丹参单体对肿瘤坏死因子损伤的血管平滑肌细胞炎症介质IL_1_表达的影响
丹参单体对TNF_诱导大鼠动脉平滑肌细胞NF_B和ICAM_1的影响
・科技之窗・丹参单体对T NF 2α诱导大鼠动脉平滑肌细胞NF 2κB 和I C A M 21的影响3范英昌1 姜希娟1 赵桂峰2 卢 斌3 杨 琳3 范英昌,男,硕士,教授,博士生导师3天津市自然科学基金资助项目(No .043111211)(1天津中医药大学病理教研室 天津300193;2天津中医药大学第一附属医院;3天津中医药大学实验教学部)摘要:目的 观察丹酚酸B 和丹参酮ⅡA 对肿瘤坏死因子(T NF 2α)诱导的血管平滑肌细胞(VS MC )核因子κB (NF 2κB )和细胞间黏附分子(I CAM 21)表达的影响,探讨丹参单体抗动脉粥样硬化(AS )的作用机制。
方法 体外培养大鼠主动脉VS MC;RT 2PCR 法和免疫细胞化学法检测VS MCI CAM 21mRNA 和I CAM 21蛋白的表达;细胞EL I S A 和免疫细胞化学法检测NF 2κB 的表达。
结果 T NF 2α上调VS MC I CAM 21mRNA 和I CAM 21蛋白的表达,提高NF 2κB 水平(P <0.01)。
两种丹参单体都抑制上述因子的表达,以丹酚酸B 效果更佳。
结论 丹参单体抗AS 的机制之一是抑制炎症相关因子的表达,丹酚酸B 抗炎效果优于丹参酮ⅡA 。
关键词:肿瘤坏死因子;细胞间黏附分子21;核因子κB;丹酚酸B;丹参酮ⅡA 中图分类号:R285.5I nfluence of s a lv i a m ilti orrh i za m ono m er on expressi on s of NF 2κB and I CAM 21i n ra t VS M C i n duced by TNF 2αF AN Ying 2chang 1,J I A NG Xi 2juan 1,ZHAO Gui 2feng 2,et al .(1Depart m ent of Pathol ogy,Tianjin University of Chinese Medicine,Tianjin 300193;2The First Affiliated Hos p ital of Tianjin University of Chinese Medicine )Abstract:O bjecti ve T o observe the influence of salvianolic acid B and tanshinone ⅡA on theexp ressi ons of nuclear fact or kappa B (NF 2κB )and intercellular adhesi on molecule 21(I CAM 21)in cultured vascular s mooth muscle cells (VS MC )induced by tumor necr osis fact or 2α(T NF 2α),and t o investigate the molecular mechanis m of salvia m ilti orrhiza monomer against ather oscler osis (AS ).M ethods The rat VS MC were cultured in vitr o,the mRNA and p r otein exp ressi on of I CAM 21were observed by RT 2PCR and i m munocyt oche m istry technique res pectively .The NF 2κB exp ressi on wasdetected by both of i m munocyt oche m istry technique and cell E L I S A.Results The mRNA and p r oteinexp ressi on of I CAM 21were up 2regulated and NF 2κB exp ressi on was als o significantly increased by T NF 2α(P <0.01).T wo kinds of salvia m ilti orrhiza monomer markedly inhibited the exp ressi ons of NF 2κB and I CAM 21.Salvianolic acid B had a better effect than tanshinone ⅡA.Conclusi on One of the molecular mechanis m s of salvia m ilti orrhiza monomer against AS is that it can inhibit the exp ressi ons of infla mmati on 2related fact ors in VS MC .Salvianolic Acid B has a better effect in anti 2infla mmati on than tanshinone ⅡA.Key words:tu mor necr osis fact or 2α;intercellular adhesi on molecule 21;nuclear fact or kappa B;salvianolic acid B;tanshinone ⅡA 丹参为唇形科植物丹参的根,是临床常用抗动脉粥样硬化(AS )药物,但是丹参成分复杂,不同成分抗AS 的机制并未完全阐明。
丹参对重型颅脑损伤患者血清中可溶性细胞间粘附分子-1-IL-10表达的影响
丹参对重型颅脑损伤患者血清中可溶性细胞间粘附分子-1\IL-10表达的影响【摘要】目的探讨早期应用丹参对重型颅脑损伤患者血清中可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)、IL-10表达的影响。
方法21例重型颅脑外伤患者(GCS 评分≤8分)随机分为丹参组11例和对照组10例。
通过双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA法)检测患者伤后第1、3、5、7天血清中sICAM-1、IL-10的表达情况。
结果丹参组第3、5、7天血清中的sICAM-1含量均明显低于对照组相应时间点(P＜0.01),IL-10则高于对照组。
结论丹参能减少重型颅脑损伤患者血清中sICAM-1的表达,促进IL-10的表达,有助于减轻颅脑外伤所致的脑损害。
