临床免疫学检
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构成抗核抗体谱 （Anti-nuclear antibodies,ANAS)。
(二)按抗不同靶抗原成分抗体分类
ANAS
分 类
抗DNA抗体 抗组蛋白抗体
抗单链DNA抗体 抗双链DNA抗体
抗ENA抗体
抗非组蛋白抗体
抗着丝点抗体
抗Sm抗体 抗RNP抗体 抗SSA 抗体 抗SSB抗体 抗Scl－70 抗体 抗Jo－1 抗体
应用范围
一、临床应用 肿瘤患者的辅助诊断、疗效判断、病
情检测、预后评估、评价手术、放疗、化 疗是否有效。反映手术是否根除，判断肿 瘤有无复发和转移。 二、肿瘤高危人群的定期筛查 三、肿瘤分子流行病学调查及肿瘤标志物 生物学研究。
甲种胎儿球蛋白（alpha fetoprotein, APF)
药物性狼疮（DLE）
95-100%
混合性结缔组织病（MCTD）
95-100%
硬皮病（SSc）
70-90%
干燥综合征（SS）
60-80%
多发性肌炎/皮肌炎（PM/DM）
40-60%
类风湿关节炎（RA）
30-50%
幼年型类风湿关节炎（JRA）
20-40%
二、抗ds-DNA抗体
靶抗原为细胞核中DNA的双螺旋结构 1. 方法：
B细胞 CD19单克隆抗体测定B细胞数 升高见于急性白血病 自然杀伤细胞活性测定判断机体抗肿瘤抗病毒的指标 机体依赖性细胞介导的细胞毒测定 增高见于自身免疫性疾病，
减低见于恶性肿瘤
四 细胞因子(cytokine,CK)检测
CK为免疫调节性小分子多肽 检测方法 酶免疫测定 PCR技术 白细胞介素2活性及受体 免疫应答、 抗病毒作用 肿瘤坏死因子 抗感染效应、抗肿瘤作用 干扰素 一种非特异性防御因子
其他组织和细胞抗体
抗线粒体抗体 抗甲状腺球蛋白抗体 抗甲状腺微粒体抗体 抗乙酰胆碱受体抗体 抗平滑肌抗体
肿瘤标志物(tumor marker)检测
肿瘤标志物是由肿瘤细胞本身合成、释放或者是 由机体对肿瘤细胞反应而产生的一类物质。这类 物质可反映细胞恶变各个阶段的表型及基因特征 性。
主要包括：蛋白质类、糖类物质、酶类肿瘤标志 物。
抗病毒抗肿瘤、调节免疫、控制细胞增殖
五 自身抗体
自身抗体 抗自身细胞内外及表面的免疫球蛋白
自身耐受 机体对自身组织不产生免疫应答
自身免疫 体内检出自身抗体或自身免疫性T细胞
自身免疫病 自身免疫破坏正常的组织结构并引起相应临床症状
器官特异与非器官特异性
原发与继发
急性与慢性
风湿性疾病
风湿性疾病常见自身抗体
(五)临床意义：筛选实验
5. ANA阳性与疾病活动性可无平行关系，即使 高滴度也不一定预示病情严重。
6. 核型的意义：均质型和膜型提示抗ds-DNA阳 性，斑点型提示抗ENA阳性。
表 ANA在某些CTD中的阳性率
CTD疾病
ANA阳性率
系统性红斑狼疮（SLE）
活动期
95-100%
非活动期
80-100%
CEA是由胎儿早期的消化管及某些组织合成的一 种富含多糖的蛋白复合物,是一种广谱肿瘤标志物
临床意义 胰腺癌、结肠癌、乳腺癌 结肠炎、胰腺炎、肝脏疾病和肺部疾病 轻度升高 连续随访检测
其他肿瘤标志物
前列腺特异抗原测定（prostate specific antigen, PSA)
癌抗原-50（cancer antigen-50,CA-50) 糖链抗原19-9（carbohydrate antigen 19-9,CA19-9) 前列腺酸性磷酸酶（PAP) 神经元特异性烯醇化酶（NSE)
抗核仁抗体
抗其它细胞成分抗体
(三)抗核抗体检测原理
底物 （抗原）
