期2007年11月
X 收稿日期:2007-02-18
作者简介:刘　超(1979-),理学学士,中国医学科学院药物研究所天然产物化学研究室研究实习员。

*通讯作者　陈若芸　Tel:(010)83161622　E-mail:ruoyun chen@
Ⅷ)。

结论　化合物Ⅰ～Ⅷ均为首次从松杉灵芝中分离得到。

关键词:松杉灵芝;灵芝醇A;灵芝酮三醇;灵芝三醇;灵芝酸C;灵芝酸A;赤芝酮A;赤芝酸C;赤芝酸L M1
中图分类号:R284.1 文献标识码:A 文章编号:0253-2670(2007)11-1610-03
Chemical constituents from fruiting bodies of Ganoderma tsugae(Ⅱ)
LIU Chao1,PU Qiong-hui2,WANG Hong-qing1,CHEN Ruo-yun1
(1.Institute o f M ater ia M edica,Chinese A cademy of M edical Sciences and Peking U nion M edical Colleg e,Beijing100050,
China; 2.Chinese P eople A r med P olice Gener al Ho spit al P harma cies,K unming650111,China) Abstract:Objective　T o study the chemical co nstituents fro m the fr uiting bodies of Ganoderma tsug-ae.Methods　To iso late the compounds by silica gel and Sephadex LH-20column chromatog raphy and to elucidate their structures by m eans of spectr al analyses.Results　Eight triterpenoids w ere obtained fro m EtOAc fraction of EtOH extract and identified as g anoder io l A(Ⅰ),ganoderm ano ntriol(Ⅱ),g ano derma-tr io l(Ⅲ),ganoderic acid C(Ⅳ),ganoderic acid A(Ⅴ),lucidone A(Ⅵ),lucidenic acid C(Ⅶ),and luci-denic acid LM1(Ⅷ).Conclusion　Com po undsⅠ-Ⅷare all isolated fro m G.tsugae for the fir st time.
Key words:Ganoderma tsugae M urr.;g ano deriol A;g anoderm ano ntriol;g ano dermatriol;g anoderic acid C;g ano deric acid A;lucidone A;lucidenic acid C;lucidenic acid LM1
松杉灵芝G anoderma tsugae Murr.为担子菌纲多孔菌科灵芝属真菌,分布于黑龙江、吉林、甘肃等省,民间多当灵芝入药,具有扶正固本,滋补强壮等功效。

近年来有其具有增强脾脏NK细胞活性、促血浆IFN因子生成及保肝、抗肿瘤和增强细胞免疫效应的相关报道[1]。

笔者已报道从松杉灵芝子实体乙醇提取物的醋酸乙酯部分分离得到的6个三萜类化合物[2],分别为灵芝酸B(ganoderic acid B)、灵芝酸B甲酯(methy l g ano derate B)、赤芝酸C甲酯(m ethyl lucidenate C)、赤芝酸A(lucidenic acid A)、赤芝酸A甲酯(m ethyl lucidenate A)和灵芝酮二醇(ganodermanondiol)。

现在又从该部分分离得到8个三萜化合物,结构鉴定为:灵芝醇A(ganoderiol A,Ⅰ)、灵芝酮三醇(ganodermanontriol,Ⅱ)、灵芝三醇(g ano dermatriol,Ⅲ)、灵芝酸C(gano deric acid C,Ⅳ)、灵芝酸A(g anoderic acid A,Ⅴ)、赤芝酮A (lucidone A,Ⅵ),赤芝酸C(lucidenic acid C,Ⅶ)、赤芝酸LM1(lucidenic acid LM1,Ⅷ)。

化合物Ⅰ～Ⅷ均为首次从该真菌中分离得到。

1　仪器与材料
XT4-100显微熔点测定仪;IMPACT-400傅立叶变换红外光谱仪;Auto spec U ltim a ET OF质谱仪;M ercury-500型核磁共振仪测定各相关数据。

实验用硅胶为青岛海洋化工厂产品;Sephadex LH-20为Pharmacia进口分装;各种溶剂均为北京化工厂产品。

松杉灵芝子实体为人工栽培品种,产于福建,经中国科学院微生物研究所张小青研究员鉴定。

2　提取与分离
10kg松杉灵芝子实体粉碎后,用95%乙醇回流提取3次,合并提取液,减压浓缩至干,得浸膏632.3g。

混悬于水后,依次用石油醚、醋酸乙酯和正丁醇萃取。

其中醋酸乙酯部分共282.1g(100～200目硅胶400g拌样,2650g填柱),以氯仿-甲醇梯度洗脱,共分成7个部分,Ⅰ:氯仿部分25.48g;Ⅱ:氯仿-甲醇(95∶5)162.24g;Ⅲ:氯仿-甲醇(9∶1) 33.25g;Ⅳ:氯仿-甲醇(8∶2)26.70g;Ⅴ:氯仿-甲醇(7∶3)6.32g;Ⅵ:氯仿-甲醇(1∶1)1.82g;Ⅶ:甲醇部分3.58g。

Ⅰ和Ⅱ部分经反复硅胶和凝胶柱色谱分离,从中分离得到化合物Ⅰ～Ⅷ。

3　结构鉴定
化合物Ⅰ:白色针晶,mp232～234℃。

Lieber-m ann-Burchard反应阳性。

IR M K Br max(cm-1):3384, 2918,2848,1622,1468,1373,1036。

EI-M S m/z (%):474[M+](30),456[M-H2O]+(5),441[M-H2O-M e]+(10),398(95),380(28),311(42),271 (100),253(82),225(43)。

