HBV和HCV基因分型的检测及其意义

0 S 仪 快速 检测 两次， 港7 > A P B有限公司生 化部 的 / Q P D 3 A R B @ G E
按照 ’ 两次 均为阳性者 作 ( ) + , ." ! & 作为阳性判定标准 ，
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为研究对象。 采用第一 军 $ % ’ ’ ( ) + , . 基因分型检测 应用 T / 1 : . 法， 医大学基础部生物医学诊 断研究 中心 ’ ( ) 基因分 型微板 核 酸杂交试剂盒， 对’ ( ) + , . 定性 检测阳 性标 本进行 基因 分 型。"取处理液! 加待测血 清! ， & & R于 & # $ N R离心管内， & & R # # 混匀， ／ 取上清 ! & & U 煮 沸! $分 钟， ! "& & & @ N Q V离 心 $分 钟， 于反应液管内， 弹匀， ／ 离心 秒， 上机， 预变 ! " R ! && & & @ N Q V ! & # 性6 循 环 条件： * U " 分 钟； 6 * U$ &秒、 $ $ U$ & 秒、 4 " U5 $
［ ］ 尚需 探 讨。 1 5 5 5年 $ > ? @ A 等 5 发现 " 6 S 突 变 多见 于 6 型 ［ ］
表 $ #、 、 " # % 型肝炎后肝硬化及肝癌发病率比较 分型 6 " 6 8 合计 例数 肝炎 3 + 3 + 4 / 肝硬化肝癌 1 / 2 , 1 4 合计 4 + 5 3 7 4 患病率 （*） 1 2 7 2毒 （’ ） 基 因分 型标 准。 *型， ( ) ! 6 6 8 ［ ］ 年> @ I B @等 8 利用聚合酶链反应技术扩增了5株 ’ ( ) + , . 全序列， 将它们分为 . + <5型。并将 ’ ( ) + , .* 个 ; 7 <建 立了简洁的进化树图， 同全序列进化树图比较， 发现 :基因的 序列变化同全基因序列的 变化一 致， 可用 :基因进 行基因 分 型简化 ’ ( ) + , . 基因分型方法。为了了解各基因型与疾 病 的关系， 国内外已进行了大量的研究， 但现今为止仍没有一 种 十分 肯定的 结论， 笔 者对深 圳市 人民医 院! ! *例 ’ ( ) + , . 阳性的乙肝住院患者进 行了病 毒基因 型测定， 同时 进行了 相 关检测及对比分析。 $ 材料与方法 深圳市人民医 $ % $ 病例选择 " & & &年6月至" & & !年! &月， 院感染 内科 ! ! *例 ’ ( ) + , . 阳性 乙型 病毒 性肝 炎住 院 患 者， 包括急性乙 肝、 慢性 乙肝、 重型乙 型肝炎 及乙肝 肝硬化 和 乙肝后肝癌， 其中男4 女8 记录患 者年龄， 留取血 清 $例， 6例， 标本作基因分型、 肝功能检测。 $ % & ’ ( ) + , . 定 性检 测 提 取来 诊 患者 血 清 ’ ( ) + , . 进行 = 定 性筛选， 共筛出 例阳性标本。 定性检测用 香 3 7 ! ! *
要：目的
探讨 ’ 为评估病情预后和建立有效的治疗方案提供新 的思路和 ( ) 各基因型与疾病之间的关系，
证据。方法 对! 研 究各基 因型 患者丙 氨酸 转氨 酶 （. 、 血 清总胆 红素 ! *例 ’ ( ) + , . 阳性患者进行基 因分型， / 0） （ ） 、 （ 、 发病年龄等病情相关指标。结果 发现 (型" 0 ( 1 / !球蛋白 ! 2） ! 例， 3型4 "例， ,型5例， ( 3型 6例， 3 ,型 * 例， 无法分型者"例。 型 、 、 、 发病年龄等均高于 型 （ ） ， 型肝炎 后肝硬化、 肝癌发 病率明显 3 . / 00 ( 1 /! 2 ( !! & # & $ , 高于 3型。结论 深圳地区 ’ 肝癌， ( )基因型以 3型为主， (型 次之。 ( 3 型和 ,型乙 肝较易发展 成肝炎后 肝硬化、 而 , 型致肝炎后肝硬化、 肝癌可能性更大。3型肝脏损害比 (型严重， 同时(型 患者趋于年轻化。 (型重型肝炎预后 良好， 3型预后较 差。 关键词：肝炎病毒， 乙型； 基因分型； 脱氧核糖核酸 中图分类号： （ ） 7 $ ! " # 5 文献标识码： . 文章编号： ! & & * + $ % 8 9 " & & " " " + ! 8 & 8 + & " ， 由正 （ ） 链和负 （/ ） 链 ’ ( ) + , . 为环状部分双股 , . : 构成。负链有*个开放读码区 （; ） 、 、 、 7 < : 3 = 9 区。3 > ? @ > ? A B + ［ !］ 等 将 血 清 型 具 体 分 为 型： ， ， = C ? D ’ ( F . 6 C H !C H " E G E E ， ， ， ， ， C E H 8 C E H * C E @ C I H " C I H * C I @ J 和C I @ J 。但血清学分 析 并不能真正反映基因型 的改变， 并 不能确切 反映病 毒的异 质