+
被检血清 （抗体）
+ 抗原抗体 复合物
第二抗
均质型
又称弥散型，染色质均匀一致,此型 与抗ds-DNA 、抗DNP有关。可见于多 种自身免疫性疾病。
斑点型
又称颗粒型，核质染色呈斑点状、斑 块状，此型与可溶性核抗原有关。
膜型
又称周边型，荧光染色在核周围，此型与纤层蛋 白Байду номын сангаасds-DNA有关。多见于SLE，特别是狼疮肾炎 患者。
免疫功能检测
一 血清免疫球蛋白
具有抗体活性的一组球蛋白 由浆细胞合成分泌 存在于血液、体液、外分泌液、细胞膜 据功能和理化性质不同分五大类
IgG IgA IgM IgD IgE
免疫球蛋白G(IgG)
含量最多，占70~80%，能通过胎盘 参考值7~16.6g/L 临床意义
增高 慢性感染 慢性肝病 淋巴瘤 结核 自身免疫性疾病
增高 病毒性肝炎早期 肝硬化SLE RA 降低 IgA型MM 肾病综合征
免疫球蛋白E(IgE)
血清中含量最少约0.002% 亲细胞性抗体 与变态反应有关
参考值0.1~0.9mg/L 临床意义
增高 各种过敏性疾病 IgE型MM 自身免疫性疾病 降低 丙种球蛋白缺乏症 恶性肿瘤 长期免疫抑制剂
补体C3 含量最多 是传统和旁路途径被激活的关键物质 减低见于狼疮性肾炎 活动性SLE 肾小球肾炎
补体C4 功能较多 经传统途径活化 作用 促进吞噬 中和病毒 防止免疫复合物沉着
三 细胞免疫检测
T细胞亚群
T细胞花结形成试验(测定T细胞数量) T细胞转化试验(体外测定T细胞的生物学功能) T细胞分化抗原测定 CD3、CD4 (TH)、CD8 (TS)、 CD4/CD8
核仁型
仅核仁着染荧光， 此型与核仁内的RNA多聚酶和RNA有关。多 见于SLE、SSC患者。
(五)临床意义：筛选实验
1. 出现于各种结缔组织病中 2．出现于其它恶性疾病中，往往是低滴度阳性 3．感染疾病 慢性肝病 健康老年人 4. 主要是IgG有时是IgM
滴度≥1：40为阳性，但1：80才有临床意义
多发性骨髓瘤
降低 体液免疫缺陷病 病毒感染 应用免疫抑制剂者
免疫球蛋白A (IgA)
分两型:血清型 分泌型 参考值:血清型 0.7~3.5g/L 临床意义
增高 IgA型MM SLE RA 肝硬化 肾病 降低 反复呼吸道感染 自身免疫性疾病
免疫抑制疗法后
免疫球蛋白M(IgM)
分子量最大 占5~10% 参考值: 0.5~2.6g/L 临床意义
胎儿早期由肝脏合成的一种糖蛋白，胎儿血浆中 AFP值可达3000μg/L,周岁婴儿浓度接近成人水平， 一般健康成人血浆AFP浓度低于20 μg/L。
临床意义
原发性肝细胞癌 生殖腺胚胎癌，胃癌，胰腺癌 病毒性肝炎，肝硬化 妇女妊娠3个月后开始升高，7-8个月达到高峰,
分娩后3周恢复正常。
癌胚抗原(carcinoembryonic antigen, CEA)
抗核抗体 类风湿关节炎早期血清学自身抗体 抗中性粒细胞胞浆抗体
▼ 抗核抗体
（Anti-nuclear antibody ANA） ——结 缔 组 织 病
(一)ANA传统定义
是抗细胞核抗原成分的自身抗体的总称 (Anti-nuclear antibody，ANA）。
一组指针对细胞核内DNA、RNA、蛋白质、 脂类、酶类或这些物质的分子复合物的 抗体。
A. 间接免疫荧光法：抗原为马疫锥虫或短膜虫 B. Farr氏法：放免法 2. 临床意义：是唯一和疾病活动有关的自身抗体 A．出现于SLE 50－80％ B．和疾病的活动程度相关。 C．抗体的出现往往和肾损害有关。
三、抗Sm抗体
