黄曲霉毒素B1的危害与防范

一、黄曲霉毒素B1的特性、分布、生长条件

黄曲霉毒素是霉菌生长发育过程中产生的次生代谢产

物，其种类繁多，其中以黄曲霉毒素（AF）分布最广、毒性最强、危害最大。根据报道全世界约有25%的谷物不同程度的受到霉菌毒素的污染。

黄曲霉毒素是黄曲霉、寄生曲霉、特异曲霉和假溜曲霉四种产毒菌株的代谢产物。饲料在自然条件下污染的黄曲霉毒素主要包括B1、B2、G1及G2四种，其中B1最多、G1次之, B2和G2很少。因为AFB1毒性与致癌性最大，一般以AFB1作为饲料和粮食中黄曲霉毒素的含量评价时的主要指标。

黄曲霉毒素能溶于多种极性有机溶剂，如氯仿、甲醇、乙醇、丙醇、乙二甲基酰胺，难溶于水，不溶于石油醚、乙醚和己烷，这是提取测定的依据。黄曲霉毒素对光、热、酸较稳定，只有加热到280℃~300℃才裂解，高压灭菌2小时，毒力降低25%~33%，4小时降低50%。

影响黄曲霉毒素产生的主要因素：

1、粮食谷物种类

AF主要污染玉米、花生、棉籽及其饼粕，在大豆、稻谷、通心粉、调味品、牛奶、食用油等制品中也经常发现AF。

2、温度与湿度

研究者发现AF和寄生曲霉的最佳生长条件为33~38℃，pH为5.0和Aw（水分活性）为0.99。温度在24~28℃之间，相对湿度在80%以上，黄曲霉菌产毒量最高。简单说：高温潮湿容易产生黄曲霉毒素。

在中国总的分布情况为：华中、华南、西南地区产毒量大，特别是梅雨季节，黄曲霉更容易生长。对我国各种饲料原料及配合饲料霉菌毒素污染情况的调查显示，AFB1检出率都很高，平均都在90%以上，但超标率都很低，大多都在10%以下。

二、黄曲霉毒素B1的代谢

AFB1的代谢主要发生在肝脏，它在细胞色素P450混合功能氧化酶的作用下转化成AFM1 、AFM2、AFP1、AFQ1、AFB2α、黄曲霉毒素醇等物质。黄曲霉毒素B1通过羟基化作用转化成黄曲霉毒素M1。

AFM1是AFB1的代谢产物，不同动物以牛奶中的AFM1代谢物含量最高。研究表明，日粮饲料中AFB1含量为200ppb，2d 后检测牛奶中AFM1含量为1.48ppb。饲料中AFB1含量与牛奶中AFM1含量的转化比例为243:1。产蛋鸡饲粮中AFB1含量为25、50、100ppb时，测得60d内鸡蛋中AFB1残留量分别为0.04、0.05、0.07ppb，其转化率分别为625:1、500:1、1428:1。在42d的肉鸡试验中，前期饲料AFB1含量为82 ppb、采食量为1050g/只；后期饲料AFB1含量为134 ppb，采食量为3220

g/只，肝脏重量为76.5 g/只，肝脏AFB1和AFM1含量分别为0.137 ppb和0.051 ppb，两者的转化率分别为49000:1和132500:1。

三、黄曲霉毒素B1的危害

各种霉菌毒素的毒力和致病性差异很大。黄曲霉毒素B1的毒性要比呕吐毒素的毒性强30倍，比玉米赤霉烯酮的毒性强20倍。黄曲霉毒素被各国列为最重要的毒素。肝脏是黄曲霉毒素的靶器官。被国际肿瘤研究机构划为Ⅰ类致癌物。AFB1的极性毒性是氰化钾的10倍，砒霜的68倍，慢性毒性可诱发癌变，致癌能力为二甲基亚硝胺的75倍，比二甲基偶氨苯高900倍，人的原发性肝癌也很可能与黄曲霉毒素有关。黄曲霉毒素中毒的症状是肝坏死、黄肝。

对人类的危害：（1）人类肝癌和食道癌（黄曲霉毒素），（2）疫病易感性增加。

家禽：（1）采食量，体增重和饲料转化率降低；（2）不孕，流产；（3）肺水肿，（4）疫病易感性增加。

猪：（1）采食量，体增重和饲料转化率降低；（2）不孕流产，（3）肺水肿，（4）疫病易感性增加。

奶牛：（1）采食量，产奶量，体增重和饲料转化率降低；（2）繁殖性能紊乱，胚胎死亡和流产；（3）神经系统紊乱，痉挛和缺乏协调性；（4）疫病易感性增加。

四、黄曲霉毒素的允许量

1995年，世界卫生组织制定的食品黄曲霉毒素最高允许量浓度为15μg/kg。

表1：

GB2761-2011食品安全国际标准食品中真菌毒素限量表2：

五、AFB1和AFM1的检测

黄曲霉毒素的广泛存在及巨大的危害使得建立一种快速、有效、准确的检测方法称为当务之急。目前较常用的、受到人们关注的检测方法有液相色谱串联质谱法、液相色普法、薄层色谱法、酶联免疫法和金标法。

5.1薄层色谱法（TLC）

TLC法是测定黄曲霉毒素的经典方法，是我国测定食品及饲料中AFT黄曲霉素B1(AFB1)的标准方法之一

（GB/T5009.23-1996）。TLC法由于设备简单，易于普及，国内外任在使用，但由于该法样品处理繁琐，且提取和净化效果不够理想，提取液中杂质较多，因而在开展时影响斑点的荧光强度，双向展开法虽避免了杂质干扰，但增加了操作步骤和时间。

5.2液相色谱法

高效液相色谱法对黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2分别进行定量分析。黄曲霉毒素免疫亲和柱HPLC法采用单克隆抗体免疫技术，可以特效地将黄曲霉毒素与其他真菌素分离出来，分离效率和回收率高。此方法已得到广泛应用，并被美国官方分析化学家协会（AOAC）确认为官方检测方法。该方法的检测限可达0.02~5ppb。

5.3酶联免疫法（ELISA）

酶联免疫法检测AFB1的理论基础是抗原抗体反应，其采用单克隆或多克隆抗体技术，具有特异性强、分析时间短等有点，但稳定性较差，分析结果的准确性不高。

5.4液相色谱串联质谱法

一般来说，组织中黄曲霉毒素含量很低，而液相色谱串联质谱法具有比高效色谱法更高的灵敏度和准确性，目前这种方法还极少使用在测定组织霉菌毒素含量中。该方法检测限可达0.02~0.025 ppb。

5.5金标法（检测卡）

六、黄曲霉毒素的防范

6.1工业饲料要控制好原料，把好饲料关。进厂前要检测B1和水份。饲料原料含水量不超过13%的原则进行控制，对含水量超过标准的应及时干燥后贮存，或者使用防霉剂。

饲料的仓库，除了应保持通风、阴凉、干燥外，地面要有木板架撑隔。环境温度高于10℃时，堆放高度不应超过4米。

6.2不能使用发霉饲料。四川高温潮湿，本地粮食容易发霉变质，发霉后不能用作饲料。

一些养殖户喜欢使用沼渣直接作饲料，而且堆放时间长，容易发霉。饲喂奶牛的特别应当慎重。如果要用，应当当天用完。