【Abstract】Objective To explore the early application of Salvia on serum soluble intercellular adhesion molecule-1(sICAM-1),IL-10 expression in patients with severe traumatic brain injury.Methods 21 cases of severe brain trauma patients(GCS score ≤ 8 points)were randomly divided into 11 cases of Salvia group and the control group 10 cases.Serum sICAM-1,IL-10 were detected by double-antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)on 1,3,5,7 d after injury.Results Serum sICAM-1 levels in Salvia Group were significantly lower than those of the control group 3,5,7 d in the corresponding time points(P＜0.01).On the other hand,IL-10 were higher than that in control group.Conclusion Salvia can reduce the serum of sICAM-1 and promote the expression of IL-10 in patients with severe traumatic brain injury,which can help to reduce the brain damage after traumatic brain injury.【Key words】Traumatic brain injury ; Salvia; Soluble intercellular adhesion molecule-1;IL-10重症颅脑外伤的发生率越来越高,死亡率、致残率也居高不下。
丹参酮保护心血管疾病的作用机制进展
丹参酮保护心血管疾病的作用机制进展丹参酮是丹参根中的一种脂溶性化合物，它作为中药中活血化瘀的代表药物，目前已在临床中有广泛的应用。
随着心脑血管疾病发生率的不断增多，近年来关于丹参酮在心血管保护中的作用也逐渐被人们所认知。
研究发现丹参酮在扩张血管，保护血管内皮细胞，抗氧化，抗纤维化及抗心律失常等方面均发挥着极其重要的作用。
为了进一步提高对丹参酮的认识，本研究主要综述了丹参酮在心血管保护作用方面的机制进展，为心血管疾病的治疗提供新的中药治疗理论。
标签：丹参酮；心血管；机制进展丹参是唇型科植物丹参（Salvia miltiorrhiza Bge）的干燥根和根茎，味苦，性微寒。
归心、肝经。
有祛瘀止痛，活血通经，清心除烦之功效。
用于月经不调，经闭痛经，症瘕积聚，胸腹刺痛，热痹疼痛，疮疡肿痛，心烦不眠；肝脾肿大，心绞痛[1-3]。
丹参酮亦称总丹参酮。
是从中药丹参（唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bunge根）中提取的具有抑菌作用的脂溶性菲醌化合物，从中分得丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA、丹参酮ⅡB、隐丹参酮、异隐丹参酮等10余个丹参酮单体，经临床试用证明其治疗心绞痛效果显著，副作用小，为一治疗冠心病的新药。
现将丹参酮心血管药理作用进行综述，为进一步治疗心血管疾病及丹参药材的开发提供参考。
1 抗动脉粥样硬化的作用有学者通过原位杂交技术对丹参酮在血管平滑肌细胞相关的增殖基因c-myc表达中的作用进行了探讨，由于巨噬细胞源性生长因子在平滑肌细胞c-myc中出现明显的高表达，且伴有平滑肌细胞的明显增殖，而丹参酮恰恰可以抑制这种高表达现象，使c-myc表达呈现低水平状态，平滑肌细胞增殖也受到不同程度的抑制作用[4]。
从此研究中可以推断，丹参酮对于动脉粥样硬化患者的作用可能是通过阻止血管平滑肌细胞的增殖而发挥出来的。
另有报道指出，脂质代谢的异常变化也是动脉粥样硬化发生的一个重要原因，当血浆中TC、TG、LDL-C升高，HDL-C降低时，血管内皮细胞受到损害，可导致动脉粥样硬化的发生，其中LDL-C的升高可以损伤血管内膜，促进血小板聚集，HDL-C的降低能够促进胆固醇逆转运，降低胆固醇在外周组织的沉积[5-7]。
可诱生干扰素的中药的研究应用
中药复方制剂的二次开发是当前中药现代化发展的一个主流，人们已经认识到选择多种具有不同药理作用的中草药组成中药复方制剂，可以获得药效互补、疗效增强，且各药的单剂量与不良作用减少的优点，在实际使用上更具有优势。
1．南京农业大学胡元亮等为了研究复方蜂胶黄酮——淫羊藿多糖（PF-EPS）和人参皂苷——黄芪多糖（GS-APS）其作为新型免疫增强剂，对鸡外周血T淋巴细胞中γ-干扰素、 mRNA表达的影响 ，阐明2个复方中药成分增强免疫的机理，利用Primer Premier软件设计了一对γ-干扰素引物。采用RT-PCR技术，从刀豆蛋白A刺激的鸡外周血淋巴细胞总RNA中扩增出片段约为510bp的γ-干扰素基因片段，并对其进行了酶切鉴定和测序。采用半定量RT-PCR法测定了复方中药成分对鸡外周血淋巴细胞中γ-干扰素mRNA表达的影响。结果表明，方1和方2的3个剂量均能提高淋巴细胞中γ-干扰素 mRNA的表达，其中以方1中剂量最好。提示复方中药成分能促进γ-干扰素mRNA的表达，可能是其增强免疫的机理之一。
病毒性疾病的发生日益严重，而中药的抗病毒效果，逐渐被人们所接受。经进一步研究发现，中药防制病毒性疾病的一个主要作用，是通过诱导机体产生干扰素来发挥作用的。
多年来，中药免疫药理学在中西医结合思想的指导下，积极吸取现代免疫药理学知识，取得了较大的进展。愈来愈多的研究证实，许多中药，尤其是补虚类中药的活性成分以多糖形式存在。多糖是三类最基本的生命物质(糖、蛋白质和核酸)和结构物质之一，在生命活动中可能具有重要的意义。近年来包括人参多糖、党参多糖、枸杞多糖、黄芪多糖、刺五加多糖、淫羊藿多糖、女贞子多糖、地黄多糖以及灵芝多糖等在内的数十种补虚药多糖成分被全面地、深入地进行了研究，阐明了其对免疫系统的促进或者调节作用及其部分作用机制。研究证明，这些补虚药多糖成分分别或同时具有激活或调节T淋巴细胞、巨噬细胞、白细胞介素、抗体水平以增强或调节免疫功能，具有抗肿瘤、抗感染、抗病毒、诱导干扰素产生的作用。以后又陆续发现清热解毒类中药、祛风解表类中药之中的一些药物可以提高免疫力，从而提高了其抗病毒的作用，本文重点介绍可诱导产生干扰素的中药，以供同行参考，希望能在新药研究和应用中对大家有所帮助。