Sm抗原是细胞核中一种可溶于生理盐水的酸性核蛋 白，以被最早发现有此抗体的患者Smith字头命名。 1.方法：
二 血清补体(complement,C)检测
补体是一组具酶原活性的糖蛋白 九种成分C1~ C9 与体液因子或免疫细胞共同参与免疫反应 检测目的 补体功能
免疫反应 损伤状态
血清补体(complement,C)检测
总补体溶血活性(CH50)检测 方法 用致敏的绵羊红细胞激活待测血清中的补体 最终导致绵羊红细胞溶解 溶血程度与补体量呈正相关以50%溶血为检测终点 意义 反映补体传统途径活化的活性程度 增高 见于急性炎症 组织损伤 某些肿瘤 减低 各种免疫复合物性疾病
临床常用免疫学检查
李军霞 山西医科大学第二医院风湿免疫科
临床常用免疫学检查
免疫功能检测
血清免疫球蛋白 血清补体、细胞免疫、细胞因子 自身抗体
肿瘤标志物检测 病毒性肝炎血清标志物
及其他病原体感染免疫检测
检测方法
间接免疫荧光法(IIF) 酶联免疫吸附法(ELISA) 放射免疫法(RIA) 被动血凝法(PHA) 颗粒凝集法(PA) 对流免疫电泳法(CIE) 免疫双扩散法(ID) 流式细胞术(FCM)
一、类风湿因子（rheumatoid factor, RF)
类风湿因子（RF )
RF是变性IgG刺激机体产生的一种自身抗体。 靶抗原为变性IgG Fc段部分
分型：IgM; IgG; IgA; IgD; IgE型。 主要出现于RA患者的血清和关节液中。 还可见于SS、心内膜炎、麻风 高滴度病情活动 有关节外表现时滴度高
A． 双扩散： B． 免疫印迹法：13.5、28、29KD、 2.临床意义： A．是诊断SLE的标记抗体，阳性率30％。但无此 抗体并不能排除诊断。 B．目前的研究发现个别情况下可出现于原发SS和 MCTD中。
▼类风湿关节炎早期血清学自身抗体
RF(类风湿因子) APF(抗核周因子) AKA(抗角蛋白抗体) 抗CCP(环瓜氨酸肽)抗体
(二)按抗不同靶抗原成分抗体分类
ANAS
分 类
抗DNA抗体 抗组蛋白抗体
抗单链DNA抗体 抗双链DNA抗体
抗ENA抗体
抗非组蛋白抗体
抗着丝点抗体
抗Sm抗体 抗RNP抗体 抗SSA 抗体 抗SSB抗体 抗Scl－70 抗体 抗Jo－1 抗体
应用范围
一、临床应用 肿瘤患者的辅助诊断、疗效判断、病
情检测、预后评估、评价手术、放疗、化 疗是否有效。反映手术是否根除，判断肿 瘤有无复发和转移。 二、肿瘤高危人群的定期筛查 三、肿瘤分子流行病学调查及肿瘤标志物 生物学研究。
甲种胎儿球蛋白（alpha fetoprotein, APF)
药物性狼疮（DLE）
95-100%
混合性结缔组织病（MCTD）
95-100%
硬皮病（SSc）
70-90%
干燥综合征（SS）
60-80%
多发性肌炎/皮肌炎（PM/DM）
40-60%
类风湿关节炎（RA）
30-50%
幼年型类风湿关节炎（JRA）
20-40%
二、抗ds-DNA抗体
靶抗原为细胞核中DNA的双螺旋结构 1. 方法：
B细胞 CD19单克隆抗体测定B细胞数 升高见于急性白血病 自然杀伤细胞活性测定判断机体抗肿瘤抗病毒的指标 机体依赖性细胞介导的细胞毒测定 增高见于自身免疫性疾病，
减低见于恶性肿瘤
四 细胞因子(cytokine,CK)检测
CK为免疫调节性小分子多肽 检测方法 酶免疫测定 PCR技术 白细胞介素2活性及受体 免疫应答、 抗病毒作用 肿瘤坏死因子 抗感染效应、抗肿瘤作用 干扰素 一种非特异性防御因子
其他组织和细胞抗体
抗线粒体抗体 抗甲状腺球蛋白抗体 抗甲状腺微粒体抗体 抗乙酰胆碱受体抗体 抗平滑肌抗体
