积雪草中羟基积雪草苷提取工艺研究综述

50 為紅科技2018年•第6期

积雪草中羟基积雪草苷提取工艺研究综述陈慧®陈文®王湘君®何鸿源®林勇®吕晓通®钱明①

①海南热带海洋学院海洋科学技术学院②海南热带海洋学院生命科学与生态学院

本文通过查阅大量文献，发现积雪草有多种有效化学成 分，其具有抗焦虑、抗肿瘤、抑制疤痕形成、促进创伤愈合 等作用；分析国内外多名专家对提取积雪草成分的方法和研 究结果，发现提取羟基积雪草苷的方法主要有正交法、回流 法、闪式提法、超声波法等；实验设计拟用超声波法辅助 HPLC提取羟基积雪草苷，为后续研究积雪草及药物开发奠定 基础。

1前言

1.1积雪草简介

积雪草（CentellaasiaticaL,Urban)为伞形科积雪草属植物 的全草，主要分布于长江流域以南各地，始记载于《神农本草 经》，又称落得打、雷公根、半边钱、崩大碗、马蹄草等，其 性寒味苦，为多年生匍匐草本。査阅文献发现，积雪草化学成 分有正二十七烷、2A6-三叔丁基苯、对羟基苯甲酸、万寿菊 素、槲皮素、二十六醇辛酸酯、山奈酿、槲皮素、胡萝卜素、香草酸、丁二酸、积雪草酸、terniinolicacid、羟基积雪草酸、积雪草苷、积雪草二糖苷、轻基积雪草苷、积雪草-B[1_21。其有 清热利湿，消肿解毒，活血化瘀，利尿之功效，在临床上用于 治疗镊血管病、传染性肝炎、急性肾小球炎、流行性脑脊椎膜 炎、皮肤创伤、流行性腮腺炎'亦具抗抑郁、抗胃溃疡、抗肿 瘤、抗静脉机能不全、保护肝细胞、抗菌消炎，促进创伤愈合 的作用、増强免疫系统的功能，还影响成纤维细胞的超微结 构，抑制成纤维细胞的增殖和胶原蛋白的合成等药理作用'

1.2研究目的、意义

积雪草中的主要活性成分是三疏皂苷类物质，其包含积雪 草苷、羟基积雪草苷及积雪草苷-B三种化合物，而羟基积雪草 苷是积雪草含量较高的成分，具有减少炎性细胞的浸润，促进 真皮纤维细胞增生形成上皮；在体内可以促进血管形成；还可 以刺激细胞生长，促进伤口愈合；能杀死病变周围生长的病 菌，防止伤口感染等活性1M1。在临床上用于治疗胃溃疡、抗焦 虑、皮肤病和免疫调节，亦是治疗手术创伤、烧伤等皮肤创伤 药物中的主要成分m;因其有创伤愈合、美白皮肤等作用，故在 化妆品行业上也得到广泛应用。研究优化提取羟基积雪草苷的 工艺条件，对医学药物的研发和化妆品行业的发展具有重要意 义。

2积雪草的研究现状

由于积雪草具有广泛的药理作用，近年来成为研究热点。韩伟[8]等（2009)用酶法提取积雪草苷，结果表明：优化的提取 条件为纤维素酶与底物积雪草质量比m(E):m(S)=l:50、料液质量比为（积雪草与溶剂水的质量比）1:25、pH=6.0、酶解时间1.5 h、酶解温度40 与传统提取方法相比，酶法提取速率快，工

艺条件温和，得率高；张丹丹[9]等（2017)采用超声波-酶法提

取积雪草中积雪草总苷，结果表明：最优提取工艺为纤维素酶 用量12 mg/g,以10倍液料比加入60%乙醇、酶解温度60 t、酶 解时间l h、超声提取50 min;在该条件下，验证试验中积雪草 总苷平均提取率为1.92% (RSD=1_83%，n=3)，超声波-酶法用 于积雪草中积雪草总苷的提取工艺稳定、可行；宁娜〜等 (2016)运用复合酶辅助乙醇浸提取积雪草苷，结果表明：最 佳酶解提取工艺条件为酶解时间59 min、酶解温度44 t、酶解 pH值5.0、复合酶用量2.6 mg/g,积雪草苷在该条件下的得率达 到5.25mg/g,相比理论预测值误差为0.38%,优化工艺稳定、可 行；李涛1111等（2016)利用正交试验优化乙醇回流提取积雪草苷 的工艺，结果表明，积雪草苷的最佳提取工艺条件为：乙醇浓 度70%、液料比10:1、粉碎粒度140目、提取时间6 h,积雪草苷 在该工艺条件下的提取含量达到8_32 mg/g;汪中博【12]等（2009 )闪式提取（STE)积雪草总阜苷工艺，结果表明：以积雪草总皂 苷含量为考察指标，优选出积雪草最佳提取工艺为乙醇浓度 75%,闪式提取法提取3次，每次5 min,得到总皂苷的含量较 高；王阳阳[131等（2010)采用 Phenomenx8 HYperprep C18 半制 备柱（250m m x l0m m ID，8 |jim),7jC/乙腊（80:20, v/v)作为流动相、柱温30t、流速3mL/min,将YMCODS-AC18制 备柱分离得到的轻基积雪草苷部分溶解于50%甲醇水溶液中，进 样浓度为0.024 g/mL,进样体积50…，分离得到轻基积雪草苷 纯度为76.2%。

