柑桔黄龙病监测方法

柑桔黄龙病监测方法
柑桔黄龙病监测方法（试行）
为规范柑桔黄龙病疫情监测工作，及时掌握疫情发生、发展动态，特制定本办法。

本办法规定了柑桔黄龙病菌监测区域、监测布点、监测时期、监测方法等要求。

本办法适用于我省各地柑桔黄龙病的监测。

1监测准备
收集当地柑桔、金柑属和枳属植物等芸香科植物的种植情况，柑桔黄龙病菌发生历史和现状等有关资料；制定简便易行的柑桔黄龙病菌监测计划。

2监测区域
2.1未发生区
重点监测疫情发生高风险区域，如：从疫情发生区调入柑桔属、金柑属和枳属等芸香科植物的种苗及产品的地区，境外柑桔属、金柑属和枳属植物引种种植区，柑桔属、金柑属和枳属等芸香科植物种苗繁育基地等高风险区域。

主要监测是否传入柑桔黄龙病菌。

2.2发生区
重点监测发生疫情的有代表性地块和发生边缘区。

主要监测多年种植柑桔属、金柑属和枳属植物等植物，并有柑桔黄龙病发生历史的地块。

监测柑桔黄龙病的发生动态和扩散趋势。

3监测作物
重点监测柑桔属、金柑属、枳属等芸香科植物。

4监测工具
剪刀、取样袋、手套、鞋套、小银子、荧光记录笔、标签纸、记录表、消毒液等。

5监测时期
在柑桔属、金柑属和枳属类等苗或成年树春、夏、秋梢转绿后各调查1次，调查时间一般为5月上旬至11月中下旬，各地可根据当地的气候和柑桔属、金柑属和枳属作物的生育期确定具体的调杳时间。

6监测方法6.1未发生区 6.1.1访问调查
向柑桔属、金柑属和枳属类的种苗育苗场和采穗圃、经销商、农技人员等相关人员询问有关柑桔黄龙病情况，初步了解疫情可能发生地点、时间、危害情况。

对询问过程发现的柑桔黄龙病可疑性地区, 进行深入重点调査，访问结果填写柑桔黄龙病田间调查记录表（附表
l)o
6.1.2
在柑桔属、金柑属和枳属果树苗期和田间生长期进行踏查2-3次, 代表面积占种植面积的50%以上。

6・1・3定点调査
在访问调査和踏査基础上，发现可疑疫情进行定点调査。

采用5 点取样法，每点随机调査10株，统计发病株率。

6.2发生区
621发生区范围监测
采取访问调查和踏查方法（具体方法见 6.1.1和6.1.2）,发现可疑疫情进行定点调查，结果记入附表1。

6.2.2发生区发生动态监测
采取定点调查法（具体方法6.1.3）。

每县选5个调查点，每30天调查1次，整个生育期调查3次，每点10亩，10亩内采取五点取样，每样点随机调查10株，统计病株率，填写柑桔黄龙病田间调查监测记录表（附表2）
7疫情诊断
7.1现场诊断
主要检查新梢叶片，花期和果实。

新梢叶片不能转绿，叶片均匀黄化，或新梢叶片转绿后，从主、侧脉附近和叶片基部及边缘褪绿形成黄绿相间的斑驳状黄化，病株开花早而多，落的多，果实小畸形，坚硬，着色不均匀，近果蒂部分橙红色，其余部分青绿色，果汁少，渣多，味酸，成熟期后仍不着色的青果”，或着色不均匀的斑驳果”。

7.2室内鉴定经现场检验检测，不能确定为柑桔黄龙病的，取样带回实验室进行检测鉴定。

8监测记录
详细记录、汇总监测区内各调查点结果。

监测结果记入附表2。

并将原始记录表连同照片、影像等其它资料妥善保存于县级植物检疫机构。

9监测报告
县级植物检疫机构对监测结果进行整理汇总形成监测报告，并按要求逐级报送上级植物检疫机构。

附录：
柑桔黄龙病病原、症状及防治措施等
1病原特征
病原为Liberobacter asiaticum，属原核生物(prokaryote)，目前还未能人工培养。

菌体多数呈圆形、椭圆形或线形，少数呈不规则形，大小50〜600X170〜1600nm,菌体的外部界限是膜质结构，厚约17〜33nm,平均25nm,由三层膜组成，壁膜结构与革兰氏阴性细菌的细胞壁膜构造相似。

柑桔黄龙病病原分为3
个种，即亚洲种(Liberobacter asiaticum)、非洲种(Liberobacter africanum ) 和美洲种(Liberobacter amenicum )。

亚洲种引起柑桔黄龙病，非洲种引起柑桔青果病。

黄龙病主要发生在亚洲和非洲的40多个国家，是柑桔上毁灭性病害。

广东
省汕头地区最早发生。

在我国，本病主要在南部和西南部各省柑桔产区蔓延为害，摧毁了大量的柑桔园，二十世纪30年代以后逐渐严重，在广东、广西、福建、海南、台湾的柑桔产区广泛蔓延，80年代以后，随着柑桔生产的大发展，黄龙病在老病区病情加重，新病区不断扩大，至今在江西、浙江、四川、云南、贵州和湖南等省的部分产区均证实有黄龙病发生。