丹参的化学成分及药理作用研究进展
2021年第1期广东化工第48卷总第435期 · 57 · 丹参的化学成分及药理作用研究进展赵全如1，谢晓燕2(1．南京协创医药科技有限公司研发部，江苏南京210000；2．南京泽恒医药技术开发有限公司研发部，江苏南京210000) [摘要]丹参具有活血化瘀功效，是临床常用的一种中药。
丹参的活性成分主要为丹参酮类和酚酸类化合物。
丹参药理活性广泛，临床主要用于治疗心脑血管疾病。
现代药理研究发现丹参还具有保护脏器、抗纤维化、抗菌抗炎、抗肿瘤及免疫调节等作用。
本文主要对丹参化学成分及药理作用进行了综述，为今后进一步研究和应用提供参考。
[关键词]丹参；化学成分；药理作用[中图分类号]TQ [文献标识码]A [文章编号]1007-1865(2021)01-0057-03Research Progress of Phytochemistry, Pharmacological Action of SalviaMiltiorrhizaZhao Quanru1, Xie Xiaoyan2(1. R & D Department Nanjing Xiechuang Pharmaceutical Technology Co., Nanjing 210000；2. R & D Department Nanjing Zeheng Pharmaceutical Technology Development Co., Nanjing 210000, China)Abstract: Salvia miltiorrhiza is a kind of Chinese traditional medicines for activating blood and removing stasis. The chemical composition of Salvia miltiorrhiza is mainly tanshinon and phenolic acid. It has a wide range of pharmacological effects and is mainly used for the treatment of various cardiovascular and Cerebrovascular diseases. Modern research also found that Salvia miltiorrhiza has the effects of organs protection, anti-fibrosis, anti-bacterial, anti-inflammatory, anti-tumo and immunoregulation,etc. In this review, the chemical composition and pharmacological mechanism of Salvia miltiorrhiza were summarized to provide references for the further development and application of Salvia miltiorrhiza.Keywords: Salvia miltiorrhiza；phytochemistry；pharmacological action丹参为唇形科鼠尾草属植物丹参Salvia Miltiorrhiza Bunge 的干燥根及根茎，性微寒、味苦。
_丹参的化学成分及药理作用概况_丹参的化学成分及药理作用概况
脂溶性的丹参酮，水溶性丹参素不但能抑止细胞内源性胆固 醇的合成、清除 O2 减少 H2 O2 的产生、阻断羟自由基产生、 防止脂蛋白氧化，而且有活血通脉、祛瘀养血、清除氧自由 基、疏通微循环、抗凝、抗血栓的作用［12］。 2. 1. 2 对心肌的保护作用
丹参是一种氧自由基清除剂，可抑制再灌注时心肌细 胞膜的脂质过氧化反应，从而减少心肌细胞膜的脂质过氧 化反应，减轻心肌细胞膜损伤，阻止 Ca2 + 内流，这是丹参 保缺血心肌，减少异常电活动和心律失常的重要基础。丹 参水溶性成分能预防因结扎冠状动脉引起的急性心肌缺血， 可以使左室心肌缺血面积显 著 缩 小 。宋 延 平 等［13］ 观 察 丹 酚 酸 A 与丹酚酸 B 对大鼠心肌缺血的作用，结果显示丹酚酸 A 的改善大鼠心肌缺血作用明显强于丹酚酸 B。有人也对 复方进行了研究，赵雅君［14］ 等用 Langenorff 大鼠离体心脏 模型，研究了复方丹参滴丸对心脏的保护作用。结果显示， 无论在缺血前预灌注时及缺血后再灌注时给与，均能通过 提高心肌组织中高能磷酸化合物的含量，保护心肌细胞超 微结构来保护心肌。 2. 1. 3 防治心肌梗死
治疗 消 化 性 溃 疡： 用 复 方 丹 参 注 射 液 16mL + 5% ～ 10% 葡萄糖盐水液 250mL 上午滴注，1 天 1 次，晚睡前加 服复方丹参注射液 4mL，3 周后改为口服 （ 早晚各 4mL） ， 连用 4 周 1 疗程，治疗 30 例，治愈率 86. 7% 。 2. 2. 2 对肝脏的影响
体内实验证实，许多类型的胃、十二指肠溃疡与活性 氧有关，活性氧作为一种重要的毒害因素直接或间接损伤 胃粘膜细胞。抗氧化剂对这类胃、十二指肠溃疡有一定保 护作用。体内外实验均表明，丹参酚酸 A、B、丹参素、迷 迭香宁酸等对生物膜过氧化均有明显的保护作用，尤以丹 酚酸 A 的抗氧化活性最强。丹参可通过改善胃黏膜供血、
中药治疗心肌缺血机制的进展
8 抑制细胞凋亡 细胞凋亡是细胞在正常生理或病理状态下发生的一种自
发的、程序化的死亡过程，以细胞皱缩、细胞膜完整并发泡、染 色质固缩、凋亡小 体 形 成 而 细 胞 器 完 整 等 为 主 要 特 征。 近 年 来，有大量的研究资料表明在急性心肌缺血和再灌注损伤中有 大量的心肌细胞经历了凋亡过程〔22〕。心肌缺血可引起缺血区 及缺血边缘区心肌细胞死亡，随后可发展为心肌梗死，进一步 加剧心肌细胞死亡，最终可导致心衰发生〔23〕。
刘芬等〔7〕利用犬左冠状动脉前降支缺血急性心肌缺血模 型，观察了赤芍总甙对急性心肌梗死犬血清游离脂肪酸和抗氧 化酶活性和影响。结果表明，赤芍总苷能够提高超氧化物歧化 酶（ SOD） 及谷胱甘肽过氧化物酶活性，降低 FFA 的含量。说明 赤芍总甙提高心肌供血、对抗脂质过氧化反应，与其抑制血清 SOD 含量的升高，降低过氧化脂质，增加血清 SOD、谷胱甘肽过 氧化物的活性等机制有关。能量代谢障碍和自由基损伤是互 为因果的两大因素，能量代谢障碍是自由基产生的基础，自由 基可加重能量代谢障碍。而线粒体是心肌能量代谢的主要细 胞器，也是自 由 基 产 生 的 重 要 场 所，因 此，也 要 注 意 保 护 线 粒 体，进而调节能量代谢。
1 改善血液流变学 血液流变学包括了对血液的流动性、黏滞性、变形性等多
