分子模拟在脂肪酶的手性拆分中的研究
脂肪酶拆分外消旋_苯乙胺的研究进展
the formation of flavour components in cider[J].J I Brewing,1988,94(6):391-395.[26]MANGAS J J,GONZALEZ M P,RODRIGUZE R,et al.Solid-phaseextraction and determination of trace aroma and flavour components in cider by GC-MS[J].Chromatographia,1996,42:101-105.[27]WILLIAMS A A,MAY H V.Examination of an extract of cidervolatiles using both electron impact and chemical ionization gas chro-matography-mass spectrometry[J].J I Brewing,1981,87:372-375. [28]POLLARD A,KIESER M E,STEVENS P M,et al.Fusel oils in cidersand perries[J].J Sci Food Agr,1965,16:384-389.[29]龙明华.以浓缩苹果汁酿造的苹果酒挥发性香气成分分析[J].酿酒科技，2006（6）：94-95.[30]彭帮柱，岳田利，袁亚宏，等.气相色谱-质谱联用法分析苹果酒香气成分的研究[J].西北农林科技大学学报，2006，31（1）：71-74.[31]岳田利，彭帮柱，袁亚宏.基于主成分分析法的苹果酒香气质量评价模型的构建[J].农业工程学报，2007，23（6）：223-227.[32]林巧，杨永美，孙小波，等.苹果酒发酵条件的控制与研究[J].中国酿造，2008（10）：60-63.手性是自然界化合物的普遍特征。
手性药物拆分的研究进展
手性药物拆分的研究进展许多药物具有光学活性(opitical activeity)。
一般显示光学活性的药物分子，其立体结构必定是手性(chirality)的，即具有不对称性。
手性是指其分子立体结构和它的镜像彼此不能重合。
互为镜像关系而又不能重合的一对分子结构称为对映体(enantiomer)。
虽然对映异构体药物的理化性质基本相同，但由于药物分子所作用的受体或靶位是由氨基酸、核苷、膜等组成的手性蛋白质和核酸大分子等，后者对与之结合的药物分子的空间立体构型有一定的要求。
因此，对映异构体在动物体内往往呈现出药效学和药动学方面的差异。
鉴于此，美国食品药品监督管理局规定，今后研制具有不对称中心的药物，必须给出手性拆分结果，欧盟也提出了相应的要求。
因此，手性拆分已成为药理学研究和制药工业迫切需要解决的问题。
目前，利用酶法、超临界流体色谱(SFC)法、化学法、高效液相色谱(HPLC)法、气相色谱(GC)法、毛细管电泳(capillary electrophoreisis，CE)法和分子烙印法拆分对映体，已成为新药研究和分析化学领域的重要课题。
笔者在本文综述了近年来利用上述方法拆分手性药物的研究进展。
1酶法酶的活性中心是一个不对称结构，这种结构有利于识别消旋体。
在一定条件下，酶只能催化消旋体中的一个对映体发生反应而成为不同的化合物，从而使两个对映体分开。
该法拆分手性药物已有较久的历史，反应产物的对映过剩百分率可达100％。
酶催化的反应大多在温和的条件下进行，温度通常在0～50℃，pH 值接近7.0。
由于酶无毒、易降解、不会造成环境污染，适于大规模生产。
酶固定化技术、多相反应器等新技术的日趋成熟，大大促进了酶拆分技术的发展。
脂肪酶、酯酶、蛋白酶、转氨酶等多种酶已用于外消旋体的拆分。
脂肪酶是最早用于手性药物拆分的一类酶，是一类特殊的酯键水解酶，具有高度的选择性和立体专一性，反应条件温和，副反应少，适用于催化非水相递质中的化学反应，在B 一受体阻滞药、非甾体类抗炎药和其他多种药物的手性拆分中都有广泛的应用。
脂肪酶手性拆分的研究进展
脂肪酶手性拆分的研究进展黄冠廷;杜育芝;彭昆;张文承;叶鹏【摘要】Chiral resolution is widely applied in the preparation of chiral drug , which has important scientific significance and practical value .Due to the unique interface catalytic propertirs , lipase can catalysize in organic phase and has become a hot research in chiral resolution .The application of lipase in resolution of some important intermediates for medical and fine chemicals was summarized , such as chiral alcohols , chiral esters and chiral emines .Furthermore , the mechanism of lipase chiral resolution was introduced .%手性拆分广泛应用于手性药物的制备，具有重要的科学意义与实用价值。
脂肪酶由于其独特的界面催化特性，可在有机相中进行酶促合成，已成为手性拆分研究中的热点之一。
本文重点综述了脂肪酶对手性醇、手性酯和手性胺类等有机合成中间体催化拆分作用的最新研究进展，并从脂肪酶来源、底物分子结构和固定化方法等角度对脂肪酶催化手性拆分机理进行了介绍。