1H-NM R(C5D5N,400 M Hz)D H:5.56(1H,m,H-11),5.40(1H,d,J=6.5 Hz,H-7),4.31,4.12(各1H,d,J=13.5Hz,H-26), 4.17(1H,d,J=12.5Hz,H-24),3.47(1H,t,J= 10.0Hz,H-3),1.64(3H,s,CH3-27),1.21(3H,s, CH3-19),1.13(3H,s,CH3-31),1.10(3H,s,CH3-32),0.94(3H,s,CH3-30),0.90(3H,d,J=6.5Hz, CH3-21),0.66(3H,s,CH3-18)。

13C-NMR数据见表1。

以上数据与文献报道的lanosta-7,9(11)-diene-
・
1611
・
中草药　C hinese Traditional and Herbal Drugs　第38卷第11期2007年11月
3B,24,25,26-tetrol(即灵芝醇A)一致[3],因此确定化合物Ⅰ为灵芝醇A。

化合物Ⅱ:白色结晶,m p168～170℃。

Lieber-mann-Bur chard反应阳性。

13C-NM R数据见表1。

以上数据与文献报道的24(S)-25,26-trihy drox y-5A-lano sta-7,9(11)-dien-3-one(即灵芝酮三醇)一致[4],因此确定化合物Ⅱ为灵芝酮三醇。

化合物Ⅲ:白色结晶,mp189～191℃。

Lieber-mann-Burchar d反应阳性。

13C-NMR数据见表1。

经对比5A-lanosta-7,9(11),24-triene-3B,26,27-triol, 13C-NM R和DEPT数据[5],确定化合物Ⅲ为灵芝三醇。

化合物Ⅳ:白色针晶,mp125～127℃。

Lieber-mann-Bur chard反应阳性。

13C-NM R数据见表1。

IR、EI-MS、1H-NM R、13C-NM R数据与文献报道的7B-hy-dr oxy-3,11,15,23-tetraoxo-5A-lanosta-8-en-表1　化合物Ⅰ～Ⅷ的13C-NMR数据(CDCl3,100MHz) Table1　13C-NMR Data of compoundsⅠ-Ⅷ
(in C DC l3,100MHz)
碳位ⅠaⅡⅢⅣa,bⅤa,bⅥⅦbⅧ
1　35.7　36.5　36.4　36.0　36.0　34.8　34.5　35.1 228.134.827.734.634.627.728.128.1 379.0216.878.1215.8216.178.278.177.4 438.747.539.447.147.138.938.238.6 549.150.348.848.849.049.149.149.1 623.023.723.529.029.726.628.127.6 7120.3119.9121.066.068.766.766.366.9 8142.5142.8142.9159.8161.5156.4157.4156.8 9145.9144.5146.6141.0139.9142.8141.9142.7 1037.837.837.838.538.338.637.638.8 11116.2117.2116.5198.1199.7196.5199.5198.0 1237.437.238.050.852.449.178.350.3 1343.843.844.145.246.744.951.945.3 1450.350.750.659.054.758.860.259.4 1527.827.928.1216.472.2216.1217.2217.9 1631.933.531.941.636.935.838.641.0 1751.051.051.246.348.654.046.646.1 1815.715.716.018.117.631.311.917.4 1922.722.523.118.319.718.418.718.4 2036.536.636.432.333.1205.031.634.8 2118.618.618.619.620.319.120.518.0 2231.531.436.849.549.930.430.4 2328.928.924.6208.6208.929.530.7 2479.479.3127.646.847.1177.6178.1 2573.873.3140.835.635.6
2667.767.765.5178.3178.2
2721.022.058.617.617.6
3027.925.428.727.027.228.227.528.1 3115.821.016.620.820.815.415.415.4 3225.625.325.825.219.624.723.124.4
a)in C5D5N　b)in125M Hz
26-o ic acid(即灵芝酸C)一致[6],因此确定化合物Ⅳ为灵芝酸C。

化合物Ⅴ:白色针晶,mp233～235℃。

Lieber-m ann-Burchard反应阳性。

13C-NM R数据见表1。

IR、EI-MS、1H-NM R、13C-NMR数据与文献报道的7B, 15A-dihydr ox y-3,11,23-triox o-5A-lanosta-8-en-26-o ic acid(即灵芝酸A)一致[7],因此确定化合物Ⅴ为灵芝酸A。

化合物Ⅵ:白色结晶,mp280～281℃。

Lieber-m ann-Burchard反应阳性。

13C-NM R数据见表1。

IR、EI-MS、1H-NM R、13C-NMR数据与文献报道的3B, 7B-dihydrox y-4,4,14A-trimethy l-11,15,20-triox o-5A-preg n-8-en(即赤芝酮A)一致[8],因此确定化合物Ⅵ为赤芝酮A。

化合物Ⅶ:白色针晶,mp199～200℃。

Lieber-m ann-Burchard反应阳性。

13C-NM R数据见表1。

IR、EI-MS、1H-NM R、13C-NMR数据与文献报道的7B-hydrox y-3,11,15,23-tetrox o-5A-lanosta-8-en-26-o ic acid(即赤芝酸C)一致[9],因此确定化合物Ⅶ为赤芝酸C。

化合物Ⅷ:白色针晶,mp130～131℃。

Lieber-m ann-Burchard反应阳性。

13C-NM R数据见表1。

IR、EI-MS、1H-NM R、13C-NMR数据与文献报道的3B, 7B-dihydrox y-4,4,14A-trimethyl-11,15-diox o5A-chol-8-en-24-oic(即赤芝酸LM1)一致[9],因此确定化合物Ⅷ为赤芝酸LM1。

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