方面，是衡量血液内摩擦或流动阻力的指标，受诸多因素的影 响。血液黏度增高，会引起血流阻力增加，使血液流速减慢，最 后导致血液停滞，直接影响冠脉供血，诱发或加重心肌缺血〔1〕。 王素琴等〔2〕采用川芎嗪治疗数名无症状心肌缺血患者，观察应 用川芎嗪对患者治疗前后的血液流变学影响及临床疗效。结 果表明，川芎嗪能抑制血小板聚集和扩张冠状血管，抑制心肌 再灌注时乳酸酰氢酶及血栓烷素2 （ TXA2 ） 的释放，促进心肌合 成前列环素（ PGI2 ） ，使 TXA2 / PGI2 的比值降低，故有抗心肌缺 血作用。任燕等〔3〕以三七吴茱萸流浸膏处理大鼠寒瘀型心肌 缺血模型，观察三七吴茱萸流浸膏对大鼠心肌缺血 （ 寒瘀凝滞 型） 的影响。结果表明，三七吴茱萸流浸膏能通过改善血黏度、 红细胞聚集指数等血液流变学指标，而改善微循环，从而达到 治疗心肌缺血的目的。
丹参和生脉注射液对全身炎症反应综合症患者血清肿瘤坏死因子α及白介质素的影响
采 用 Ｓ Ｓ ７ ０软 件 进 行 统 计 学 处 理 。 计 量 资 料 采 用 Ｐ Ｓ１ ． 均 数 ±标 准差 （ ｓ 表 示 ， 数 资 料 采 用 百 分 数 （ ） 示 ， 土 ） 计 表 两 组 患 者 资料 之 间 比 较 采 用 检 验 或 ｔ 验 ， 检 Ｐ＜ ０ ０ ． ５为 差 异 有 统 计 学 意义 。
将 ２０ ０ ８年 １月 至 ２ １ ０ ０年 １ ２月 间 我 院 收 治 的 ５ ６例 腹
１ ３ 统 Biblioteka 学 方 法 ．腔 感 染 所 致 的 ＳＲ 患 者 纳 入 本 研 究 。 男 性 ３ ＩＳ ３例 ， 性 女
２ ３例 ； 龄 ２ ～ ２ 年 ２ ３岁 ， 均 年 龄 （ ２ ５ １ ． 平 ４ ． ± ２ ７岁 ） 。参 照 １９ ９ １年 美 国胸 科 医 师 学 会 及 危 重 病 学 会 联 席 会 制 定 的 标 准 ］ 机 体 在 受 到严 重 损 伤 后 如 出现 以下 ２项 或 者 ２项 以 上 ，
（ Ｆ ａ 及 白介 素 （Ｌ 的 影 响 。方 法 回顾 分 析 临 床 确诊 为 腹 腔 感 染 所 致 Ｓ Ｒ ＴＮ － ） Ｉ） Ｉ Ｓ的 ５ 例 患 者 的 临 床 资 料 ， 其 随 ６ 将 机 分 为 对 照 组 及 观 察 组 ， 察 两 组 患 者 治 疗 后 ｌ３ ５ｄ体 温 以及 白 细胞 计 数 ； 疗 后 ３ ５ｄ血 清 Ｔ 、Ｌ １ Ｉ 一 、 观 、 、 治 、 ＮＦ ｄ Ｉ 一 、Ｉ ６
２ 结 果
（） ＞ ２ ３ Ｒ ０次 ／ ｎ 或 Ｐ Ｃ ｚ ４ ３ｋ ａ （ ） ｃ １ Ｘ１ Ｌ， ｍｉ ， ａ Ｏ ＜ ． Ｐ ； ４ ｗＢ ＞ ２ ０ ／
丹参等活血化瘀中药对IL-1β刺激HSC影响
作者:赵霞
学位授予单位:河北医科大学
1.王成宝四逆散加味对免疫性肝纤维化大鼠肝组织TGF-β<,1>和IL-1的影响[学位论文]2006
5.姚欣'益肝浓缩煎剂'等活血化淤药抗大鼠肝纤维化作用实验研究[学位论文]2001
6.江涛.郭顺根.蒙一纯.Jiang Tao.Guo Shungen.Meng Yichun活血化瘀方对大鼠肝星形细胞活化的影响[期刊论文]-北京中医药大学学报2001,24(3)
7.赵素平ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ郑玉活血化瘀法在治疗肝纤维化中的作用[期刊论文]-河南中医2004,24(10)
8.赵霞.姚希贤.张亚平丹参等活血化瘀中药抑制IL-1β刺激的HSC增殖及TIMP-1表达的研究 [会议论文]-2005
9.邓存良.黄捷.陈文.王明勇.陈枫IL-1受体拮抗剂对大鼠肝星状细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原及基质金属蛋白酶组织抑制因子-1 mRNA表达的影响[会议论文]-2008
引用本文格式:赵霞丹参等活血化瘀中药对IL-1β刺激的HSC的影响[学位论文]硕士 2006
2.安铁军.张学凤中药活血化瘀疗法抗肝纤维化的临床观察[期刊论文]-现代医药卫生2005,21(8)
3.王振常.夏兰.张荣臻活血化瘀类中药治疗肝纤维化的研究进展[期刊论文]-中国当代医药2009,16(24)
4.张志安.石淑仙.黄元成活血化瘀类中药对实验性血吸虫肝纤维化兔肝组织金属蛋白酶-1及其抑制因子-lmRNA表达的影响[期刊论文]-中西医结合肝病杂志2001,11(6)
丹参提取物单体对肿瘤坏死因子诱导内皮细胞组织因子表达的干预作用
丹参提取物单体对肿瘤坏死因子诱导内皮细胞组织因子表达的干预作用孙瑛;高咏梅;朱广瑾【期刊名称】《基础医学与临床》【年(卷),期】2003(023)006【摘要】研究丹参提取物单体(764-3)对肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)诱导人血管内皮细胞(human vascular endothelial cell,HUVEC)组织因子(tissue factor,TF)基因表达的干预作用,及其对单个内皮细胞胞内游离钙([Ca2+]i)水平的影响,以探讨764-3对心血管血栓栓塞性疾病防治的可能机制.进行人脐静脉原代内皮细胞、ECV304细胞株的培养.采用限制性内切酶法,构建含有人TF基因不同上游调控序列的荧光素酶报告基因质粒,经脂质体法转染内皮细胞,用TNF-α及764-3处理内皮细胞,测定细胞裂解物荧光素酶及β半乳糖苷酶活性.以Fluo3/AM 为荧光指示剂,用激光扫描共聚焦显像系统观测[Ca2+]i的改变.结果发现在TF基因上游序列-244/+121bp存在下,TNFα可使转染内皮细胞荧光素酶表达量比对照组明显增加,764-3使这种增加有所降低.而-111/+121bp存在时,TNF-α组与对照组荧光素酶表达量无明显差异,均比-244/+121bp存在时明显降低,此时,764-3并未引起荧光素酶表达量明显改变.激光扫描共聚焦显像显示,TNF-α可引起人内皮细胞[Ca2+]i持续缓慢升高,加入7643后[Ca2+]i迅速大幅度降低,逐渐恢复到基线水平.提示764-3可抑制TNF-α诱导的人内皮细胞TF基因表达增强,这种作用依赖于该基因上游序列-244/+121bp的存在,推测胞内游离钙离子可能参与此抑制作用.【总页数】5页(P634-638)【作者】孙瑛;高咏梅;朱广瑾【作者单位】中国医学科学院,中国协和医科大学,基础医学研究所,北京,100005;中国医学科学院,中国协和医科大学,基础医学研究所,北京,100005;中国医学科学院,中国协和医科大学,基础医学研究所,北京,100005【正文语种】中文【中图分类】R543.5【相关文献】1.肉桂酸对肿瘤坏死因子诱导血管内皮细胞组织因子表达的作用及其机制 [J], 李小飞;文志斌;何晓凡;贺石林2.染料木黄酮对高同型半胱氨酸诱导的人血管内皮细胞组织因子表达的干预作用[J], 曹文东;杨涛;皮兴涛;续慧民;张建陶;闫盛;郝斌3.丹参多酚酸盐对高同型半胱氨酸诱导的人脐静脉内皮细胞组织因子表达的干预作用 [J], 王琳;李正飞;舒小军;王文辉4.丹参提取物单体对肿瘤坏死因子诱导内皮细胞组织因子表达的干预作用 [J], 孙瑛;朱自强;高咏梅;朱广瑾5.丹参提取物单体对肿瘤坏死因子诱导内皮细胞组织因子表达的干预作用(英文) [J], 孙瑛;朱自强;高咏梅;朱广瑾因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
