43《酵母细胞的固定化》课件高二
合集下载
酵母细胞固定化PPT课件
酵母细胞的数目少
-
19
实验探究二： 注射器滴加的速度对固定化细胞质量的影响
滴加速度过快，凝胶珠不呈圆形或椭圆形， 而呈拖尾状或面条状
实验探究三： 注射器滴加时与CaCl2液面的距离对固定化
细胞质量的影响
滴加时离液面过低，凝胶珠也会呈拖尾状
-
20
实验评价：
（一）观察凝胶珠的颜色和形状
①如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色，说明海 藻酸钠的浓度偏低，固定的酵母细胞数目较少； ②如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说明 海藻酸钠的浓度偏高，制作失败，需要再作尝试。
-
13
2、配制物质的量浓度为0.05mol/L的CaCl2 溶液 （1） 过程：
称取无水CaCl2 0.83g，放入200ml的烧杯中， 加入150ml的蒸馏水，使其充分溶解，待用。
（2）注意事项： 溶解物质要彻底，勿用自来水溶解，以防自来
水中各种离子影响实验结果
-
14
3、配制海藻酸钠溶液
（1）过程：称取海藻酸钠，放入
50ml小烧杯中，加入10ml水，用 酒精灯加热，边加热边搅拌，将海 藻酸钠调成糊状，直至完全溶化， 用蒸馏水定容至10ml。
（2）注意事项 加热时要用小火，或者间断加热反复几次，直到
海藻酸钠溶化为止
如果加热太快，海藻酸钠会发生焦糊。
-
15
4、海藻酸钠溶液和酵母细胞混合
（1）过程：将溶化好的海藻酸钠
溶液冷却至室温，加入以活化的酵 母细胞，进行充分搅拌，再转移至 注射器中。
（2）注意事项
①溶化好的海藻酸钠溶液必须冷却至室温，否则会因 温度过高杀死酵母菌。
②搅拌要彻底充分，使两者混合均匀，以免影响实验 结果的观察
酵母细胞的固定化公开课精品PPT课件
二、实验操作——酵母细胞的固定化
（1）酵母细胞的活化： 〖思考1〗活化是指什么？ 方法？
• 〖思考2〗在活化酵母的过 程中要注意？
1、酵母细胞活化时体积会变大， 所用容器要大一些，防止活化液溢出； 2、选用的干酵母有较强的活性且物种单一；
二、实验操作——酵母细胞的固定化
（1）酵母细胞的活化： （2）配制CaCl2溶液：
（2）配制CaCl2溶液：
目的？使胶体聚沉。形成稳定 的结构
（3）配制海藻酸钠溶液： •如何判断固定化酵母细胞是否成
（4）酵海母藻细酸胞钠的溶混液合与：---功观？察凝胶珠的颜色和形状 ➢若凝胶珠颜色过浅，说
（5）固定化酵母细胞： 明海藻酸钠的浓度偏低， 固定的酵母细胞数目较少
➢凝胶珠不是圆形或椭圆
二、实验操作——酵母细胞的固定化
思考：用什么方法对酵母细胞的固定化？
包埋法
包埋法常用哪些载体？
明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸 纤维素、聚丙烯酰胺等
三、实验操作
（一）制备固定化酵母细胞
观看视频思考下列问题：
（1）制备过程包括哪几个步骤？ （2）你认为哪个步骤的操作是最 重要的一环？ （3）各步骤应当分别注意什么问 题？
二、实验操作——酵母细胞的固定化
（1）酵母细胞的活化： （2）配制CaCl2溶液：
• 是最重要的环节：
➢如果海藻酸钠浓度过 高，将很难形成凝胶珠；
➢如果浓度过低，形成
的凝胶珠所包埋的酵母
（3）配制海藻酸钠溶液：
（浓度要适宜？）
细胞的数目少，影响实 验效果。
• 注意事项：
加热时要用小火， 或者间断加热（目的？）
利用固定的酵母细胞发酵产生 酒精，可以看到产生了很多气 泡，同时会闻到酒味。 还有其他方法吗？
精讲课件之高二生物人教版选修1 4-3 酵母细胞的固定化
高果 糖浆
反复 多次
葡萄糖再 次异构化
分离果糖 果葡糖浆
和葡萄糖
一、基础知识
3.固定化细胞 ①定义：利用物理或化学方法将细胞固定在一定空间
的技术 ②固定方式：包埋法、化学结合法、物理吸附法 ③优点和不足：操作较容易、对酶活性影响小、可催
化一系列反应等；大分子底物不能通过细胞膜 ④固定酶与固定细胞的比较 ➢固定化酶--化学结合法和物理吸附法、