【期刊名称】《广州化工》【年(卷),期】2016(044)009【总页数】5页(P5-9)【关键词】脂肪酶;手性拆分;对映体选择性;酶固定化【作者】黄冠廷;杜育芝;彭昆;张文承;叶鹏【作者单位】浙江理工大学化学系，浙江杭州 310018;浙江理工大学化学系，浙江杭州 310018;浙江理工大学化学系，浙江杭州 310018;浙江理工大学化学系，浙江杭州 310018;浙江理工大学化学系，浙江杭州 310018【正文语种】中文【中图分类】TQ932手性拆分有结晶法、化学法、酶法和色谱法等方法[1]。
手性化合物酶法拆分
1、氨基酸
非天然氨 基酸化学合成法外消旋体酶法拆分
对映体
多数氨基酸不易用化学法拆分，而酶法拆分比较有效。
例如： D-苯基甘氨酸是制备抗菌素类药物的重要中间体， 它由化学合成法制备得到外消旋体，利用氨肽酶成功 地进行了拆分［1］ 。
CH3 H 2N H OH
D, L-苯基甘氨酸 (PG) O (CH3C)2—O
参考文献
实例
Dunsmore等人［9］为此创 立了一种实用的去消旋过 程制备手性胺，使用一种 具有光学选择性的胺环氧 化酶和一个无选择性的化 学还原试剂(如氨水—硼 烷)。酶只氧化(S)—对映 体为亚胺，后者可以被还 原为外消旋胺．这样重复 操作，最终可以获得(R) —对映体，产率和对映体 过剩值都很高。
自然界里有很多手性化合物，因其所具有的特 殊性质和非凡功能，不仅在药物中，而且在农药， 香料，食品添加剂和昆虫信息素等领域均获得了广 泛的应用。 对于手性药物，其构型不 同它们的生理活性和毒性 也不同。
实例
手性问题的重要性！
图 1 对 映 体 的 不 同 生 理 活 性
沙利度胺（Thalidomide） --------天使还是魔鬼？
2、对映异构体
彼此成镜像关系，又不能重合的一对立体异构体互为对 映体。手性分子一定存在对映异构体。
3、外消旋体
一对对映体的等量混合物。它由旋光方向相反、旋光能 力相同的分子等量混合而成，其旋光性因这些分子间的 作用而相互抵消，因而是不旋光的。外消旋体通常用(±) 或 dl 表示。 当一个手性化合物进入生命体时， 它的两个对映异 构体通常会表现出不同的生物活性。（图1）
L-氨肽酶
D, L-PG H2SO4 / 加热 (外消旋化) L-PG
酶法拆分
• 3.3 5-羟色胺拮抗物和摄取抑制剂类手性
药物拆分
• 5-羟色胺(5-HT)是一种涉及到各种精神病、神经系统紊乱， 如焦虑、精神分裂症和抑郁症的一种重要的神经递质。 现有一些药物的毒性就在于它不能选择性地与5-HT受 体反应(现至少已发现7种5-HT受体)，事实上，那些具立 体化学结构的药物在很大程度上能影响其与受体结合的亲 和力和选择性。而其中一种新的5-HT拮抗物MDL就极好 地显示了这一特性。(R)-MDL在体内的活力是(S)-MDL的 100倍以上，是以前知名的5-HT拮抗物酮色林的活力的 150倍，更为重要的是(R)-MDL显示了极高的选择性而与
• Sugai等［23］对合成昆虫信息素、α-维生素E、 D3及前列腺素类似物的重要中间体叔-α-苯氧酸 酯用Lipase OF对其酶促酯化反应，得到了二种 不同的异构体，其中一个反应如下：
• 而日本的Akita等［24］，则在合成肽类抗生素尼克霉素B(nikkomycin B)的 过程中，对一个具有两个手性中心的初级醇，利用脂肪酶在有机溶剂中进行了 拆分，最后得到了不同构型的(2S，3S)-醇和(2R，3R)-醇，而(2S，3S)-醇的 ee值为99%，为合成光学纯的nikkomycin B创造了有利的条件。
表1 世界各公司对单一对映体药物研究情况的展望
药物
•
(S)-ketoprofen
(S)-(+)-ibuprofen
开发商
Chiroscience Merk，Bayer
开发阶段
已批准 已递交新
国家 西班牙 美国
预计上 市年份 1995 1995
药申请
(R)-loxiglumide (S)-fluoxetine (R)-pyridinium ondansetron (R)-salmeterol
分子印迹手性拆分
速0.2 mL/min;进样体积10μL;操作
温度19～36℃ 。
（R)-和(S)-酮洛芬在印迹柱上的分离谱图
（S)-酮洛芬在印迹柱上的谱图
空白柱没有拆分能力,而制得的分子印迹聚 合物对酮洛芬的外消旋混合物显示出良好 的手性拆分能力,(S)-酮洛芬的容量因子为
9.52,选择性因子为1.52,分离度R为0.88。
盐酸克伦普罗结构式 含有一个手性中心
四、新型CSP实例
（一）分子印迹CSP：分子印迹技术又称为分子烙印， 是一种制备在空间 结构和结合位点上与某一分子(模板分子)完全匹配的聚合物的技术。以手 性药物单个对映体为模板获得分子印迹聚合物，制备出分子印迹 CSP，可 用来拆分手性药物。合成印迹分子过程如下
六、高效液相色谱手性衍生化试剂法分离手性药物 1、定义：手性衍生化试剂是在样品处理阶段为提高其分离度，使分析物 和手性衍生化试剂反应生成非对映异构体对，在常规色谱条件下实现分 离的目的。 2、手性衍生化试剂满足条件
（1）手性试剂和反应产物在化学上和手性上都很稳定。手性试剂应是光学纯且在贮存中不 发生改变。在衍生化反应中,试剂、手性药物和反应产物不应发生消旋化反应。 （2）衍生化反应生成的非对映体对在色谱分离时应能显示高柱效。 （3）手性试剂和反应产物在衍生化反应和色谱条件下应是稳定的。为了防止消旋化,反应 条件应尽可能温和简便。 （4）手性试剂应具有UV或荧光等敏感结构，方便检测。 （5）手性化合物对映体的化学结构中应具有易于衍生化的基团,如氨基、羧基、羟基等。
（二）大环抗生素类固定相
该方法将大环抗生素键合到硅胶上，并用来拆分外消旋体，此类手性固定相 通过多 作用点实现分离,可拆分羧酸、 氨基酸、 酰胺、酯类等手性药物。且具有选择性好， 色谱柱容量高， 稳定性好，可用于制备分离的特点。
酶法拆分手性化合物 -
酶法拆分的技术归纳及运用
1、动力学拆分