丹参素对IL-1β刺激的大鼠肝星状细胞JNK信号转导的影响的开题报告
丹参素对IL-1β刺激的大鼠肝星状细胞JNK信号转导的影
响的开题报告
研究背景：
肝星状细胞是肝脏内的重要细胞类型，具有免疫调节和炎症反应调节的功能。
IL-1β是一种典型的炎症因子，能够激活JNK信号通路，引发细胞炎症反应。
丹参素是从丹参中提取出的一种化合物，具有抗炎、抗氧化等多种生物活性，已被广泛应用于肝病、心脑血管疾病等领域。
本研究旨在探究丹参素对IL-1β刺激的大鼠肝星状细胞JNK信号转导的影响。
研究内容：
选取健康的大鼠肝星状细胞，以IL-1β刺激细胞后，用Western blot法检测JNK 信号通路相关蛋白的表达水平，包括p-JNK、JNK、c-Jun、c-Fos等。
同时，用MTT 法检测丹参素在不同浓度下的细胞毒性。
在此基础上，选取不同浓度的丹参素预处理细胞，观察其对JNK信号传导的影响。
最后，利用药理学方法对丹参素的作用机制进行探讨。
预期结果：
预计通过本次实验可以得出以下结论：在IL-1β刺激的大鼠肝星状细胞中，丹参素可以抑制JNK信号通路的激活，减轻炎症反应的发生。
此外，我们还将研究丹参素对其他信号通路的影响，以更全面地探究丹参素的作用机制。
本研究有望为丹参素的临床应用提供理论基础和科学依据，为临床肝病的治疗提供新思路和新方法。
丹参及丹参素对内毒素刺激下肝巨噬细胞分泌细胞因子影响的动态观察_许锋
丹参及丹参素对内毒素刺激下肝巨噬细胞分泌细胞因⼦影响的动态观察_许锋丹参及丹参素对内毒素刺激下肝巨噬细胞分泌细胞因⼦影响的动态观察许 锋 陆伯刚 姚 智 鲁焕章 吴咸中摘要 采⽤⼤⿏肝巨噬细胞(KC)分离与培养技术,动态观察丹参及其有效成分丹参素对内毒素(L PS)刺激下KC分泌⽩细胞介素1(I L1)、⽩细胞介毒6(IL6)和肿瘤坏死因⼦(T N F)的影响。
为探讨中药的作⽤机制并对KC分泌的粒细胞巨噬细胞集落刺激因⼦(GM CSF)和前列腺素E2 (PGE2)进⾏了测定。
结果表明:L P S具有明显的刺激KC活化作⽤,在⼀定L PS浓度范围内,K C分泌的细胞因⼦与L PS刺激浓度呈平⾏关系。
IL6升⾼最早,活性最强。
丹参和丹参素对L PS刺激下KC 分泌的多种细胞因⼦有明显的抑制作⽤,这种抑制作⽤呈剂量依赖性。
其抑制机制包括促进活化的KC 分泌免疫抑制物质PG E2和抑制GM CSF的分泌。
关键词 丹参 丹参素 内毒素 肝巨噬细胞 细胞因⼦在内毒素⾎症时,巨噬细胞(M P)的持续、过度激活,导致M P分泌⼤量的细胞因⼦,如肿瘤坏死因⼦(TN F)、⽩细胞介素1(IL1)和⽩细胞介素6(IL6),是造成机体过度炎性反应、局部组织细胞和全⾝性损伤的重要原因。
抑制巨噬细胞过度活化,减少细胞因⼦过度分泌,可以保护脏器功能、降低死亡率〔1,2〕。
肝脏巨噬细胞(Kupffer cell,KC)占全⾝M P的80%,同时⼜处于防御肠源性细菌和内毒素的第⼀线,因此探讨内毒素(LPS)刺激KC的活化和调节机制具有特别重要的意义。
丹参是常⽤的活⾎化瘀中药。
本研究旨在探讨丹参及其有效成分丹参素是否具有抑制内毒素刺激巨噬细胞活化作⽤及其可能的机制。
报告如下。
1 材料和⽅法1.1 实验动物:健康雄性Wistar⼤⿏,体重150～160g,由军事医学科学院实验动物中⼼提供。
1.2 细胞株:Wehi164.13(检测TN F)、LBRM33Ⅰa5、HT2(检测IL1)、KD83 (检测IL6),由北京医科⼤学陈慰峰教授惠赠。
血清TNF-α、IL-1β、Hcy水平变化与急性脑卒中患者NIHSS评分的关联性分析
血清TNF-α、IL-1β、Hcy水平变化与急性脑卒中患者NIHSS评分的关联性分析高翠玲【摘要】目的:探讨血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、同型半胱氨酸(Hcy)水平变化与急性脑卒中患者神经功能缺损(NIHSS)评分的关联性.方法:选取我院2015年11月—2017年11月收治的急性脑卒中患者63例设为研究组(0～15分者24例、16～30分者22例,≥31分者17例),另选取同期于我院进行健康体检者63例设为对照组.入院后第2天抽取各组血液样本,以酶联免疫吸附法测定血清IL-1β、TNF-α、Hcy水平.统计两组及研究组不同NIHSS分值患者间血清IL-1β、TNF-α、Hcy水平,并统计分析血清IL-1β、TNF-α、Hcy水平与NIHSS分值的关联性.结果:研究组血清IL-1β、TNF-α、Hcy水平高于对照组(P<0.05);不同NIHSS分值患者间血清IL-1β、TNF-α、Hcy水平存在明显差异(P<0.05),且随着NIHSS分值增高,血清IL-1β、TNF-α、Hcy水平呈增高趋势;Person检验证实,血清IL-1β(r=0.610)、TNF-α(r=0.606)、Hcy(r=0.371)水平与NIHSS分值存在明显正相关关系(P<0.05).结论:急性脑卒中患者血清IL-1β、TNF-α、Hcy水平异常增高,且随着NIHSS分值增高,各指标血清含量呈增高趋势,两者间具有明显正相关关系,临床可通过联合测定上述指标水平对急性脑卒中患者神经功能缺损程度予以评估,可为临床制定、调整治疗方案提供一定参考依据.【期刊名称】《医学理论与实践》【年(卷),期】2019(032)001【总页数】2页(P111-112)【关键词】IL-1β;TNF-α;Hcy;急性脑卒中;NIHSS评分【作者】高翠玲【作者单位】永煤集团总医院检验科,河南省永城市 476600【正文语种】中文【中图分类】R743.3;R446.11急性脑卒中为临床多发脑血管病变，具有较高致残率及病死率，及早评估神经功能缺损程度对临床制定有针对性干预方案、改善患者临床疗效及预后均具有积极意义[1]。
丹参单体对肿瘤坏死因子损伤的血管平滑肌细胞炎症介质IL-1β表达的影响