3超声波法辅助HPLC提取法

3.1研究优点

超声波提取技术具备提取时间短，只需20~40分钟、不需要 高温，一般在40 t-S O t水温中进行、有一定杀菌作用、超声 波在破坏细胞壁时，加速有效成分溶出的同时不破坏细胞活性 的优点間；与传统酶提法、水提法、传统醇提取工艺相比，超声 波能更好地破坏积雪草的细胞壁和细胞膜，促进羟基积雪草苷 的流出，得到的含量高，有较高的提取率；与索氏回流提取工 艺相比，耗时短，耗能低，所用成本较低；与闪式提取法相 比，提取效率较高。HPLC又称高效液相色谱，指流动相为液体 的色谱技术，其流动相在色谱柱内的流量为lm L/min~10 mL/min,柱效可达3万塔板每米以上，在一根柱中同时分离成份 可达100多种，荧光检测器的灵敏度可达10_、，与经典液相色谱 相比，HPLC的柱子可反复使用，一根色谱柱可分离不同的化合 物，固定相粒度更小，柱效提高了多个数量级，可选择固定相

技术创新

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和流动相以达到最佳分离效果，分离组分可以多达几十甚至上 百种，使用次数高达数百至数千次，精密度高，分离试样能力 强；与比色法、紫外分光光度法比较，所用试样少，分析速度 快，测量的准确度、灵敏度高；与高效毛细管电泳法对比，操 作较为方便；而分子排阻色谱法不宜用于分析分子大小组成相 似或分子大小相差10%的组分。经上述分析，駿采用超声波法 辅助HPLC 提取轻翻雪草苷。

3.2研究原理

超声波法辅助HPLC 提取法的原理是两者强强联合，先利用 超声波生的强烈振动、高速度、空化效应、热效应和搅拌等作 用，破坏积雪草的细胞壁，加速积雪草中有效成份的浸出提 取[15]，再连接HPLC 装置进行分离提纯，即将提取出的组分溶于 流动相中，经流过固定相时与固定相发生作用（吸引、分配、 排阻、亲和、离子吸引）的大小、强弱不同，因此组分在固定 相中的滞留时间不同，从而先后从固定相流出，达到分离出羟 基积雪草苷的目的，此方法将在很大程度上提高羟基积雪草苷

的提取率和纯度。4结论目前国内对积雪草苷的研究者很多，但对于提取g 基积雪 萆苷的研究，利用超声波法辅助HPLC 提取的方法目前还没有， 该方法为后续针对羟基积雪草苷提取工艺进行补充；研究设计

拟用对时间、温度、功率、固液比、乙醇浓度进行单变量因素

考察，紧接采用响应面法对时间、温度、功率、料液比进行优

化处理，再通过方差分析，结合超声波法辅助HPLC 进行分离提

纯。最终经过线性试验、精密度试验、加标回收试验、稳定性

试验及重复性试验等试验操作预估实验测得的结果回归线

性好、加标回收率高、精密度高，为后续研究积雪草苷药物开

发提供参考。

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基金项目：1、2017年省级大学生创新创业训练计划项目

(201711100005) ; 2、海南热带海洋学院2017年度开放性实验

项目资助；3、2017年海南省自然科学基金项目资助（217157)。

作者简介：陈慧（ 1996-),男，2015级化学专业本科在

读。

通讯作者：陈文（ 1980-),男，副教授，硕士，主要研究

方向为天然产物化学成分分析、提纯、鉴定。(上接31页）前提条件下，最大限度的利用光能，减少照明系 统中光能的不必要浪费。照明设备在为人们的日常生活提供帮 助的同时也造成了严重的电力能源损耗。为了避免这种情况， 尽可能的节约电力能源要求加强照明设备的节能设计。充分利 用自然光，根据不同使用场所选用不同规格的照明灯。在室外 选择高压钠灯，以此来使照明设备最大限度的降低电能消耗。

四、结语

综上所述，节能减排实现长期可持续发展是当今电力行业 的首要问题。在进行供配电设计的过程中应始终坚持最大限度 的减少电力能源不必要的浪费。本文针对供配电设计节能进行 了简要分析，并提出了一些切实可行的有效措施。希望对于减

少电能损耗，提高供配电系统对于电能的合理利用具有一定的 帮助。

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