第九章 色谱分析法
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4
组成
5
1. 载气瓶，2 减压阀，3 稳流阀，4 流量计，5分流阀，6注射器， 7 进样器，8色谱柱，9 色谱炉(箱)，10皂膜流量计，11 检测器， 12 记录仪， 13静电计或电桥， 14 模数转换器， 15 数据系统。
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环境中有机污染物的分析——废水中酚的分离
色谱峰： 1苯酚； 2 氯酚； 3 2-硝基酚 4 2.4-二甲酚 5 2.4-二氯酚 6 4-氯-3-甲酚 7 2，4，6-三氯酚 8 2，4-二硝基酚 9 4-硝基酚 10 3-甲基-4，6-二硝基甲酚 11 五氯酚 色谱柱：SPB-5,15m×0.53mm 载气：He 8 C / min 1800 C 柱温：750 C (2 min)
起源
• 1903年，俄国植物学家次维特（Mikhail Tswett） 最先发明。他采用填充有固体CaCO3细颗粒的玻 璃柱，将植物色素的提取物加于柱顶端，然后以 溶剂淋洗，被分离的组份在柱中显示了不同的色 带，他称之为色谱。
1
原理
• 各组分和固定相 存在一定的化学 亲和力，且各组 分和固定相的亲 和力大小不同 • 化学亲和力
– – – – – 定向力 诱导力 色散力 氢键 超分子作用
2
色谱法的流出曲线及有关术语
•基线 •保留时间tR •峰高 •调整保留时间 •死时间tM t‘R •峰高h
•峰面积A •峰宽W •半峰宽W1/2
t = tR - tM
' R
3
气相色谱
• 气相色谱法
–（GC）是英国生 物化学家 Martin A T P等人在研究 液液分配色谱的 基础上，于1952 年创立的一种极 有效的分离方法， 它可分析和分离 复杂的多组分混 合物。
0
7
定量计算方法
• 1、归一化法：若样品中所有的组分均能流出色谱柱 且有较好的、可分辨的色谱峰时可用此法定量。
8
内标法
当试样中所有组分不能全部出峰，或只要测定试样中某几个组分时， 可采用此法。 将一定量的纯物质作为内标物加到准确称取的待测样中，根据待测 组分和内标物的峰面积来计算被测组分的含量。内标物应是待测试样中 不存在的纯物质，加入的量应接近待测组分的量，同时要求内标物的色 谱峰应位于待测组分色谱峰附近或几个待测组分色谱峰的中间。 内标标准曲线法 ：因内标法每次分析时，都要准确称取试样和内标 物质，较费事，不适用于快速控制分析。采用内标标准曲线法进行定量 测定可避免这些麻烦。 内标法的要求：内标物必须是待测试样中不存在的，但其结构或官 能团与组分要相似，内标物与样品互溶，内标峰应与试样中的各组分的 峰分开，并尽量接近欲分析的组分，二者的加入量即浓度相近，在分析 条件下内标物不与样品发生反应。 内标物法的缺点：在试样中增加了一个内标物，常常给分离造成一 定的困难。
9
• 外标法 方法步骤：取纯物质配成一系列不同浓度的标准溶液， 然后分别取一定体积，注入色谱仪，测出峰面积，作峰面积 （或峰高）和浓度的标准曲线。然后在相同条件下注入等量 （固定量进样）待测样，测出该试样的峰面积（或峰高）， 由上述标准曲线查出待测组分的含量。 当待测样品组分浓度变化不大时，可不作标准曲线，用 单点校正法，即配制一个和被测组分含量十分接近的标准样 CS，取相同量的标准液和待测液分别注入色谱仪，测得相应 的AS和Ai。由待测组分和标准样的峰面积（或峰高）比，可 求得待测组分的含量。 外标法的优缺点：此法方便简单，勿需校正因子，但要 求操作条件要稳定，进样重复性高，否则误差较大。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
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组成
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1. 载气瓶，2 减压阀，3 稳流阀，4 流量计，5分流阀，6注射器， 7 进样器，8色谱柱，9 色谱炉(箱)，10皂膜流量计，11 检测器， 12 记录仪， 13静电计或电桥， 14 模数转换器， 15 数据系统。
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环境中有机污染物的分析——废水中酚的分离
色谱峰： 1苯酚； 2 氯酚； 3 2-硝基酚 4 2.4-二甲酚 5 2.4-二氯酚 6 4-氯-3-甲酚 7 2，4，6-三氯酚 8 2，4-二硝基酚 9 4-硝基酚 10 3-甲基-4，6-二硝基甲酚 11 五氯酚 色谱柱：SPB-5,15m×0.53mm 载气：He 8 C / min 1800 C 柱温：750 C (2 min)
起源
• 1903年，俄国植物学家次维特（Mikhail Tswett） 最先发明。他采用填充有固体CaCO3细颗粒的玻 璃柱，将植物色素的提取物加于柱顶端，然后以 溶剂淋洗，被分离的组份在柱中显示了不同的色 带，他称之为色谱。
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原理
• 各组分和固定相 存在一定的化学 亲和力，且各组 分和固定相的亲 和力大小不同 • 化学亲和力
– – – – – 定向力 诱导力 色散力 氢键 超分子作用
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色谱法的流出曲线及有关术语
•基线 •保留时间tR •峰高 •调整保留时间 •死时间tM t‘R •峰高h
•峰面积A •峰宽W •半峰宽W1/2
t = tR - tM
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气相色谱
• 气相色谱法
–（GC）是英国生 物化学家 Martin A T P等人在研究 液液分配色谱的 基础上，于1952 年创立的一种极 有效的分离方法， 它可分析和分离 复杂的多组分混 合物。
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定量计算方法
• 1、归一化法：若样品中所有的组分均能流出色谱柱 且有较好的、可分辨的色谱峰时可用此法定量。
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内标法
当试样中所有组分不能全部出峰，或只要测定试样中某几个组分时， 可采用此法。 将一定量的纯物质作为内标物加到准确称取的待测样中，根据待测 组分和内标物的峰面积来计算被测组分的含量。内标物应是待测试样中 不存在的纯物质，加入的量应接近待测组分的量，同时要求内标物的色 谱峰应位于待测组分色谱峰附近或几个待测组分色谱峰的中间。 内标标准曲线法 ：因内标法每次分析时，都要准确称取试样和内标 物质，较费事，不适用于快速控制分析。采用内标标准曲线法进行定量 测定可避免这些麻烦。 内标法的要求：内标物必须是待测试样中不存在的，但其结构或官 能团与组分要相似，内标物与样品互溶，内标峰应与试样中的各组分的 峰分开，并尽量接近欲分析的组分，二者的加入量即浓度相近，在分析 条件下内标物不与样品发生反应。 内标物法的缺点：在试样中增加了一个内标物，常常给分离造成一 定的困难。
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• 外标法 方法步骤：取纯物质配成一系列不同浓度的标准溶液， 然后分别取一定体积，注入色谱仪，测出峰面积，作峰面积 （或峰高）和浓度的标准曲线。然后在相同条件下注入等量 （固定量进样）待测样，测出该试样的峰面积（或峰高）， 由上述标准曲线查出待测组分的含量。 当待测样品组分浓度变化不大时，可不作标准曲线，用 单点校正法，即配制一个和被测组分含量十分接近的标准样 CS，取相同量的标准液和待测液分别注入色谱仪，测得相应 的AS和Ai。由待测组分和标准样的峰面积（或峰高）比，可 求得待测组分的含量。 外标法的优缺点：此法方便简单，勿需校正因子，但要 求操作条件要稳定，进样重复性高，否则误差较大。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
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