丹参单体对肿瘤坏死因子损伤的血管平滑肌细胞炎症介质IL-1β表达的影响聂桂丽;郭茂娟;李燕平;范英昌【期刊名称】《中国老年学杂志》【年(卷),期】2007(27)9【摘要】目的探讨丹参主要单体成分丹酚酸B和丹参酮ⅡA在动脉粥样硬化(AS)发病过程中发挥作用的物质基础和作用靶点.方法通过体外培养大鼠主动脉平滑肌细胞,建立肿瘤坏死因子(TNF-α)损伤的细胞模型,并运用放射免疫方法,检测上清液中IL-1 β的表达.结果高剂量丹参酮ⅡA对IL-1 β表达抑制作用最强(P＜0.01),其余中药组抑制作用次之(P＜0.05).结论丹酚酸B和丹参酮ⅡA均可以通过抑制AS 时炎症介质的表达达到防治AS的目的.【总页数】2页(P823-824)【作者】聂桂丽;郭茂娟;李燕平;范英昌【作者单位】天津医学高等专科学校,天津,300222;天津医学高等专科学校,天津,300222;天津医学高等专科学校,天津,300222;天津医学高等专科学校,天津,300222【正文语种】中文【中图分类】R541.4;R96【相关文献】1.丹参和生脉注射液对全身炎症反应综合症患者血清肿瘤坏死因子α及白介质素的影响 [J], 黄海球;熊进文;黄勇平2.复方丹参凝胶对感染创面炎症介质及其基因表达的影响 [J], 郭颂铭;华斌;柏连松3.丹参酮Ⅱ A对大鼠心肌缺血再灌注损伤中HMGB1、IL-1β表达及SOD水平的影响 [J], 丁华胜; 王永剑; 黄忠毅4.地塞米松对急性肺损伤大鼠炎症介质/抗炎介质表达的影响 [J], 李洪霞;张进川;赵亚力;郝好杰5.丹参酮ⅡA对TNF-α损伤平滑肌细胞MCP-1、IL-1β表达的影响 [J], 周桂桐;孙连胜;赵桂峰;范英昌因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
丹参对血小板源生长因子刺激血管平滑肌细胞增生的影响
丹参对血小板源生长因子刺激血管平滑肌细胞增生的影响马小干;时德【期刊名称】《中国普通外科杂志》【年(卷),期】2002(11)8【摘要】目的研究丹参对血小板源生长因子(PDGF)刺激血管平滑肌细胞(SMC)增生的影响。
方法体外培养大鼠动脉SMC,设对照组、丹参组(3个浓度组:2.0mg/ml,0.4mg/ml,0.08mg/ml)、PDGF组(10ng/ml)及PDGF(10ng/ml)加丹参(3个浓度,同上)组,测定各组SMC数量及3H TdR掺入量。
结果PDGF可刺激SMC数量及3H TdR掺入明显增加,分别为基础状态的3倍和2.5倍;丹参呈剂量依赖性地抑制基础状态及PDGF刺激下SMC数量及3H TdR掺入的增加。
结论丹参可抑制基础状态及PDGF作用下血管SMC的增生。
【总页数】3页(P488-490)【关键词】丹参;药理学;血小板源生长因子;血管平滑肌细胞;中药;药理【作者】马小干;时德【作者单位】第三军医大学新桥医院普通外科;重庆医科大学临床学院普通外科【正文语种】中文【中图分类】R282.710.5【相关文献】1.黏着斑激酶对血小板源性生长因子刺激的血管平滑肌细胞迁移和黏附的调控 [J], 武衡;钟杨;汤显靖;成志2.血小板源生生长因子刺激血管平滑肌细胞增殖及其分子机制 [J], 李江;黄韶玲;郭兆贵3.p27和p57蛋白在血小板源生长因子BB刺激下血管平滑肌细胞增殖过程中的表达 [J], 汪明慧;解旭东;许顶立;李春雨;袁勇;刘煜;赖文言;高燕4.血小板源性生长因子和血小板源性内皮细胞生长因子在内皮细胞和血管平滑肌细胞中的作用研究 [J], 朱晋坤;毛华;尹扬光;董文;杜峰;鲁玉明;熊宗华;邓梦扬5.血小板源生长因子β受体反义寡核苷酸对血小板源生长因子诱导大鼠血管平滑肌细胞迁移的影响 [J], 顾春虎;侯英萍;李焰;乔宏庆因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
丹参提取物单体对肿瘤坏死因子诱导内皮细胞组织因子表达的干预作用(英文)
丹参提取物单体对肿瘤坏死因子诱导内皮细胞组织因子表达的干预作用(英文)孙瑛;朱自强;高咏梅;朱广瑾【期刊名称】《中国临床康复》【年(卷),期】2005(9)6【摘要】背景:目前认为肿瘤坏死因子-α(TNF-α)可诱导人内皮细胞(HUVECs)组织因子基因的表达,而丹参提取物单体(764-3)对其干预作用如何?其机制有待于进一步探讨。
目的:研究764-3对TNF-α诱导HUVECs组织因子基因表达的干预作用,及单个内皮细胞内游离钙(犤Ca2+犦i)水平的影响,以探讨764-3对防止心血管血栓栓塞性疾病的可能机制。
设计:随机对照的实验研究。
单位:协和医科大学基础医学研究所病理生理学系的实验室。
材料:实验于1998-05/1999-09在中国医学科学院,中国协和医科大学基础医学研究所病理生理学系实验室完成。
脐带取自北京妇产医院。
干预:进行体外培养ECV304细胞株和人脐静脉内皮细胞,采用限制性内切酶法构建含有人TF基因不同上游调控序列的荧光素酶报告基因质粒,经脂质体法转染内皮细胞,用TNF-α(100U/mL)及764-3(30mg/L)处理细胞。
主要观察指标:测定细胞裂解物中荧光素酶及β半乳糖苷酶的活性。
以Fluo-3/AM为荧光指示剂,用激光共聚焦显像系统观测犤Ca2+犦i的改变。
结果:在TF基因上游序列-244/+121bp存在下,TNF-α可使转染内皮细胞荧光素酶表达量较对照组明显增加,764-3使这种增加有所降低(P<0.05)。
而-111/+121bp存在时,TNF-α组较对照组荧光素酶表达量无明显差异,均比-244/+121bp存在时明显降低,此时,【总页数】3页(P209-211)【关键词】凝血致活酶;肿瘤坏死因子;钙【作者】孙瑛;朱自强;高咏梅;朱广瑾【作者单位】中国医学科学院,中国协和医科大学基础医学研究所病理生理学系【正文语种】中文【中图分类】R243【相关文献】1.丹参提取物单体对肿瘤坏死因子诱导内皮细胞组织因子表达的干预作用 [J], 孙瑛;高咏梅;朱广瑾2.肉桂酸对肿瘤坏死因子诱导血管内皮细胞组织因子表达的作用及其机制 [J], 李小飞;文志斌;何晓凡;贺石林3.丹参对血管紧张素Ⅱ诱导内皮细胞组织因子基因表达的作用 [J], 祖淑玉;高咏梅;朱广瑾4.丹参多酚酸盐对高同型半胱氨酸诱导的人脐静脉内皮细胞组织因子表达的干预作用 [J], 王琳;李正飞;舒小军;王文辉5.丹参提取物单体对肿瘤坏死因子诱导内皮细胞组织因子表达的干预作用 [J], 孙瑛;朱自强;高咏梅;朱广瑾因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
丹参及细胞因子对成纤维细胞增殖和细胞凋亡的影响
丹参及细胞因子对成纤维细胞增殖和细胞凋亡的影响
叶红军;孙立群
【期刊名称】《中国实验临床免疫学杂志》
【年(卷),期】1997(009)003
【摘要】本文探讨了丹参注射液、人重组白细胞介互２（ＩＬ－２）和重组干扰
素α－２ｂ（ＩＦＮ）对体外培养成纤维细胞增殖的作用。
结果表明ＩＦＮ和ＩＬ－２均可促进成纤维细胞的增殖，发挥丝裂原作用。
丹参则显著抑制细胞增殖活性，使成纤维细胞崩成圆形或块状结构，内含细胞器，线粒体和内质网变性，呈曲型的细胞凋亡改变，提示丹参通过抑制成纤维细胞增殖，促使细胞凋亡，发挥抗纤维化作用。