1 2 / , 表! " 、 （! " # 型肝功及发病年龄比较 #） ! " # $ ( $ ! " ) （ ／ ） （ ／ ） （*） % & ’ $ % & ’ $ ! ! " + , . / 0 1 + 2 / 1 / 3 4 . 0 + , 4 4 + + . 5 0 4 + 2 6 . , 1 / 0 + / 1 , , + , 7 , 0 1 + , 1 2 2 7 . , 0 1 2 7 4 $值 + 2 4 2 + + / . + + 1 3 %值 " / / . " / / . " / / . 分型 年龄 （岁） + 4 . 0 3 , + , 1 3 4 0 4 / / + . . 7 " / / 1
采用列联表卡方检验得 出： " 6 型与 8型 肝炎后 肝硬化、 + 肝癌的患病 率无明 显差异， ， ； / . , 4 %9 / , 3 # / / . 6 ! 9 + 型和 " 6 型 肝 炎 后 肝 硬 化 肝 癌 患 病 率 无 明 显 差 异， 9 ! ， ； 1 / 2 , %9 / 2 / 5 # / / . 8型肝硬化肝癌患病率明显 高于 6 + 型， ， ， 且 8 型 患肝硬 化肝癌 相 1 5 7 %9 / / / 4 " / / . ! 94 对危险度是 6型 倍。 1 + 2 . 重点对其 进 $ & ’ 临床预后分析 "型出现+例亚急 性重肝， 行临床观察， 发现该病例治疗效果良好。6型重型 肝炎2例， 其中亚急性重肝1例， 治疗效果差， 死于肝衰 竭。慢性重 肝+ 例， 治疗多日未愈出院和转院。 发现 : 分型 无法 归 $ & ( 排除可能干 扰因 素， " ; < 8 = ( 阳性， 属者+例。 ’ 讨 论
《临床荟萃》 + / / +年
第1 4卷
第+ +期
疗多日未愈， 另1例转院治疗。 1例出院放弃治疗， 我国是否 有新 基 因 型的 存 在 是 需要 探 讨 的 问题 之 一。 根据 : I J K M B N等 4 发现长2 + , 7 O " Q ( L P的新 病毒株， C抗原决 定簇归属为H @ R +血清型。这种新 病毒株于 前 6区 第+个氨 基酸和第+ 在: 7个氨基 酸位 点处 产生翻 译阻 断， " G ( C氨基 末端有2 （ 的插入， 3个位点 1 +个氨基酸） : " G ( C羧基末端有+ 个氨基酸缺失， 前I 无法 1区开 放读码框 中1个氨 基酸缺失， 归属为经典的3种 基因 型而称 为 ) 型。本实 验中 排除 各种 干扰因素， 发现有 8 （: ） 无 法归属 3 = ( 强阳性 " ; < 8 = ( # 1 / 4 种基因型者+例， 从而考虑我国有可能 存在新基因型。 实验证明， （ 、 : " ; 血 清型 与基因 型的 关系 为： (型 H @ R + ） ， 、 ） ， （ 、 、 ） ， 、 H R 1 "型（ H @ R + H R 1 6型 H @ N H N H @ R + 8 型（ H R + L L L L ） ， 型（ ） ， 型（ ） 。研究 证明， 该基因 分型法 H R 2 D H R , E H @ R , L L ［ 7］ 较为正确 。: " ; 基因 型的判 定为 进一步 了解 乙肝 的发病 机制， 指导临床病情诊断、 治疗和预后都有着重要的意义。国 外学者对 : 近年来国内学者对乙 " ;基因 型的研究十分关注， 肝基因型的研究也取得了比较大的进 展， 对 我国流行的 : " ; 基因分型有必要进行更大 样本的 流行病 学调查， 完善 地探讨 各基因型 : 对可能的新基因型应进一 " ;在我 国的分布情况， 步留取标本进行测序分析确定。: （ ） 变异是 " ;6启动子 " 6 S 近几年的 研究热点 之一， 但" 突 变与 基因型 的关系 6 S : " ;
K L ［ ］ 性。 ! 6 % %年 ; M C N > D >等 " 根 据 不同 基 因 型 之 间 的 差 异 " 相同基因型之间的差异! 将’ % O， 6 " O， ( ) + , .分 为 . K,