2为害症状
柑桔树各生长期均感病，4~6年生开始结果的树发病较多，苗期或十几年
以上的成年树发病较少。

该病全年均可发生，以夏梢、秋梢发病最多，其次是春梢。

春梢发病时，当年新抽春梢能正常转绿，5月份以后部分叶片主脉、侧脉附近黄化，叶肉逐渐褪绿变黄，形成黄绿相间的驳斑，叶质硬化。

夏梢或秋梢多在8月至10月间发病。

新抽夏梢或秋梢中有一、二个梢的叶片尚未完全转绿时，则停止转绿。

叶片在老熟过程中叶脉变黄，叶肉由淡黄色均匀黄
化，叶质变硬。

而有的叶片转绿后变黄，出现黄绿相间的斑驳。

当年发病的黄梢，秋末叶片陆继脱落。

第二年抽出的春梢，叶片明显变长、变小，变硬。

叶肉变黄，叶片表现为缺锌、缺锰的症状，因此，黄龙病后期叶片症状与缺素症不容易区别。

病树开花早而多，但花细小，畸形，所结果实小，畸形，着色不均匀，近果蒂部分橙红色，其余部分春绿色，称为”红鼻果”果汁少，渣多，很酸。

3寄主范围主要危害芸香科的柑桔属、金柑属和枳属三个属的植物。

其中蕉柑、甜橙、年桔较感病，酸桔、柠檬较耐病，柚子也有黄龙病。

用菟丝子能将此病菌传到长春花和夹竹桃植株上，引起典型的黄龙病症状，表明这两种植物也是黄龙原寄主。

4传播途径
远距离传播主要通过带病的接穗和苗木，而果园近距离传病则是带菌的柑桔木虱(Diaphorina citri )。

木虱的成虫和高龄若虫(4~5龄)都会传病，病原体在木虱成虫体内的循回期长短不一，短的为3天或少于3天，长的为26~27天。

高龄若虫或成虫一旦获得病原体后，能终生传病。

此病除由木虱传播外，也可通过嫁接传病，在实验室内，可通过菟丝子传到草本寄主长春花上，但是不能由汁液摩擦和土壤传病。

5生物学特性
柑桔黄龙病亚洲种，属于耐热型，最适宜温度28~32°C，症状表现明显，病害在高温地区流行，传播虫媒为柑桔木虱，主要分布于亚洲高温干燥地区。

我国的柑桔黄龙病属于亚洲种。

非洲种引起柑桔青果病，属于热敏感型，最适宜温度
20~24C，症状表现明显，病害在冷凉地区流行，传病虫媒为非洲木虱，主要分布于非洲适温高湿地区；毛里球斯岛上，既有亚洲种，也有非洲种存在。

6防控措施
(1)严格实行检疫
保护无病区和新区，严格执行植物检疫制度，禁止病区的接穗和苗木进入新区和无病区。

疫区采取封锁措施，尽快予以扑灭。

(2)建立无病苗圃，培育无病苗木
①无病苗圃应选择在无柑桔木虱发生的无病区，并尽可能远离病柑桔园，至少相距5公里以
上，具有良好的隔离条件，最好有高山大海等自然屏障。

②砧木种子用50~52C热水预浸5分钟，再用55~56C温汤处理50分钟，然后播种育苗。

③无病接穗的采集及处理
从优良品种的健康老树上采种，经55~56C热水处理后隔离种植，培育无病的实生树采穗。

在非病区或病区中隔离的无病老果园中，严格选择无病树作母树采穗，接穗用1000单位盐酸土
霉素或四环素浸泡2小时；接穗也可用湿热空气47~49C 处理50分钟。

茎尖嫁接脱除病原是获得无病接穗和培育无病苗木的好方法，比前述方法更
为优越。

因为前者只能脱除黄龙病病原体，而茎尖嫁接既能脱除黄龙病病原体，又能脱除衰退病病毒和裂皮病类病毒。

(3)挖除病株及防治媒介昆虫
在病区及时控除病树，集中烧毁，以消除传染源，并适时喷药防治传病的柑桔木虱。

铲除果园附近木虱的寄主和越冬场所，主要是果园附近的芸香科植物，消灭传染中心和虫媒是防治黄龙病发生流行的关键措施之一，因此，疫区要抓好两个时期：一是每年春芽萌动前，可结合冬季清园，加喷杀虫剂防除；二是每次新梢抽发期，视虫口密度情况，连喷1~2次杀虫剂防治。

10%吡虫啉
可湿性粉剂、20%扑虱灵可湿性粉剂、40%氧化乐果等对柑桔木虱的成虫、若虫都有很好的防治效果。

对于初发病和发病较轻的柑桔园内病株，一经发现应立即整株挖除；发病较重的柑桔园，重病树应全面铲除，同时要喷洒杀虫剂，防治传病虫煤。

(4)加强栽培管理
通过柑桔园内管理，如水肥管理，合理施N、P、K，增强树势，以提高抗
病力，并创造园中小气候，不利于柑桔木虱的发生、繁殖和传播，而有利于柑桔树的健壮生长，可以减轻黄龙病的发生和危害。

有条件的果园，四周可以栽植防护林，以减少日照和保持果园有较高的湿度，这对媒介昆虫的迁飞有阻碍作用。

柑桔黄龙病症状
附表1:
柑桔黄龙病田间调查记录表
附表2:
柑桔黄龙病田间调查监测记录表
注：此表将作为监测的原始记录，请妥善保管。