【总页数】3页(P25-27)
【作者】叶红军;孙立群
【作者单位】白求恩医科大学第二临床学院;白求恩医科大学第二临床学院
【正文语种】中文
【中图分类】R285.5
【相关文献】
1.丹参酮ⅡA对成骨细胞增殖的影响 [J], 叶茂;郑勇;刘艳西;陈明;胡锋;
2.促肝细胞生长素及细胞因子对成纤维细胞增殖的作用 [J], 叶红军;房家智
3.成纤维细胞上清提取物对成纤维细胞增殖迁移的影响 [J], 刘涛;金岩;王新文;黄沙;姜玲;温宁
4.PRK后兔角膜成纤维细胞分泌产生bFGF、TGF-β1及其对成纤维细胞增殖的影
响 [J], 张建华;郑磊;柳林;王康孙;廉井财
5.bFGF对成纤维细胞增殖和胶原及纤维连接蛋白的影响 [J], 武艳;杨岚;张羽飞;袁晓环;初彦辉
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icafolin 作用机理
icafolin 作用机理全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：icafolin是一种神经营养素，被广泛用于改善认知功能和抗老化。
其主要成分是乙酰半胱氨酸，能够通过多种机制发挥作用，帮助维护大脑健康。
下面我们将详细介绍icafolin的作用机理。
icafolin通过提高乙酰胆碱合成和释放来改善认知功能。
乙酰胆碱是一种重要的神经递质，在大脑中参与学习和记忆过程。
乙酰胆碱的水平与认知功能之间存在着密切的关联，而icafolin可以加速乙酰胆碱的合成和释放，从而提高学习和记忆能力。
icafolin具有抗氧化作用。
氧化应激是导致大脑损伤和老化的重要因素之一。
icafolin中的乙酰半胱氨酸可以与自由基结合，从而减少氧化损伤对脑细胞的影响。
通过抗氧化作用，icafolin可以保护大脑细胞免受氧化应激的侵害，延缓大脑老化过程。
icafolin还可以增加脑细胞的代谢活性。
脑细胞代谢活跃程度直接影响细胞的功能和健康。
icafolin中的乙酰半胱氨酸可以加速脑细胞内的代谢反应，提高细胞对营养物质的利用效率，增强脑细胞的功能和稳定性。
icafolin还具有抗炎作用。
炎症是许多神经系统疾病的共同特点，如帕金森病、阿尔茨海默病等。
icafolin中的乙酰半胱氨酸可以减少炎症介质的释放，抑制炎症反应的进展，从而保护大脑免受炎症损害。
icafolin能够调节神经递质水平。
神经递质的平衡是维持大脑功能稳定的关键。
icafolin可以通过调节多种神经递质的合成和释放，使神经传递过程更加顺畅，从而提高认知功能和情绪稳定性。
icafolin通过多种机制发挥作用，包括提高乙酰胆碱水平、抗氧化、增加脑细胞代谢活性、抑制炎症反应和调节神经递质水平等，从而改善认知功能、延缓大脑老化，并保护大脑免受损害。
icafolin是一种有益于大脑健康的神经营养素，可以作为补充剂用于改善认知功能和维护大脑健康。
第二篇示例：icafolin是一种新型的生物活性物质，具有多种生物活性和药理作用。
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丹参单体对肿瘤坏死因子损伤的血管平滑肌细胞炎症介质I L 21β表达的影响聂桂丽 郭茂娟 李燕平 范英昌 (天津医学高等专科学校,天津 300222) 〔摘 要〕 目的 探讨丹参主要单体成分丹酚酸B 和丹参酮II A 在动脉粥样硬化(AS )发病过程中发挥作用的物质基础和作用靶点。
方法 通过体外培养大鼠主动脉平滑肌细胞,建立肿瘤坏死因子(T NF 2α)损伤的细胞模型,并运用放射免疫方法,检测上清液中I L 21β的表达。
结果 高剂量丹参酮II A 对I L 21β表达抑制作用最强(P <0101),其余中药组抑制作用次之(P <0105)。
结论 丹酚酸B 和丹参酮II A 均可以通过抑制AS 时炎症介质的表达达到防治AS 的目的。
〔关键词〕 丹参单体;动脉粥样硬化:平滑肌细胞:肿瘤坏死因子:白介素21〔中图分类号〕 R54114;R96 〔文献标识码〕 A 〔文章编号〕 100529202(2007)0920823202The i n fluence of dan shen root m ono m e on the expressi on of i n fl amma ti on m ed i a tor I L 21βof va scul ar s m ooth m uscle cell i n duced by TNF 2αN I E Gu i 2L i ,GUO M ao 2Juan,L IYan 2P i n g,et a l 1T i a n ji n M ed i ca l H i gh Tra i n i n g School,T i a n ji n 300222,Ch i n a【Abstract 】 O bjecti ve To exp l ore the operative materials and the different target of salvianolic acid B (Sal B )and tanshinone II A (Tan II A )extracted fr om danshen r oot in ather oscler osis .M ethods The aortic s mooth muscle cells were cultured in vitr o t o establish T NF 2αinduced cell model and t o detect I L 21βexp ressi ons by radi oi m munity .Results The high Tan II A gr oup markedly decreased the exp ressi on ofI L 21β(P <0.01),other gr oup s als o had s ome effect (P <0.05).Conclusi on s Both salvianolic acid B and tanshinone II A could p reventand treat ather ogenesis by inhibiting the exp ressi on of I L 21β.【Key words 】 Danshen r oot monome;A ther oscler osis;Vascular s mooth musle cell;T NF 2α;I nterleukin 21β基金项目:天津市自然科学基金项目(023611611)通讯作者:范英昌(19512),男,教授,博士生导师,主要从事中医药防治动脉粥样硬化及冠心病的研究。
作者简介:聂桂丽(19562),女,实验师,主要从事基础医学研究。