1858年，Pasteur发现用灰绿青青酶发酵消旋酒石酸铵 时，右旋对映体的代谢要比左旋体快，并以此进行分离得 到光学活性的非天然的左旋酒石酸铵。这是化学史上的第 一个动力学拆分的例子。
原理：外消旋混合物中的各组分和酶以不同速率进行反
应，因此通过选择酶的种类和控制反应进程可以使其中的 一种对映体转化成产物，而另一种对映异构体则不发生反 应，从而达到分离的目的。
酶法拆分的技术归纳及运用
4、非水溶剂下酶法拆分
酶催化水解反应是应用最广的一项技术, 它的缺点是溶 液较稀且存在酶的回收问题. Zaks等人研究了酶在有机介 质中的催化条件和特点, 从而改变了以往认为酶只催化水 溶液中反应的传统观念。 目前关于水解酶的研究较多, 而研究水解酶在有机溶剂 中的应用有一定的应用价值. 利用这种方法不仅能合成酯 和氨基化合物, 而且还能将不溶性的酶从反应混合物中过 滤出来而回收, 因而酶的酰基化比水解反应有效。
酶法拆分的技术归纳及运用
例如： 酰基化供体主要应用在醇、胺和酸的动力学拆分 上, VA( vinyl acetate)就是一种常用的酰基化试剂。
总结
过去的几年里, 酶已在许多手性化合物的拆分 中得到了应用, 但对于已知的2 000 多种酶的总体 而言, 这些酶中只有极少数(其中大部分是水解酶) 被用于手性化合物的拆分, 随着蛋白质工程和工业 微生物的不断发展, 相信在不久的将来, 更为廉价 的、稳定的、适用于多种基质和高度选择性的酶 的不断开发, 会使酶在手性化合物的拆分中的应用 变得更为广阔。
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酶法拆分手性化合物
内容提要
一 二 三 四 五 背景简介 手性化合物制备方法 酶法拆分手性化合物 酶法拆分的技术归纳及运用 总结
酶法拆分手性化合物PPT课件
实例三：酶法拆分醇类手性化合物
醇类化合物是生物体内常见的代谢产物和溶剂，也具有手性中心。酶法拆分醇类手性化合物，主要是 利用酶对醇类化合物的氧化还原和转化能力，将醇类外消旋混合物拆分成单一的对映体。
例如，脂肪醇氧化酶能够将脂肪醇的外消旋混合物拆分成单一的R-醇和S-醇。通过控制酶作用的条件 ，还可以实现不同比例的拆分，得到不同比例的单一对映体。同时，一些醇类化合物还可以通过酶的 转化，生成其他类型的手性化合物。
实例二：酶法拆分糖类手性化合物
糖类化合物是生物体内重要的能量来 源和信息分子，也具有手性中心。酶 法拆分糖类手性化合物，主要是利用 酶对糖类化合物的识别和转化能力， 将糖类外消旋混合物拆分成单一的对 映体。
VS
例如，β-半乳糖苷酶能够将β-半乳糖 苷的外消旋混合物拆分成L-半乳糖和 D-半乳糖。通过控制酶作用的条件， 还可以实现不同比例的拆分，得到不 同比例的单一对映体。
利用高通量技术，快速筛选出具有拆分手性化合物活性的酶。
基因组学和蛋白质组学技术
通过基因组学和蛋白质组学技术，发现新的酶源，提高酶的多样性。
虚拟筛选技术
利用计算机模拟技术，预测酶的活性，提高筛选效率。
酶的固定化技术
包埋法
将酶分子包埋在固定化载体中，保持酶的活性并可重 复使用。
吸附法
利用物理或化学方法将酶分子吸附在固定化载体上， 提高酶的稳定性。
实例一：酶法拆分氨基酸类手性化合物
氨基酸是构成蛋白质的基本单位，具有手性中心。酶法拆分氨基酸类手性化合物，主要是利用酶的专一性和高效性，将氨基 酸的外消旋混合物拆分成单一的对映体。
例如，L-氨基酸氧化酶能够专一性地氧化L-氨基酸，生成相应的α-酮酸，而D-氨基酸则不受影响。通过这种酶的作用，可以将外 消旋的氨基酸混合物拆分成单一的L-氨基酸或D-氨基酸。
脂肪酶
脂肪酶催化药物合成院系：化工学院班级： 2009级制药工程2班学号： 20009650818姓名：李红霞脂肪酶催化药物合成摘要：将脂肪酶固定化可提高酶的选择性、稳定性等，已广泛应用于手性拆分等研究。
常用的高分子固定化载体有聚丙烯酸多孔树脂及带功能基团的共聚物等。
从脂肪酶结构的角度介绍其手性拆分机理，并具体讨论了一些商品化固定化脂肪酶在手性拆分中的应用及固定化载体材料对手性拆分的影响。
关键词：脂肪酶；酶催化；手性拆分；药物合成；应用一、综述脂肪酶（Triacylglycerol lipase E C3.1.1.3）是广泛存在的一种酶，在脂质代谢中发挥重要的作用。
在油水界面上，脂肪酶催化三酰甘油的酯键水解，释放更少酯键的甘油酯或甘油及脂肪酸。
脂肪酶结构有2个特点：(1) 脂肪酶都包括同源区段：His-X-Y-Gly-Z-Ser- W-Gly或Y-Gly-His-Ser-W-Gly (X、Y、W、Z是可变的氨基酸残基)；(2) 活性中心是丝氨酸残基，正常情况下受1个α-螺旋盖保护。
脂肪酶的特性脂肪酶底物专一性酶的底物专一性取决于酶分子结构，脂肪酶分子由亲水、疏水两部分组成。
活性中心靠近分子疏水端。
不同来源的脂肪酶存在着结构上的差异，使得不同的来源的脂肪酶有不同的底物专一性。
1.1来源脂肪酶广泛的存在于动植物和微生物中。
植物中含脂肪酶较多的是油料作物的种子，如蓖麻籽、油菜籽，当油料种子发芽时，脂肪酶能与其他的酶协同发挥作用催化分解油脂类物质生成糖类，提供种子生根发芽所必需的养料和能量；动物体内含脂肪酶较多的是高等动物的胰脏和脂肪组织，在肠液中含有少量的脂肪酶，用于补充胰脂肪酶对脂肪消化的不足，在肉食动物的胃液中含有少量的丁酸甘油酯酶。
在动物体内，各类脂肪酶控制着消化、吸收、脂肪重建和脂蛋白代谢等过程；细菌、真菌和酵母中的脂肪酶含量更为丰富(Pandey等)。
由于微生物种类多、繁殖快、易发生遗传变异，具有比动植物更广的作用p H、作用温度范围以及底物专一性，且微生物来源的脂肪酶一般都是分泌性的胞外酶，适合于工业化大生产和获得高纯度样品，因此微生物脂肪酶是工业用脂肪酶的重要来源，并且在理论研究方面也具有重要的意义。
手性合成、手性拆分在分析分离科学及医药学中的应用