较小，根本原因是( D )
A．避免了细胞破碎、酶的提取纯化过程
栏
B．固定化细胞在多种酶促反应中连续发挥作用 目
C．催化反应结束后，能被吸收和重复利用
链 接
D．细胞结构保证了各种酶在细胞内的化学反应中有
效地发挥作用
5.试分析下图中哪一种与用海藻酸钠作载体制备的 固定化酵母细胞相似？( D )
3.下列关于固定化酶和固定化细胞的叙述,错误的是 （B ） A. 固定化酶的主要目的是实现酶的重复利用 B. 溶解氧交换受阻是固定化酶应用的重要限制因素 C. 固定化细胞用于生产能分泌到细胞外的产物 D. 凝胶与被包埋细胞之间不是通过共价键结合
变式
训练 4．相对固定化酶而言，固定化细胞对酶的活性影响
3．如果想将微生物的发酵过程变成连续的酶反应， 应该选择哪种方法？
固定化细胞技术
4．如果反应物是大分子物质，又应该选择哪种方法？ 固定化酶技术(因为大分子物质不能进入细胞)
5.直接使用酶、使用固定化酶和使用固定化细胞催 化反应各有哪些优点和不足？
二、实验操作
1.酵母细胞的活化(干酵母+蒸馏水)
酵母细胞活化时体积会变大，所用容器应足够大
随堂练习
1.下面是制备固定化酵母细胞的步骤，正确的是( D )
生物：4-3酵母细胞的固定化(选修1)(优秀课件)
2．固定化实验中的有关问题
特别提醒
制备固定化酵母细胞的注意事项
(1)海藻酸钠溶液与酵母细胞混合：冷却后再混合，注意混合均匀，不要进入
气泡。
(2)凝胶珠的颜色和形状：如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色，说明海藻酸
钠的浓度偏低，固定的酵母细胞数目较少；如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆 形，则说明海藻酸钠的浓度偏高，制作失败，需要再作尝试。
固定化酶 一种 化学结合固定
固定化细胞 一系列酶
制作方法
化、物理吸附
固定化
包埋法固定化
是否需要
否 营养物质 反应底物 各种物质(大分 否 是
各种物质
小分子物质
缺点
①对环境条件非常敏感 ，易失活②难回收，成 本高，影响产品质量
反应物不易与酶接近， 不利于催化一系列的酶促 尤其是大分子物质，反 反应 应效率下降
4．固定化酶的应用实例——高果糖浆的生产 固 定化酶技术已经应用于高果糖浆的生产中，生产高果糖浆所需要的 葡萄糖异构酶 酶颗粒 酶是 ，所使用的反应柱上的孔应满足 不能 反应溶液 通过筛板上的小孔，而 却可以自由出入。
[思维激活1]
日常生活中人们用来蒸馒头的发酵粉在浸泡宜用凉水、温水还是
开水？
[思维激活2]
用于固定酵母细胞的载体是什么？载体的浓度越高固定效果越好
吗？
提示
用于固定酵母细胞的载体是海藻酸钠，海藻酸钠的浓度关系到固定化 细胞的质量——浓度过低形成的凝胶珠内包埋的细胞过少，浓度过高则不易形成 凝胶珠。
1．固定化酵母细胞的制备
酵 母细胞的活化： 1 g 干酵母＋ 10 mL 蒸馏水 → 50 mL烧杯中，搅拌均匀，放置1 h
人教版高二选修一4.3酵母细胞的固定化课件28PPT
二、实验操作
（一）制备固定化酵母细胞
1.酵母细胞的活化：
（1）活化是指什么？ 在缺水状态下，微生物处于休眠状态。活化是指让处于休眠 状态的微生物重新恢复正常生活状态的过程。
（2）活化过程 1g干酵母＋10mL蒸馏水→50mL烧杯→搅拌均匀→放置1h，使之活化。
（3）操作提示 酵母细胞活化时体积会变大，因此活化前应该选择体积足够大的容 器，以避免酵母细胞的活化液溢出容器外。
②体积大的细胞难以被吸附或结合而体积小的酶容易 从包埋的材料中漏出
一、基பைடு நூலகம்知识
（二）固定化细胞技术
包埋法
将酶包埋在细微网格里
化学结合法 将酶与载体相互连接起来
物理吸附法 将酶吸附在载体表面上
一、基础知识
（二）固定化细胞技术
包埋法固定细胞 1.包埋法固定细胞：
即将微生物细胞均匀地包埋在不溶于水的多孔性载体中。 2.包埋时常用的载体包括：
洗去凝胶珠表面多余的CaCl2溶液。以免对实验造成影响。 2.葡萄糖在这里有什么用？