动脉粥样硬化(ather oscler osis,AS )是多种病因造成的始发于动脉壁内膜的一系列复杂分子和细胞改变的总结果。
Ross 提出AS 是一种炎症性疾病〔1〕,许多实验和临床研究表明慢性炎症反应贯穿AS 的全过程,大量细胞因子参与其中,形成复杂的网络调节。
现已明确多种因素包括细胞因子、促有丝分裂因子、磷酯、脂糖,病毒、双链RNA 、氧化脂质体等可通过多种细胞内途径激活核因子NF 2κB,启动基因转录,使炎症因子如I L 21表达上调,形成恶性循环〔2〕。
肿瘤坏死因子(T NF 2α)是在AS 发生过程中细胞分泌的一类具有多种生物学效应的细胞因子,在体内分布广泛及作用广泛,包括对造血、免疫和炎症的调节,对多种器官具有作用〔3〕,在相对较大的剂量下可以刺激炎症反应并且影响细胞活力〔3〕。
本文通过建立T NF 2α诱导的平滑肌细胞损伤模型,观察丹酚酸B 和丹参酮II A 对AS 过程中血管平滑肌细胞I L 21β表达的影响,探讨丹参单体对AS 的抑制作用及其机制。
1 材料与方法111 试剂与仪器 D ME M /F12培养基(GI B C O )、胎牛血清(民海生物)、胰蛋白酶(1:250,天津市光复精细化工研究所)、丹酚酸B 、丹参酮II A (国家“973”计划课题组提供)、吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(pyrr olidine dithi ocarba mate,P DT C )(SI G MA )、大鼠T NF 2α(英国PEPROTECH 公司)、VS MC α2actin 单克隆抗体(日本长野癌症研究中心惠赠)、I L 21β放免分析试剂盒(北京东亚放免技术研究所);超净工作台、C O 2恒温培养箱(T C 2323美国S HLAB )、酶标仪(T AC AN SPECT RA Ⅲ)、倒置显微镜(X D 210198010)、pH 计(mettler t oledo3202s 型)、磁力搅拌器。
112 平滑肌细胞培养与传代11211 平滑肌细胞的培养 选用清洁级W istar 大鼠,雌雄不限,体重150g 左右(购于军事医学科学院四所)。
动物断椎处死,消毒胸腹部皮肤,无菌条件下将主动脉取出,立即放入D 2Hank ′s 液中,洗去残留血迹,剔除血管外膜纤维脂肪层,用眼科剪刀将血管纵向剖开,刮除内膜,并反复冲洗血管。
然后将血管剪成1mm 2左右的小块,均匀的接种于25c m 2培养瓶内,37℃恒温培养箱内干孵115～2h,每个培养瓶内加入5m l 含20%胎牛血清的DME M /F12培养液,培养5d 后细胞从组织块内长出,并更换新鲜培养液继续培养,10d 后细胞长成“峰”、“谷”交错的致密细胞层,此时传代。
11212 细胞传代 按常规方法对原代细胞进行传代,实验用第四代细胞。
11213 平滑肌细胞鉴定和药物浓度的选择 利用VS MC α2actin 免疫组化法鉴定平滑肌细胞,MTT 法测定细胞活力。
通过细胞活力的检测确定T NF 2α的浓度为10ng/m l;确定丹酚酸B 的高、低浓度分别为1×103、2×102μg/L;确定丹参酮II A 的高、低浓度分别为2、015mg/L;确定P DTC 的浓度为5μmol/L 。
113 测定分组指标 实验分为7组,正常组:无血清培养基培养20h;模型组:12h 同步化以后加入T NF 2α作用6h;低剂量丹酚酸B 组:同步化以后,加入丹酚酸B (浓度2×102μg/L )预・328・聂桂丽等 丹参单体对肿瘤坏死因子损伤的血管平滑肌细胞炎症介质I L 21β表达的影响 第9期处理2h,再加入T NF2α作用6h;高剂量丹酚酸B组:1×103μg/L,余同上;低剂量丹参酮II A组:015mg/L,余同上;高剂量丹参酮II A组:2mg/L,余同上;P DTC组:同步化以后,加入P DTC(浓度5μmol/L)预处理2h,再加入T NF2α作用6h。
取细胞上清液采用放免法按试剂盒说明书进行I L21β含量检测。
114 统计方法 采用SPSS1110软件包进行方差分析,数据用x±s表示,组间比较用LS D法。
2 结 果 模型组动物血清中I L21β的含量较正常组、P DTC组、高剂量丹参酮II A组显著增加(P<0101);较低剂量丹酚酸B组、高剂量丹酚酸B组、低剂量丹参酮II A组明显增加(P<0105)。
由此可知高剂量丹参酮II A对I L21β表达抑制作用最强,其余中药组抑制作用次之(表1)。
表1 丹参单体对平滑肌细胞炎症介质I L21β表达的影响组别n I L21含量(ng/m l)正常组801280±011372)模型组801656±01079P DTC组801532±010652)低剂量丹酚酸B组801574±010451)高剂量丹酚酸B组801571±010631)低剂量丹参酮II A组801576±010481)高剂量丹参酮II A组801478±010402) 与模型组比较:1)P<0105;2)P<01013 讨 论 VS MC可通过自分泌和旁分泌方式释放细胞因子I L21,且I L21β的水平远高于I L21α。
I L21β具有多种生物学功能,它不仅能作用于血管内皮细胞,诱导其MCP21和VCAM21的表达,而且能与P DGF或单核细胞源性生长因子共同作用促进VS MC增生。
以浓度和时间依赖方式诱导单核细胞和中性粒细胞对VS MC的黏附〔4〕,表明I L21β对主动脉VS MC MCP21的蛋白分泌和mRNA表达具有明显的诱导作用,但对其VCAM21表达无明显影响〔5〕。
普遍认为在血液单核细胞迁移入内皮下间隙过程中,内皮细胞分泌的MCP21在动脉粥样硬化发生早期起关键作用,而VS MC产生的MCP21在动脉粥样硬化的各个时期都发挥重要作用。
I L21β能通过诱导VS MC表达MCP21参与动脉粥样硬化斑块形成。
NF2κB是调节免疫炎症相关基因的重要转录因子,对多种促炎因子、黏附分子、趋化因子起关键性的调控作用,而这些因子又与相应细胞的活化、增殖、浸润、趋化和分泌功能直接相关。
当细胞处于静息状态时,NF2κB位于细胞质中,其亚基与抑制蛋白结合,覆盖NF2κB的核定位信号,故以失活状态存在于细胞质中,只有在蛋白激酶和蛋白磷酸酶的参与下,NF2κB 从二聚体上解离,暴露核定位信号才得以激活〔6〕。
动脉粥样硬化病变的主要组成细胞即血管内皮细胞、平滑肌细胞、单核/巨噬细胞、T淋巴细胞受到脂蛋白、细胞因子、植物血凝素、病毒等刺激后,胞质中蛋白酶类被激活,使NF2κB活化,移位入细胞核,与DNA链上特异部位结合,启动基因转录,最终可产生黏附分子(如E2selectin、VCAM21、I C AM21等)、组织因子、血管紧张素原、诱生型一氧化氮合酶、诱生型环氧合酶及白介素、MCP2 1等,通过促炎作用导致动脉粥样硬化的发生发展〔7〕。