手性合成、手性拆分在分析分离科学及医药学中的应用∗张来新;朱海云【摘要】Chiral synthesis, chiral resolution, and their applications were introduced in this paper. Emphases were put on from three parts:(1) chiral synthesis,chiral resolution,and their applications to analytical and separa-tion science;(2) synthesis and applications of oxygen-containing side chain triazole active antifungal compounds to medicine;(3) chiral resolution of acid memory effect to cyclodextrin chiral stationary phase and its applications. Future developments of charal chemestry were prospected in the end.%简要介绍了手性合成、手性拆分及应用。
重点介绍了：(1)手性合成及手性拆分在分析分离科学中的应用；(2)含氧侧链三唑类抗真菌活性化合物的合成及在医药学中的应用；(3)酸性记忆效应对环糊精手性固定相的手性分离及应用。
并对手性化学的发展进行了展望。
【期刊名称】《合成材料老化与应用》【年(卷),期】2016(045)006【总页数】5页(P102-106)【关键词】手性合成;手性拆分;应用【作者】张来新;朱海云【作者单位】宝鸡文理学院化学化工学院，陕西宝鸡721013;宝鸡文理学院化学化工学院，陕西宝鸡721013【正文语种】中文【中图分类】TQ016.512001年诺贝尔化学奖授予三位用手性催化剂合成手性药物的化学家,这说明手性化学的重要性和人们对发展手性催化剂及手性药物的渴望。
手性化合物拆分方法
手性化合物拆分方法
手性化合物的拆分方法有以下几种：
1. 光学活性-不对称合成：可以通过一系列不对称合成反应，利用手性催化剂或手性辅助剂来合成手性化合物。
2. 光解反应：手性化合物在经过光解反应后可以拆分成两个非对映体。
3. 通过手性膦酸或手性天然产物催化的羟基醛/酮脱水反应：手性化合物在这个反应中可以通过脱水反应得到不对映体。
4. 通过手性酸或手性碱催化的亲电取代反应：手性化合物在这个反应中可以通过亲电取代反应得到不对映体。
5. 对于手性化合物，可以利用酶催化的反应来拆分。
需要注意的是，手性化合物的拆分往往要求合成条件和反应条件严格控制，选择适当的手性催化剂或手性辅助剂，并且需要进行相关的分离、纯化和鉴定等步骤来得到拆分产物。
[教学设计]手性药物拆分的研究进展
![[教学设计]手性药物拆分的研究进展](https://img.taocdn.com/s3/m/ae50d147814d2b160b4e767f5acfa1c7aa0082c0.png)
手性药物拆分的研究进展许多药物具有光学活性(opitical activeity)。
一般显示光学活性的药物分子，其立体结构必定是手性(chirality)的，即具有不对称性。
手性是指其分子立体结构和它的镜像彼此不能重合。
互为镜像关系而又不能重合的一对分子结构称为对映体(enantiomer)。
虽然对映异构体药物的理化性质基本相同，但由于药物分子所作用的受体或靶位是由氨基酸、核苷、膜等组成的手性蛋白质和核酸大分子等，后者对与之结合的药物分子的空间立体构型有一定的要求。
因此，对映异构体在动物体内往往呈现出药效学和药动学方面的差异。
鉴于此，美国食品药品监督管理局规定，今后研制具有不对称中心的药物，必须给出手性拆分结果，欧盟也提出了相应的要求。
因此，手性拆分已成为药理学研究和制药工业迫切需要解决的问题。
目前，利用酶法、超临界流体色谱(SFC)法、化学法、高效液相色谱(HPLC)法、气相色谱(GC)法、毛细管电泳(capillary electrophoreisis，CE)法和分子烙印法拆分对映体，已成为新药研究和分析化学领域的重要课题。
笔者在本文综述了近年来利用上述方法拆分手性药物的研究进展。
1酶法酶的活性中心是一个不对称结构，这种结构有利于识别消旋体。
在一定条件下，酶只能催化消旋体中的一个对映体发生反应而成为不同的化合物，从而使两个对映体分开。
该法拆分手性药物已有较久的历史，反应产物的对映过剩百分率可达100％。
酶催化的反应大多在温和的条件下进行，温度通常在0～50℃，pH 值接近7.0。
由于酶无毒、易降解、不会造成环境污染，适于大规模生产。
酶固定化技术、多相反应器等新技术的日趋成熟，大大促进了酶拆分技术的发展。
脂肪酶、酯酶、蛋白酶、转氨酶等多种酶已用于外消旋体的拆分。
脂肪酶是最早用于手性药物拆分的一类酶，是一类特殊的酯键水解酶，具有高度的选择性和立体专一性，反应条件温和，副反应少，适用于催化非水相递质中的化学反应，在B 一受体阻滞药、非甾体类抗炎药和其他多种药物的手性拆分中都有广泛的应用。
手性药物拆分技术的研究进展
手性药物拆分技术的研究进展一、本文概述手性药物，即具有手性中心的药物分子，其立体构型的不同可能导致药物在生物体内的活性、药代动力学和毒性等方面产生显著的差异。
因此，手性药物的拆分技术在药物研发和生产过程中具有至关重要的地位。
随着科学技术的发展，手性药物拆分技术也在不断进步，以适应日益增长的手性药物需求。
本文旨在综述手性药物拆分技术的研究进展，包括但不限于拆分方法、拆分效率、拆分机理以及在实际药物研发中的应用案例。
我们将从传统的拆分方法，如结晶法、色谱法，到现代的拆分技术，如膜分离、酶法等，进行全面的梳理和评价。
我们也将探讨手性药物拆分技术的发展趋势和面临的挑战，以期为手性药物研发和生产提供有益的参考和指导。
