关于禽流感母源抗体消长规律的初步研究

验 数 据 的 准 确 性 和 代 表性 ，按 １ ０ ％比例 随 机 抽 取 试 验 鸡 ，心 脏 采 血 １ ｍ ｌ ，静 置 后 析 出血 清 ，备
试 验 用 ， 试 验 监 测 方 法 采 用 血 凝 抑 制 试 验 ， 根
比稀 释 至第 １ １ 孔 ，再从 第 １ １ 孔吸取 ２ ５ ｔ ｘ ｌ 弃之 ， 最后 一 列 不加 抗 原 作对 照 ；⑧ 每 孔 中加 入 １ ％红
１ ％鸡 红 细胞 悬 液 放 冰 箱 备 用 ；被 检 鸡血 清 ：每
次 检测 ３ ０份 血 样 。 ２ 试 验 操 作 方 法 和 步 骤 ２ ． １ 血凝 （ Ｈ Ａ） 试 验 （ 微量法） 在 微 量 反
应板 的 １ ～ １ ２孔 均 加 入 ２ ５ １ ｘ ｌ 生 理 盐 水 ，换 滴 头 ； ② 吸取 ２ ５ １ ｘ ｌ Ｈ 亚型 （ Ｒ Ｅ 一 ４ ）抗 原加 入 第 一 孔 ， 混 匀 ，抽 取 第 一 孔 稀 释 后 的 抗 原 ２ ５ ｔ ｘ ｌ ，依 次 倍
在 以前 的 临 床 实 践 中 ，为 了确 保 育 雏 过 程 的顺 利 进 行 ，我 们 曾做 了 大量 试 验 工 作 ，研 究 出壳 雏 鸡 的 新 城 疫 、法 氏囊 的母 源 抗 体 消 长 规 律 ，并 根 据试 验 结 果 制 定 合 理 的 新 城 疫 、传 染
性 法 氏 囊 首 免 日龄 。 至 于 禽 流 感 ， 一 方 面 雏 鸡 感 染 机 会 较 少 ， 一 方 面 临 床 多 以 灭 活 疫 苗 免 疫 为 主 ， 所 以 关 于 雏 鸡 禽 流 感 母 源 抗 体 消 长 规 律 这 方 面 的 研 究 较 少 。 鉴 于 此 ，我 们 特 意 开 展 了
缓 冲 液 ；青 岛 易 邦 生 物 工 程 有 限公 司 提 供 的 禽 流感病毒 Ｈ 亚 型 血 凝 抑 制 试 验 抗 原 （ Ｒ Ｅ ４ ） ２ ｍ ｌ ／ 瓶 ；标 准 阳性 血 清 ；抗 凝 剂 ：３ ． ８ ％柠 檬 酸 钠 溶 液 ：取 柠 檬 酸 钠 ３ ． ８ ｇ加 蒸 馏 水 １ ０ ０ ｍ ｌ 混匀 ，
喂 全 价 雏 鸡 饲 料 。在 １ ～ ５ 日 龄 用 环 丙 沙 星 预 防 白痢 ，在 ｌ ０ ～ １ ５ 口 龄 再 次 用 环 丙 沙 星 预 防 呼 吸 道 疾 病 ，在试 验 期 ２ ０ 日龄 内 ， 为 了 减 少 其 他 疫 苗 的 免 疫 干 扰 ， 故 除 了 适 量 投 喂 药 物 外 ， 未 免 疫 任 何 疫 苗 。饲 养 试 验 群 ３ ０ ０羽 ， 为 了 确 保 试
的 氯 化 钠 生 理 盐 水 充 分 洗 涤 ３次 ， 每 次 均 以 １ ０ ０ ０ ｒ ／ ｍ ｉ ｎ离 心 １ ０ ｍｉ ｎ ， 洗 涤 后 用 生 理 盐 水 配 成
此 项 工 作 ，介 绍 如 下 ， 以供 同行 们 相 互 交 流 和 商榷 。 ２ ０ １ ２ 年 ９月 ２日，从 当地正 规 孵房 购 进健 康 海兰灰雏 鸡 ３ ０ ０羽 ，按 常 规 饲 养 模 式 饲 养 ，饲
攀 ， 曩
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关于禽流感母源抗体 消长规律 的初步研 究
付丽伟 （ 河 北省 沙 河市 畜牧 水产局 ０ ６ ３ １ ０ ０ ）
中 图分 类号 ： ￥ 来自百度文库 ５ ２ ． ４ ３
文献 标识 码 ： Ａ
文章 编 号 ： １ ６ ７ ３ — １ ０ ８ ５ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ２ — ０ ０ ４ ４ — ０ ２
１ 试 验 材 料
１ ． １ 仪 器设 备 一 次性 微 量 反 应 板 ，Ｖ 型 ，９ ６ 孔 ；微 型 振 荡 器 ； 一次 性 针 管 ；可 调 刻 度 的 移 液器 （ 一般 ２ ５ Ｉ ） ；对 应 的移 液滴 头 若 干 １ ． ２ 试 剂 ０ ． ９ ％氯化 钠 生 理 盐 水作 为稀 释 液 或
细胞悬 液 ２ ５ ｐ Ｊ ；④ 置 微 型 振 荡 器 上 振 荡 １ ｍｉ ｎ， 在室温 （ ２ ０ ～ ２ ５ ℃ ）下 静 置 ４ ０ ａ ｒ ｉ ｎ后 观 察 结 果 ， 对照孔 红细胞 将呈 明显 的纽扣 状并沉 到孔 底 ；
据试 验 数据 ，解 析雏 鸡 母 源抗 体 的消 长规 律 。
收 稿 日期 ： ２ ０ １ ３ － ０ １ — １ ６
⑧ 结 果 判 定 ：将 反 应 板倾 斜 ，观 察 红 细 胞 有 无 呈 泪 滴 状 流 淌 ，完 全 血 凝 （ 不 流 淌 、的 抗 原 最 高稀 释 倍数 代表一 个 血凝 单 位 。
２ ． ２ 血凝抑制 （ Ｉ Ｊ ｛ Ｉ ）试验 （ 微量 法） ① 根 剧
Ｈ Ａ试 验结 果 配 制 ４单 位 抗 原 ，以 完全 血 凝 的 抗
科 学 养 禽
１ － ＇ ｏ ｕ ｔ ｔ ｒ ｙ ５ ｃ ｔ ｅ ｎ ｃ ｅ 原 最 高稀 释 倍数 作 为 终 点 ，终 点 稀 释倍 数 除 以 ４ 即为 含 ４单 位 抗 原 的 稀 释 倍 数 ；② 在 微 量 反 应 板的 １ ～ １ １孔 均 加 入 ２ ５ ｌ 生 理 盐 水 ，第 １ ２孔 加 ２ ０日龄所测抗 体均 已低于 ４ 杨 ｇ ２ ，全部不合 格 。 此 批 雏 鸡 的父 母 代 鸡 禽 流 感 Ｈ 亚型 （ Ｒ Ｅ ４ ） 的免 疫程 序 ，是按 照产 蛋 后 每 隔 ２ ． ５个 月 免 疫一
取 此液 ｌ ｍ ｌ ，可 使 ５ ｍ ｌ ｍ 液 不 发 生 凝 固 ；ｌ ％ 鸡 红 细 胞 悬 液 ： 用 一 次 性 针 管 抽 取 配 制 好 的 抗 凝 剂 适 量 ， 采 集 至 少 ３只 无 禽 流 感 和 新 城 疫 等 抗
体 的健 康公 鸡 的血 液 ，及 时 混 匀 抗凝 ，用 ０ ． ９ ％