肿瘤标志物(tumor marker)检测
肿瘤标志物是由肿瘤细胞本身合成、释放或者是 由机体对肿瘤细胞反应而产生的一类物质。这类 物质可反映细胞恶变各个阶段的表型及基因特征 性。
主要包括：蛋白质类、糖类物质、酶类肿瘤标志 物。
抗病毒抗肿瘤、调节免疫、控制细胞增殖
五 自身抗体
自身抗体 抗自身细胞内外及表面的免疫球蛋白
自身耐受 机体对自身组织不产生免疫应答
自身免疫 体内检出自身抗体或自身免疫性T细胞
自身免疫病 自身免疫破坏正常的组织结构并引起相应临床症状
器官特异与非器官特异性
原发与继发
急性与慢性
风湿性疾病
风湿性疾病常见自身抗体
(五)临床意义：筛选实验
5. ANA阳性与疾病活动性可无平行关系，即使 高滴度也不一定预示病情严重。
6. 核型的意义：均质型和膜型提示抗ds-DNA阳 性，斑点型提示抗ENA阳性。
表 ANA在某些CTD中的阳性率
CTD疾病
ANA阳性率
系统性红斑狼疮（SLE）
活动期
95-100%
非活动期
80-100%
CEA是由胎儿早期的消化管及某些组织合成的一 种富含多糖的蛋白复合物,是一种广谱肿瘤标志物
临床意义 胰腺癌、结肠癌、乳腺癌 结肠炎、胰腺炎、肝脏疾病和肺部疾病 轻度升高 连续随访检测
其他肿瘤标志物
前列腺特异抗原测定（prostate specific antigen, PSA)
癌抗原-50（cancer antigen-50,CA-50) 糖链抗原19-9（carbohydrate antigen 19-9,CA19-9) 前列腺酸性磷酸酶（PAP) 神经元特异性烯醇化酶（NSE)
抗核仁抗体
抗其它细胞成分抗体
(三)抗核抗体检测原理
底物 （抗原）
+
被检血清 （抗体）
+ 抗原抗体 复合物
第二抗
均质型
又称弥散型，染色质均匀一致,此型 与抗ds-DNA 、抗DNP有关。可见于多 种自身免疫性疾病。
斑点型
又称颗粒型，核质染色呈斑点状、斑 块状，此型与可溶性核抗原有关。
膜型
又称周边型，荧光染色在核周围，此型与纤层蛋 白Байду номын сангаасds-DNA有关。多见于SLE，特别是狼疮肾炎 患者。
免疫功能检测
一 血清免疫球蛋白
具有抗体活性的一组球蛋白 由浆细胞合成分泌 存在于血液、体液、外分泌液、细胞膜 据功能和理化性质不同分五大类
IgG IgA IgM IgD IgE
免疫球蛋白G(IgG)
含量最多，占70~80%，能通过胎盘 参考值7~16.6g/L 临床意义
增高 慢性感染 慢性肝病 淋巴瘤 结核 自身免疫性疾病
增高 病毒性肝炎早期 肝硬化SLE RA 降低 IgA型MM 肾病综合征
免疫球蛋白E(IgE)
血清中含量最少约0.002% 亲细胞性抗体 与变态反应有关
参考值0.1~0.9mg/L 临床意义
增高 各种过敏性疾病 IgE型MM 自身免疫性疾病 降低 丙种球蛋白缺乏症 恶性肿瘤 长期免疫抑制剂
补体C3 含量最多 是传统和旁路途径被激活的关键物质 减低见于狼疮性肾炎 活动性SLE 肾小球肾炎
补体C4 功能较多 经传统途径活化 作用 促进吞噬 中和病毒 防止免疫复合物沉着
三 细胞免疫检测
T细胞亚群
T细胞花结形成试验(测定T细胞数量) T细胞转化试验(体外测定T细胞的生物学功能) T细胞分化抗原测定 CD3、CD4 (TH)、CD8 (TS)、 CD4/CD8
核仁型
仅核仁着染荧光， 此型与核仁内的RNA多聚酶和RNA有关。多 见于SLE、SSC患者。
(五)临床意义：筛选实验
1. 出现于各种结缔组织病中 2．出现于其它恶性疾病中，往往是低滴度阳性 3．感染疾病 慢性肝病 健康老年人 4. 主要是IgG有时是IgM