通过本文的阐述，我们希望能够使读者全面了解手性药物拆分技术的研究现状和发展动态，为手性药物的研发和生产提供理论支持和实践指导，推动手性药物拆分技术的不断发展和完善。
二、手性药物拆分技术的分类手性药物拆分技术主要可以分为物理拆分法和化学拆分法两大类。
物理拆分法主要包括结晶法、色谱法、膜分离法等，这些方法主要基于手性药物分子间物理性质的差异进行拆分。
化学拆分法则包括不对称合成、手性衍生化试剂法等，这些方法则通过化学反应引入手性中心或者改变手性药物的物理性质，从而实现对目标手性药物的拆分。
（1）结晶法：通过调整溶液条件，如温度、pH值、溶剂种类等，使手性药物分子在结晶过程中形成不同的晶体形态，从而实现拆分。
该方法操作简单，成本低，但拆分效果往往受到药物分子间相互作用和结晶条件的影响。
（2）色谱法：包括液相色谱、气相色谱、毛细管电泳色谱等。
这些方法通过选择适当的手性固定相或手性流动相，利用手性药物分子在固定相和流动相之间的相互作用差异，实现对手性药物的拆分。
色谱法拆分效果好，但设备成本较高，操作复杂。
（3）膜分离法：利用手性药物分子在膜上的传质速率差异，通过选择适当的膜材料和操作条件，实现对手性药物的拆分。
手性拆分技术
手性拆分技术手性药物的制备技术由化学控制技术和生物控制技术两部分组成。
化学控制技术：普通化学合成、不对称合成和手性源合成.生物控制技术：天然物的提取分离技术和控制酶代谢技术。
手性拆分法：结晶法拆分、动力学拆分、色谱分离法拆分、膜拆分法、萃取拆分法1.结晶拆分法结晶法拆分包括直接结晶法拆分和非对映异构体拆分分别适用于外消旋混合物和外消旋化合物的拆分。
在一种外消旋混合物的过饱和溶液中, 直接加入某一对映体的晶种,即可得到一定量的该对映体, 这种直接结晶的拆分方法仅适用于外消旋混合物, 其应用几率不到10％外消旋化合物较为常见, 大约占所有外消旋体的90%。
通过与非手性的酸或碱成盐可以使部分外消旋化合物转变为外消旋混合物，扩大直接结晶法拆分的应用范围使部分外消旋化合物转变为外消旋混合物。
也可采用与另一手性化合物(即拆分剂)形成非对映异构体混合物的方法，利用这对非对映异构体盐的溶解度和结晶速去率的差异, 通过结晶法进行分离, 最后脱去拆分剂即得单一构型的异构体。
最常见的拆分剂是手性酸或手性碱。
近年出现了组合拆分、复合拆分、包合拆分和包结拆分等新技术，是对非对映异构体拆分的有效补充。
1.1 组合拆分组合拆分是指采用结构类型相同的2～3个手性化合物构成的拆分剂家族代替单一拆分剂进行外消旋化合物拆分的新方法。
拆分剂家族一般是将常用的手性拆分剂（如α-甲基苄胺、α—氨基苯乙醇、酒石酸、扁桃酸等）进行结构修饰而形成的一组衍生物.在拆分剂家族中，每个化合物之间要具有非常强的结构类似性和立体化学均一性。
实际操作过程是将拆分剂家族和被拆分的外消旋化合物以物质的量比1∶1的比例溶在某一种溶剂中, 进行结晶拆分。
与单一拆分剂相比，拆分剂家族以高选择性和高收率与外消旋体快速地形成非对映体的结晶。
1。
2 复合拆分如果外消旋化合物结构中无酸性或碱性官能团时，那么结晶法拆分的应用将受到限制，复合拆分（complexresolution）便是一个补充。
手性分子的拆分技术
精心整理手性分子的拆分技术郝婷玉级材料工程摘要：对外消旋体实施拆分是获得手性物质的重要途径。
本文综述了外消旋体的拆分方法，主要有直接结晶拆分法、化学拆分法、动力学拆分法、色谱拆分法(含毛细管电泳法)和手性膜拆分法等五大类。
其中,包括目前作为手性拆分主要方法的色谱技术在内的前4类方法,由于批处理能力小、工业放大成本高,不适合大规模生产;相反,膜分离技术具有能耗低、易于连续操作等优点,被普遍认为是手性的。
,,有限，因而在应用上也受到一定的限制。
（3）外消旋体拆分法：是在拆分剂的作用下，将外消旋体拆分成对映体。
因为化学法合成外消旋体比较简单，这种方法成本相对较低，因而得到广泛应用。
据统计，大约有65%的非天然手性药物是由外消旋体或中间产物拆分得到的。
本文依据国内外相关文献报道，总结了外消旋体的拆分方法。
迄今,手性拆分技术主要有直接结晶拆分法、化学拆分法、动力学拆分法、色谱拆分法(含毛细管电泳法)和手性膜拆分法等五大类[3]。
1.直接结晶拆分法对于一个外消旋混合物，其两种对映体常自发地以宏观晶体分别析出，如果这些晶体可以用肉眼区别，那么就可在放大镜的帮助下，用镊子之类的工具将他们拣出分开，从而达到拆分的目的。
这就是所谓的机械拆分法。
机械拆分法的缺点是过于繁琐，不能应用于外消旋化合物和外消旋固体溶液。
Wynbery等[4]用（-）-α-蒎烯作溶剂，通过直接结晶法拆分了类似七环杂螺烯的外消旋体。
但这种方法需要寻找特殊的手性溶剂，且适于拆分的外消旋混合物的范围相当狭窄，故实际工业生本。
2.2.1体，拆分剂和溶剂的选择较为盲目；（2）拆分的产率和产品的旋光纯度不高；（3）适用于手性拆分的化合物的类型不多。
近年来，随着主-客体化学的深入研究而开发出来的包结拆分和组合拆分等新型手性拆分技术，在一定程度上解决了经典成盐拆分方法的不足。
2.2包结拆分由日本化学家Toda教授发明的包结拆分[6]与经典成盐拆分相比，所拆分的化合物不再局限于有机酸或者有机碱。
手性药物分析方法研究进展