既可以作为发酵底物，也作为酵母菌细胞的营养物质。
特别注意：
1.海藻酸钠的浓度涉及到固定化细胞的质量。
如果浓度过高：
将很难形成凝胶珠。高浓度海藻酸钠只能用粗针头注射， 针头粗也会粘着，难促使形成液滴。且高浓度海藻酸钠不易 形成滴状下落，形成条状，不是圆形或是椭圆形，品相极差， 并且凝胶珠容易破裂。
明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺等。
海藻酸钠：
一种天然多糖，是由海带中提取的天然多糖碳水化合物， 可作为食用的食品添加剂，也可作为支架材料用于医学用途， 其温和的溶胶凝胶过程、良好的生物相容性使其适于作为释 放或包埋药物。
二、实验操作
高二生物酵母细胞的固定化课件
〖思考2〗活化是指什么？ 活化是指让处于休眠状态的微生
物重新恢复正常生活状态的过程。
（2）配制CaCl2溶液： 0.83gCaCl2＋150mL蒸馏水
→200mL烧杯→溶解备用。
（3）配制海藻酸钠溶液：
0.7g海藻酸＋10mL水→50mL烧杯→酒 精灯微火（或间断）加热，并不断搅拌， 使之溶化→蒸馏水定容到10mL。
高二生物酵母细胞 的固定化课件
基础知识
（一） 固定化酶的应用实例 ——生产高果糖浆
（1）高果糖浆的生产原理：
葡萄糖异构酶
葡萄糖
果糖
(2)葡萄糖异构酶固定： 将葡萄糖异构酶固定在颗粒状载体
上，装入反应柱中。
(3)高果糖浆的生产操作：
从反应柱上端注入葡萄糖溶液，从 下端流出果糖溶液，一个反应柱可连续 使用半年。
〖思考〗将谷氨酸棒状杆菌生产谷氨 酸的发酵过程变为连续的酶反应，应 当固定（酶、细胞）；若将蛋白质变 成氨基酸，应当固定（酶、细胞）。
3. 固定化细胞的材料：
固定化细胞时应当选用不溶于 水的多孔性载体材料，如明胶、琼 脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚 丙烯酰胺等
2. 实验设计
1. 制备固定化酵母细胞 （1）酵母细胞的活化： 1g干酵母＋10mL蒸馏水→50mL烧杯 →搅拌均匀→放置1h，使之活化。
将酶（或细胞）相 互连接起来
（二）固定化细胞技术
1.将酶或细胞固定化的方法
包埋法 化学结合法
将酶（或细胞）包埋 在细微网格里
将酶（或细胞）相 互连接起来
吸附法
（二）固定化细胞技术
1.将酶或细胞固定化的方法
包埋法 化学结合法
吸附法
将酶（或细胞）包埋 在细微网格里
将酶（或细胞）相 互连接起来
物重新恢复正常生活状态的过程。
（2）配制CaCl2溶液： 0.83gCaCl2＋150mL蒸馏水
→200mL烧杯→溶解备用。
（3）配制海藻酸钠溶液：
0.7g海藻酸＋10mL水→50mL烧杯→酒 精灯微火（或间断）加热，并不断搅拌， 使之溶化→蒸馏水定容到10mL。
高二生物酵母细胞 的固定化课件
基础知识
（一） 固定化酶的应用实例 ——生产高果糖浆
（1）高果糖浆的生产原理：
葡萄糖异构酶
葡萄糖
果糖
(2)葡萄糖异构酶固定： 将葡萄糖异构酶固定在颗粒状载体
上，装入反应柱中。
(3)高果糖浆的生产操作：
从反应柱上端注入葡萄糖溶液，从 下端流出果糖溶液，一个反应柱可连续 使用半年。
〖思考〗将谷氨酸棒状杆菌生产谷氨 酸的发酵过程变为连续的酶反应，应 当固定（酶、细胞）；若将蛋白质变 成氨基酸，应当固定（酶、细胞）。
3. 固定化细胞的材料：
固定化细胞时应当选用不溶于 水的多孔性载体材料，如明胶、琼 脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚 丙烯酰胺等
2. 实验设计
1. 制备固定化酵母细胞 （1）酵母细胞的活化： 1g干酵母＋10mL蒸馏水→50mL烧杯 →搅拌均匀→放置1h，使之活化。
将酶（或细胞）相 互连接起来
（二）固定化细胞技术
1.将酶或细胞固定化的方法
包埋法 化学结合法
将酶（或细胞）包埋 在细微网格里
将酶（或细胞）相 互连接起来
吸附法
（二）固定化细胞技术
1.将酶或细胞固定化的方法
包埋法 化学结合法
吸附法
