肺炎支原体检测培养基培训资料

肺炎支原体 50ul/ 孔
37℃培养
50ul/ 孔
敏感
中敏
耐药
注意事项
1：培养液-4°C至-15°C冷 冻保存，不能反复解冻。
2：取样位置准确，取样 量足。
3：取样后在10分钟 内接种到培养基。
4：37°C恒温。
解答大家关心比较多的问题：
1.采样部位： 咽喉部位 （舌腭弓、 悬雍垂、 扁桃体）
肺炎支原体
pH为碱 性
37℃培养
红色（营养物质+葡 萄糖+酚红+抑菌剂）
分解 葡萄糖
H+
pH为酸 性
黄色
药敏板制备
药敏板内分别包备11种不同浓度的抗生素，Ａ１－１１为 低浓度，Ｂ１－１１为高浓度。１２ＡＢ两孔未包备。
1-11A、 A
B孔各
加入 B
100ul
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
人型支原体（MH）、解脲支原体（UU）、 肺炎支原体（MP）、生殖支原体（MG）
显微镜下观察肺炎支原体
肺炎支原体传播途径及发病率
1.通过呼吸道飞沫传染； 2.可散发流行； 3.全年均可发病； 4.易感染的人群儿童，青少年；
5.发病率：由支原体引起的 感冒占整个感冒20%-40%， 支原体肺炎的发病率可占 所有肺炎病例的30%-40%。
２：传统培养法，直接查患者体内病原体，准确 率高，但所需时间长（４８－７２小时）。
３：瑞凯培养法，准确率高，直接提取患者咽部 分泌物查病原体，发病前2-3天就能查到，培养时 间短２４小时报结果。
目前医院检查肺炎支原体常用手段 及治疗
常用抗体检测，患者由于时间问题未产生 抗体时，靠经验用药，３天后，如无缓解 再测抗体，产生后换药治疗。联合用药， 增加患者负担，造成滥用抗生素。抽血检 测患者痛苦，易造成交叉感染。操作时采 样，血清离心繁杂费时费力。
1 血清学检测，也称抗体检测，检测患者血液中是否存在支 原体抗体。２－３小时出结果。目前普遍采用。
2ｐｃｒ检测，依靠大型设备，手段繁琐，无临床价值，目 前只做科研使用。
３传统培养法 直接查病原体，所需时间长，但准确率高。
肺炎支原体几种检测方法对比
1：血清学检测（抗体检测），3小时出结果是指 抗体产生后经3小时检验，但从人感染支原体到体 内产生抗体需要5－７天，且治愈后抗体在体内衰 退仍需１－３月。所以说无论什么时间做抗体检 测结果都不准确。
对热抵抗力差，通常55摄氏度经15分钟处理可使 之灭活，因此应严格控制培养温度在37摄氏度。
繁殖所需物质特殊，所以许多培养基培养时间长。 因此更适合支原体繁殖的物质及配合比例，就显 得尤为重要，同时也是不同培养基的主要技术区
别所在。
支原体的分类：
1.自然界目前已经发现的1来自百度文库0多种； 2.与人有关的（人类能感染的）：
4.培养基能否快速解冻？ 可以。科室可以根据当天的大概用量，早上在恒温 箱里快速解冻。
5.当天解冻了，没有用完的培养基，能再冻起来吗？ 不能反复冻融。但是您可以把它冷藏起来， 明天继续用。培养基在冷藏环境下至少可 以保存一周以上。
6.如果培养结果偶尔出现浑浊、 沉淀或者半红半黄的情况， 应该如何判断？ 出现这样的情况全部判断为 阴性。培养基内发生的这种 变化不是由于存在MP引起的，而是因为患者口腔 内的食物残留或者其他口腔杂菌引起的。培养基 特异性极强，只有MP能在其中快速生长繁殖，而 其他微生物的代谢和酸性物质不敏感，才会出 现以上情况。？
瑞凯培养法检测的临床意义
直接查病原体，发病前２－３天就可在呼 吸道分泌物中发现肺炎支原体，实现早期 发现，快速正确诊断，及时治疗。
根据患者病情各异，指导正确用药。 避免滥用抗生素，减少患者负担。 无需采血，减少患者痛苦及恐怖心里。
肺炎型支原体药敏检测培养基的 作用机理
产品由培养基与药敏板组成
引起感冒的几种原因 及检测与治疗
细菌感染，可通过检查血常规，测定白细胞，中性粒细胞 高低来判断。１小时出结果。头孢类，青霉素类抗生素。
病毒感染，通过血常规，测定淋巴细胞高低来判断。１小 时出结果。无特效药，用解热镇痛来缓解，靠免疫力。
肺炎支原体感染。大环内酯类抗生素（破坏细胞中蛋白质 合成）
2.采样方法： A.棉拭子浸润生理 盐水后并挤压出棉 拭子液体采样更佳； B.捻转数次，粘取 尽量多（没有具体 量值）的分泌液； C.棉拭子压住舌 根部，令患者咬住 30秒左右取出。
3.采样后，咽拭子能放置多久？ 我们建议采样后立即将咽拭子放入培养 基内，据国外文献报道，MP离开宿主后 会很快死亡（15分钟以内）。另外这样也 避免了感染其他杂菌的可能。（门诊的使用）
肺炎支原体药敏检测培养基的使用 步骤
常温下使培养基解冻，滴加50ul到药敏板12号A孔， 再加50ul石蜡油封盖以防挥发。
用无菌棉拭子（或咽拭子）在口腔咽部捻转数次 取出棉拭子置于培养瓶内，搅动数次，对着瓶壁 尽量挤压出其中液体，然后取出棉拭子弃之。
移液器将接种后的培养基分别滴加到药敏实验板 除阴性对照孔外的23个小孔内，每孔50ul，然后 每孔再加50ul的液体石蜡。
肺炎型支原体药敏检测培养 基
研发单位：第四军医大学
生 产 商：瑞凯生物科技
资质：
什么是支原体
支原体是一种介于细菌和病毒之间，无细胞壁的 最小病原微生物。比细菌小，比病毒大，可通过 滤菌器，显微镜下观察不到。
支原体的大小为0.2—0.3um,无细胞壁，不能维持 固定形态而呈多边形。没有细胞壁，因此对影响 细胞壁合成的抗生素，如头孢类，青霉素类不敏 感。
将药敏板连同培养瓶内剩余培养基放置37°C恒 温箱培养24小时。
结果判断
阳性判断：A:培养瓶和药敏板的12号A孔培养基 应保持原来的红色，如果变黄操作过程可能出现 问题，建议放弃本次试验。B:培养瓶和药敏板的 12号B孔保持原来的红色为阴性，变黄判定为阳 性。
药敏判断：标本判定阳性后再分别观察1~11号孔， 如果A、B两孔均呈黄色说明肺炎支原体对该抗生 素耐药。A孔呈黄色，B孔保持红色，则是中度敏 感；如果A、B两孔均保持原来的红色则肺炎支原 体对该抗生素敏感。