手性药物分析方法研究进展钟春素;杨华【摘要】Based on the concept of chiral drugs, the principle, characteristics and research examples of several kinds of commonly used chiral pharmaceutical analysis technology were reviewed, which includes high-performance liquid chromatography (HPLC), capillary electrophoresis (CE), molecular imprinting technology(MIT), high-speed counter-current chromatography (HSCCC), supercritical fluid chromatography (SFC) and enzymatic method. All these may provide guidance for chiral drug separation technology.%从手性药物的概念入手,阐述了高效液相色谱法、毛细管电泳法、分子印迹技术、高速逆流色谱法、超临界流体色谱法和生物酶法等几种常用的手性药物分析技术的原理、特点及研究实例,以期为手性药物分离技术提供指导.【期刊名称】《湖南农业科学》【年(卷),期】2017(000)011【总页数】4页(P113-115,118)【关键词】手性药物;分离;色谱法;研究进展【作者】钟春素;杨华【作者单位】湖南农业大学生物科学技术学院,湖南长沙 410128;湖南农业大学植物科学实验教学示范中心,湖南长沙 410128【正文语种】中文【中图分类】R914.1目前，40%～50%的药物具有手性。
而手性药物的2种不同对映体的生物活性存在较大差异，一个可能是有效成分，而另一个可能是低效甚至是有毒成分。
酶在手性拆分中的应用
Ｃ ｅ ｉｔ ．１ ８ ． ６ （） １４ ３ ０ ． ｈ ｍ ｓｙ ９ ８ ２ ３７：３９ — ２ １ ｒ
【】高波 ， ６ 朱广山 ， 博学奇．介孔分子 筛 Ｓ Ａ １ Ｂ 一５ 中 ａ一 凝 乳 蛋 白 酶 组 装 及 催 化 活 性 研 究 ｆ． 胰 Ｊ 】 高等学校化 学学报 ，０ ３ ４６：ｌ０ 一 １２ ２０ ，２ ｆ） １０ ｌ０ ． 作者简 介： 韩佳 （９ ７ ， ， １８ ～）女 湖北 京山人 ， 西 南交通大 学生命科 学 与工程 学院 硕士研 究 生， 学历 ： 硕士在读 ， 究方向 ： 研 药物化学。
ｅ ｒ ｈ ｄ ｄ ｒｎ ｓ Ⅲ ． Ｊ ｕ ａ ｏ Ｍｏｅ ｕａ ｎ ｉ ｅ ｏ ｏａ ｔ ｃ ｏｒｌ ｆ ｎ ｌｃｌ ｒ
Ｃ ｔｌｓ ：Ｅ ｚ ｍ ｔ ．２ ｏ ，３ （） ３ ５ ． ａａ ｉ Ｂ ｎｙ ａｉ ０ ４ ２２：３ － １ ｙｓ ｃ
ｔ１ Ｐ ｎ ｅ ３ ａ ｔ ｓ Ｏ．Ｂ ｅ ｖ ｌ Ｊ ｏ ｂ ｎ ｔ ｎ ｏ ｎ ｉ ａ ｋ ａ ．Ｃ ｍ ｉａｉ ｆ Ｅ — ｌ ｏ
状并给 出了自己的见解。 关键 词 ： ； 性拆 分 ； 映体 酶 手 对 体。采用动态动力学拆分法（ Ｋ Ｄ Ｒ法 ） 制备是一种 捷径， 与其它方法相比其高效方便。一般的 Ｄ Ｒ Ｋ 都以金属作催化剂，近年来利用过渡金属作催化 剂 也得到广泛 的研究 ， 但金属容易残 留在药物中 间体中， 会对人类健康产生不 良影响。 因此利用酶 进行 Ｄ Ｒ 制备反应成为一条捷径 。利用该法还 Ｋ 是有条件的：底物的消旋化速率必须 比酶催化反 １ 结 晶拆分 法 ． １ 应 快 ： 物 在底 物消 旋化 的 反应 条 件 下必 须 立 体 产 酶催化反应必须有高度的选择性。 在一对对映体的过饱和溶液 中， 某～种对 映 化学稳定； 异构体能够 自发的结晶或在加入了某一种对映体 ２３ ＿去消旋化或对映体收敛转化 去消旋化过程，又称 为对映体收敛转化法 ， 的晶种后 ， 该对映体以高纯度析出晶体， 而剩余 的 溶液含有过量的另一种对映异构体 ，在溶液浓缩 有别于分离两种对映体，是将两种对映体通过各 后能够析 出或植入同样的品种后析 出。在该过程 自独立 的路线转化为相 同的立体异构体产物， 其 中， 要仔细的控制好条件才能得到较好的结果。 当 中一种对映体的构型保持不变， 而另一种发生改 在结晶的过程中，如果能使另一种对映异构体消 变。如 Ｄ ａ ｒ ｕ ｓ ｅ等人 Ｉ 了 ｍ 立 一种实用的去消旋 旋化 ， 该方 法 就很有 吸 引力 。 则 过程制备手性胺， 使用一种具有光学选择性的胺 １ 非 对 映异 构体拆 分法 ． ２ 环 氧化 酶 和一 个无 选择 性 的化 学 还原 试 剂 ｆ 氨 如 即通 过手 性试 剂 与对 映异 构 体反 应 ， 成 非 水 ～硼烷１ 生 。酶只氧化 Ｓ型对映体为亚胺，后者可 对映异构体， 利用它们之间分子键作用力的差异 ， 以 被还原 为 外消 旋胺 。 用非手性的方法将它们分离开来，最后分解所要 ２ ． ４非水溶 剂 下酶 法拆分 的非对映异构体得到前述的对映异构体之一。 前面提及到，酶拆分法的缺点是酶在溶剂中 Ｉ 底物选择性拆分法 ＿ ３ 的活性问题及溶液较稀存在酶的回收问题。Ｚｋ ａｓ 早期的为无酶的动力学拆分法， 用一手性试 等人 发现当在非水溶剂中时糜蛋 白酶的热力学 剂与一对对映体以不同的速率反应 ， 根据速率差 稳定性比有水更加稳定 ， 贮存时间更长， 选择性更 值而得到 目标对映异构体ｔ 现在人们已逐渐广泛 高。 １ 。 但游离酶在非水相 中对水分的变化非常敏感 ， 地用脂肪酶和酯酶来拆分外消旋醇和羧酸。酶催 易结块且分散性差 ，严重影响了酶的催化性能此 化拆分的主要途径为立体选择性水解 、酯化和转 法仍然在研究中。 酯 作 用。 除此 之外 ， 化还 原酶 也常 被用 于合 成 和 氧 ３ 研究 现状 拆分外消旋体。 相比较传统 的拆分试剂， 它们对底 现在人们努力的重点是寻找和改 良能在有机 物 具有 高度 的化 学选 择性 、 选择 性 、 区域 以及 对 映 溶剂中使用的酶。酶在非水介质中进行催化作用 选择性 ；而且它们无需辅酶因子并且没有催化副 时需要分子表面有一定的水分，以维持其行使催 反应。 现在 通过 微生 物发 酵 的方 法 ， 它们 已经 能够 化功能所必需的构象。 由于绿色化学的发展， 人们 大 量生产 。 发现很多酶在离子液体中具有 比在有机溶剂 中更 ２酶 拆分 法 高的催化活性和立体选择性 。并且发明了酶 固定 ２１ ．