滴度≥1：40为阳性，但1：80才有临床意义
多发性骨髓瘤
降低 体液免疫缺陷病 病毒感染 应用免疫抑制剂者
免疫球蛋白A (IgA)
分两型:血清型 分泌型 参考值:血清型 0.7~3.5g/L 临床意义
增高 IgA型MM SLE RA 肝硬化 肾病 降低 反复呼吸道感染 自身免疫性疾病
免疫抑制疗法后
免疫球蛋白M(IgM)
分子量最大 占5~10% 参考值: 0.5~2.6g/L 临床意义
胎儿早期由肝脏合成的一种糖蛋白，胎儿血浆中 AFP值可达3000μg/L,周岁婴儿浓度接近成人水平， 一般健康成人血浆AFP浓度低于20 μg/L。
临床意义
原发性肝细胞癌 生殖腺胚胎癌，胃癌，胰腺癌 病毒性肝炎，肝硬化 妇女妊娠3个月后开始升高，7-8个月达到高峰,
分娩后3周恢复正常。
癌胚抗原(carcinoembryonic antigen, CEA)
抗核抗体 类风湿关节炎早期血清学自身抗体 抗中性粒细胞胞浆抗体
▼ 抗核抗体
（Anti-nuclear antibody ANA） ——结 缔 组 织 病
(一)ANA传统定义
是抗细胞核抗原成分的自身抗体的总称 (Anti-nuclear antibody，ANA）。
一组指针对细胞核内DNA、RNA、蛋白质、 脂类、酶类或这些物质的分子复合物的 抗体。
A. 间接免疫荧光法：抗原为马疫锥虫或短膜虫 B. Farr氏法：放免法 2. 临床意义：是唯一和疾病活动有关的自身抗体 A．出现于SLE 50－80％ B．和疾病的活动程度相关。 C．抗体的出现往往和肾损害有关。
三、抗Sm抗体
Sm抗原是细胞核中一种可溶于生理盐水的酸性核蛋 白，以被最早发现有此抗体的患者Smith字头命名。 1.方法：
二 血清补体(complement,C)检测
补体是一组具酶原活性的糖蛋白 九种成分C1~ C9 与体液因子或免疫细胞共同参与免疫反应 检测目的 补体功能
免疫反应 损伤状态
血清补体(complement,C)检测
总补体溶血活性(CH50)检测 方法 用致敏的绵羊红细胞激活待测血清中的补体 最终导致绵羊红细胞溶解 溶血程度与补体量呈正相关以50%溶血为检测终点 意义 反映补体传统途径活化的活性程度 增高 见于急性炎症 组织损伤 某些肿瘤 减低 各种免疫复合物性疾病
临床常用免疫学检查
李军霞 山西医科大学第二医院风湿免疫科
临床常用免疫学检查
免疫功能检测
血清免疫球蛋白 血清补体、细胞免疫、细胞因子 自身抗体
肿瘤标志物检测 病毒性肝炎血清标志物
及其他病原体感染免疫检测
检测方法
间接免疫荧光法(IIF) 酶联免疫吸附法(ELISA) 放射免疫法(RIA) 被动血凝法(PHA) 颗粒凝集法(PA) 对流免疫电泳法(CIE) 免疫双扩散法(ID) 流式细胞术(FCM)
一、类风湿因子（rheumatoid factor, RF)
类风湿因子（RF )
RF是变性IgG刺激机体产生的一种自身抗体。 靶抗原为变性IgG Fc段部分
分型：IgM; IgG; IgA; IgD; IgE型。 主要出现于RA患者的血清和关节液中。 还可见于SS、心内膜炎、麻风 高滴度病情活动 有关节外表现时滴度高
A． 双扩散： B． 免疫印迹法：13.5、28、29KD、 2.临床意义： A．是诊断SLE的标记抗体，阳性率30％。但无此 抗体并不能排除诊断。 B．目前的研究发现个别情况下可出现于原发SS和 MCTD中。
▼类风湿关节炎早期血清学自身抗体
RF(类风湿因子) APF(抗核周因子) AKA(抗角蛋白抗体) 抗CCP(环瓜氨酸肽)抗体