酶法动力学拆分 化的方法来稳定酶的活性 ，但常规 固定化方法存 此法的关键为找到合适的酶 ， 外消旋混合物 在诸多弊端 ， 如吸附法固定时易造成酶的流失 ； 而 中的组分 和 酶 以不 同的速 率反 应 ，将其 中一种 对 共价结合或包埋 固定时则会大幅降低酶的活性。 映 体转化 为 产物 ， 另一 种速 率很 低 或不 反 应 ， 对 从 高 波 等人 介孔 分 子筛 成 功地 固定 了胰 凝 乳 蛋 用 而达到分离的效果。 在动力学拆分过程中， 随着反 白酶 ， 克服 了上 述 问题 。Ｕｔ ｓ ｂｅＹ分 子 筛 成功 ｌａｔ ｌ ｒ ａ — 应转化率的变化，底物和产物的 ｅ 值不断变化 ， 能为酶提供适合它们存在的“ ｅ 潮湿” 环境 ， 采用其 为此采用一个新的度量值 Ｅ，用束表示对映体过 固定化的脂肪酶拆分时，能大大提高催化效率和 量比， 其表示了酶对对映体中两种构型分别的能 立体选择性。 力 。根据 经验 规律 ， Ｅ值小 于 】 不 适 于实 用 生 ５则 ４展望 产。 上述已经阐述 了酶在手性拆分 中的应用以及 ２２ 法动 态动 力学拆 分 ．酶 在应用 中各种因素对酶催化活性的影 响，关键还 动力学拆分得到光学纯度产物的量不会超 是要发现高效的特异的酶。随着现代生物技术的 过 ５％， 果不加 以利 用另 一种 异 构体 ， ０ 如 而将 其 废 发展， 通过高通量筛选技术以及新的菌株的发现 ， 弃的话 ，不仅会造成环境污染 ，也会增加经济成 必定能够发现作用于手性拆分 的特异 的酶，为以 本 。在 此基 础之 上 ， 出 了动 态 动力 学 拆分 ， 提 即在 后的人类 医药以及其它方面做出巨大的贡献。 拆分过程中， 将不需要的对映体进行消旋化 ， 这样 参 考 文献 不断循环可以把 外消旋体全部转化为一种对 映 Ｉ］ Ｘ Ｑ，Ｘｉ ，Ｇ ｎ ， ｅ １ ｎｙ ｔ １ ｕ ｅ Ｙ ｅ ｇ Ｘ ｔ ．Ｅ ｚｍａｉ ａ ｃ 有记载来最早的拆分为巴斯德在 １４ 年从 ８８ 外消旋的酒石酸盐 中得到了 ＲＲ 酒石酸盐。 ８９ ，一 １ ９ 年 Ｍ ｒ ｗｌ ａｃ ａ ｋ ｄ和 Ｍｃ ｅｚ 发现 了非酶催化动力 Ｋ ｎｉ ｅ 学拆分法 ， 在当时并没有引起重要的影响。 后来人 们倾向于寻找合成单一对映异构体的方法，但拆 分的方法现在依旧占据很大 的比 例。 ｌ手性拆分法的分类
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分子模拟在脂肪酶的手性拆分中的研究姓名：学号：专业：摘要随着工业催化技术的发展，脂肪酶作为一种重要的生物催化剂现已成为世界研究的热点. 脂肪酶催化拆分手性化合物是‘绿色’化合成手性药物、环保农药、高级香料的理想途径之一，反应选择性高，速度快，反应条件温和。
因此研究脂肪酶催化拆分手性化合物不仅有重要的理论意义，而且有重要的应用价值。
随着计算机技术的发展和成熟，计算机模拟(又称分子模拟)在蛋白质结构与功能关系的研究中扮演越来越重要的角色。
本文介绍了近年来脂肪酶在醇、酯、胺的拆分方面的一些应用和分子模拟在其中的应用，随着生物、化学和计算机领域的不断交叉，将进一步推动脂肪酶的开发和应用。
关键词：脂肪酶；分子模拟；手性拆分；脂肪酶结构1 前言脂肪酶是一类具有多种催化能力的酶，又称三酰基甘油水解酶(EC 3.1.1.1)，广泛存在于动植物和微生物中，可以催化三酰甘油酯及其他一些水不溶性酯类的水解、醇解、酯化、转酯化及酯类的逆向合成反应。
微生物脂肪酶是工业用脂肪酶的重要来源，并且在理论研究方面也具有重要的意义。
1.1 分子模拟[1]分子模拟又称“计算机模拟”或“计算机实验”,是一种根据实际体系, 在计算机上进行的实验, 通过比较模拟结果与实际体系的实验数据来检验模型的准确性, 并可检验由模型导出的解析理论所作的简化近似是否成功。
用分子模拟不但可以模拟现实中能进行的实验过程, 而且可以用来模拟、研究如分子在各种表面上的动态行为、玻璃态的分子结构、分子运动的特征、蛋白质的折叠等现代物理实验方法难以计量的物理现象与物理过程。
生物大分子结构研究首要任务, 即核酸和蛋白质等的研究, 包括其间的相互作用、相互反应和信息传递。
理解生物过程要求多方面的知识和方法, 包括生物学、化学, 物理学和计算机科学的应用等。
我们研讨生物系统的最大难题是生物系统的复杂性, 用牛顿力学来解释是远远不够的, 用量子力学来研究困难很大(原因在于即使一个最简单的生物大分子的量子力学方程式, 甚至不可能求得解析解) , 一个可行的方法是应用分子模拟技术进行处理。
因此, 分子模拟成为分子生物学中的一个重要的研究手段。
1.2脂肪酶的结构特点和催化特点[2]到目前为止，大约2 000 种脂肪酶及相关酶的非冗余序列被提交到蛋白质数据库。
所有已知的脂肪酶没有特征性的相似序列，呈现出惊人的多样性，它们的唯一共性是都有一个保守的五肽序列；尽管脂肪酶的一级序列不同，但是所有脂肪酶表现为相同的结构框架，即所谓的α/β水解酶折叠，并且它们有相同的催化机制，活性位点为一个催化三联体，这个三联体包括亲核试剂、酸性残基和组氨酸，多数微生物脂肪酶活性中心为丝氨酸、天冬氨酸和组氨酸构成的三联体，少数脂肪酶活性中心由丝氨酸、谷氨酸和组氨酸构成。
脂肪酶分子中除了含有α螺旋和β折叠之外，其活性部位的上方一般有一个盖(lid、flap 或loop)。
在关闭构象状态时，“盖子”覆盖在酶的活性位点上，酶难以靠近底物分子，而转变到开放构象状态时，催化通道入口打开。
近年来，发现“盖子”的作用不仅仅是调节底物靠近活性位点的大门，还与脂肪酶的界面活性有关。
这使得脂肪酶催化特性表现为，在油/水界面上其催化活力最大。
2 脂肪酶手性拆分研究2.1 脂肪酶催化转酯化反应拆分手性醇脂肪酶对手性伯醇的对映体选择性一般较低，而仲醇是脂肪酶催化拆分反应中最常见的底物[3]。
其一是由于仲醇在有机合成中的重要性；另外，脂肪酶对仲醇较伯醇和叔醇能获更高的对映选择性。
光学纯的α-苯乙醇衍生物是一类重要的手性模块, 常用作医药、精细化学品、天然产品等的合成中间体。
其R 和S 两种对映异构体各有不同的应用价值，(R)-α-苯乙醇作为香料被大量用于化妆品行业中, 还可应用于溶剂变色染料、眼科防腐剂、胆固醇肠道吸收抑制剂等；(S)-α-苯乙醇常用作许多药物的合成前体, 如免疫增强剂左旋咪唑、治疗哮喘的药物(S)-异丙肾上腺素、抗抑郁药物取舍林等。
因此它的拆分备受关注。
江南大学生物工程学院某实验室[4]研究了非水有机溶剂体系中脂肪酶不对称转酯化拆分(R,S)-α-苯乙醇反应, 比较了15 种不同微生物来源的脂肪酶, 从中优选出催化活性及对映选择性较高的脂肪酶Lipase PS, 系统考察了影响该酶催化不对称转酯化反应的关键因素, 获得了优化的催化拆分工艺条件. 结果底物(R,S)-α-苯乙醇的转化率达44.7%, 产物(R)-乙酸苯乙酯的光学纯度达98.6%.2.2 脂肪酶催化水解反应拆分手性酯S-(+)-2,2-二甲基环丙烷甲酸(S-(+)-DMCPA) 是制备西司他丁的重要手性中间体。
浙江工业大学药学院王普等人[5]采用脂肪酶催化外消旋2,2-二甲基环丙烷甲酸乙酯(DMCPE) 不对称水解合成S-(+)-2,2-二甲基环丙烷甲酸(S-(+)-DMCPA). 比较了 5 种不同来源的脂肪酶, 从中优选出立体选择性较高和催化活性较高的脂肪酶Novozyme435, 系统考察了影响该酶催化不对称水解反应的关键因素, 获得了优化的生物催化工艺条件. 产物的收率和光学纯度分别达到45.6% 和99.2%. 该反应具有良好的工业化应用前景.萘普生(Naproxen)是一种在临床上广泛应用的2-芳基丙酸类非甾体抗炎手性药物，存在一对光学活性对映体. 研究证明，(S)-萘普生的药理学活性是(R)-萘普生的28 倍，且(R)-萘普生具有一定的毒副作用。
因此，从用药安全性考虑，萘普生在临床上需以纯S 型对映体形式给药. 所以研究一种高效、低成本拆分萘普生的方法非常重要。
福建师范大学[6]通过对固定化Penicillium expansum TS414 脂肪酶催化酯化拆分消旋萘普生条件的研究，考察了水分、温度、有机溶剂、酶浓度、醇结构和醇浓度对酶促拆分反应的影响，确立了优化的酯化反应条件，在此条件下，酯化拆分反应的转化率为48.3%. 结果表明，固定化Penicillium expansum 脂肪酶是一种较为理想的用于外消旋萘普生拆分的工具酶。
3利用分子模拟提高酶的对映选择性针对酶催化所体现的手性选择性，国内外学者提出了众多假设，目前普遍认可的是“口袋”模型[7]。
脂肪酶的活性中心在空间结构上形成一大一小的两个“口袋”，当底物分子含有两个大小不同的取代基时，反应速度较快的对映体大小基团正好与酶活性部位的大小“口袋”匹配; 而另一个对映体的大小基团则不匹配，难以进入酶活性部位，成为慢反应。
这种快慢反应速度差异越大，手性选择性越高。
通过介质工程可调节酶的对映选择性。
溶剂能影响酶分子表面的水化层，有时甚至能侵入酶分子内部，与中心附近的氨基酸残基相互作用而影响酶活性中心构象，从而改变酶的催化活力和对映选择性。
提高选择性另一个常用方法是定向进化。
通过定向进化技术，人们可以改变酶的立体选择性、活力以及稳定性等性质，并且已经获得了很多具有应用价值的新酶[8]。
3.1分子对接在脂肪酶中的应用[9]在分子模拟领域，分子对接作为一种常用的模拟手段，已经被广泛应用在虚拟药物筛选，酶和底物作用机理，酶抑制剂设计等研究方面。
分子对接依照受体与配体的互补作用原理，即锁钥原理(lock-and-key principle)，来模拟预测小分子配体和大分子受体之间的作用形式和机理，常见的分子对接软件有Dock，Autodoek，FlexX，Surflex等。
分子对接方法可以分为三类:刚性对接，半柔性对接以及柔性对接。
Herlnannl等使用Dock软件，通过对接高能过渡态类似物的方法来预测已知酶的底物。
他们将每种底物(基态/高能态)对接到7种不同的酞胺水解酶上，与基态底物相比，对接高能中间态底物剔除了大量的假阳性分子，达到了很好的预测筛选效果。
同时为了检测该方法的预期效果，他们尝试去预测磷酸醋酶对一系列手性底物的对映体选择性(包括野生型酶和突变体酶)。
经实验验证，对接高能中间体的方法正确预测了18/20酶底物对的立体选择性。
3.2分子动力学在脂肪酶中的应用[10]分子动力学主要使用牛顿力学对分子体系的运动进行处理，通过抽取样本，来计算体系的构型积分，并以构型积分的结果为基础来计算得出整个体系的热力学量和其他相关的性质。
大量有关溶剂温度和pH效应对脂肪酶活性影响的研究报道，使得我们能够确认和增加对脂肪酶分子运动以及催化位点特征的了解。
脂肪酶的动力学模拟主要集中在以下几个方面: 1. 模拟酶结构的构象变化；2. 模拟盖子的运动；3. 模拟底物特异性。
2010年，Licong等[65l利用Amberlo软件包软件进行了cALB的分子动力学和量子动力学模拟，分析了甲醇，丙酮，四氢吠喃，氯仿，环戊烷，正己烷6种不同有机溶剂对CALB的构象稳定性和活性的影响。
模拟结果显示，在有机试剂(极性或非极性)中，cALB的整体构象是稳定的，核心区:msd变化很小;在非极性有机溶剂中，CALB的活性位点保持稳定，但是在极性有机溶剂中，有机试剂分子进入到活性位点中，并与活性位点产生强烈作用，这种相互作用破坏了ser105和His224之间的氢键。
4 展望生物催化是一个由有机化学、生物化学和微生物学等多学科交叉的研究领域。
近几年来，化学家利用商品化脂肪酶进行了大量药物中间体手性拆分等研究。
脂肪酶在应用中仍需要克服几个瓶颈：酶成本高、活性低、稳定性低和低反应产率。
为了进一步提高脂肪酶在工业领域中的应用，筛选和开发出具有新型催化活性和高稳定性的微生物脂肪酶将成为脂肪酶研究的热点和重点，相信计算机技术在此领域的应用也会越来越广泛。
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