将酶（或细胞）包埋 在细微网格里
将酶（或细胞）相 互连接起来
4-3酵母细胞的固定化课件高二下学期生物人教版选修一
2
固定化酶
指限制或固定于特定空间位置的酶，
具体来说，是指经物理或化学方法处理，
使酶变成不易随水流失即运动受到限制，
而又能发挥催化作用的酶制剂。
水溶性酶
水不溶性载体
固定化技术
水不溶性酶
（固定化酶）
3
基础知识
（一）利用固定化酶技术生产高果糖浆的实例
（1）需要酶 葡萄糖异构酶
（2）葡萄糖异构酶的优点
稳定性好、可以持续发挥作用
共价结合法：酶和载体以共价键的形式结合 在一起的方法，这种方法需要酶和载体都具 有氨基、羧基或羟基等官能团。
12
13
酶和细胞的固定方法和特点
固定对象
酶
细胞
适宜固 化学结合法、物
定法
理吸附法
包埋法
特 体积小，固定一 体积大，固定一
点 种酶。
系列酶。
包埋法容易丢失 难以化学结合和
吸附
14
2.固定化酶和固定化细胞的联系与区别
微囊化法：将酶溶液或悬浮液包裹在膜内， 膜既可以使酶存在于类似细胞内的环境中， 又阻止酶的脱落或直接与微囊外环境接触。 小分子底物能迅速通过膜与酶作用，产物也 能扩散出来。
11
（3）化学结合法
①定义：将酶分子相互结合，或将其结合到 纤维素、琼脂糖，离子交换树脂等载体上的 固定方式。
②种类
交联法：通过双功能试剂，将酶和酶联结成 网状结构的方法。
以恒定的速度缓慢的将注射器中的溶液滴加 到配制好的CaCl2溶液中，将形成的凝胶珠 在CaCl2溶液中浸泡30min左右。
②注意事项
A、可利用海藻酸钠制成不含酵母菌的凝胶 珠，用作对照
B、海藻酸钠胶体在CaCl2这种电解质的作 用下，发生聚沉，形成凝胶珠，需稳定
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
思考：直接使用酶、固定化酶与固定化细胞各有什么优缺点？
类型
优点
不足
直接使用酶
对环境条件非常敏感，
容易失活；溶液中的
催化效率高，低耗能、 低污染等。
酶很难回收，不能被 再次利用，提高了生 产成本；反应后酶会
混在产物中，可能影
响产品质量。
固定化酶 固定化细胞
酶既能与反应物接触， 又能与产物分离，同 时，固定在载体上的 酶还可以被反复利用。
驾考宝典网 / 驾考宝典2016科目一 科目四
三．实验操作 （一）制备固定化酵母细胞 1．酵母细胞的活化
思考：1、什么叫酵母细胞的活化？
在缺水的状态下，微生物会处于休眠状态。活化就是让处于 休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态。酵母细胞所需 要的活化时间较短，一般需要0.5～1 h，教师需要提前做好 准备。此外，酵母细胞活化时体积会变大，因此活化前应该 选择体积足够大的容器，以避免酵母细胞的活化液溢出容器 外。
固定化细胞技术
2．固定化细胞固定的是一种酶还是一系列酶？
固定化细胞固定的是一系列酶
3．如果想将微生物的发酵过程变成连续的酶反应，应 该选择哪种方法？
固定化细胞技术
4．如果反应物是大分子物质，又应该选择哪种方法？
固定化酶技术
元贝驾考 元贝驾考2016科目一 科 目四
2．配制物质的量浓度为0.05mol/L的CaCl2溶液
思考：2、配制物质的量浓度为0.05mol/L的CaCl2溶 液有什么作用？
3．配制海藻酸钠溶液
思考：①配制的海藻酸钠溶液具体作用是什么？ 包埋酶或细胞
②在加热的过程中，为什么要用小火，或者间断加热？
防止焦糊
4．海藻酸钠溶液与酵母细胞混合 5．固定化酵母细胞
2．观察发酵的葡萄糖溶液 问题思考：当观察到哪些现象时，可说明实验获得 成功？为什么？
利用固定的酵母细胞发酵产生酒精，可以看到产 生了很多气泡，同时会闻到酒味。
4、固定化酶和固定化细胞的原理是什么？
就是将酶固定在不溶于水的载体上，或 者将微生物细胞均匀地包埋于不溶于水 的多孔性载体上，使酶既能与反应物接 触，又能与产物分离，同时，固定在载 体上的酶还可以被反复利用的技术。
思考：①为什么刚形成的凝胶珠要在CaCl2溶液中
浸泡30min左右？
形成稳定的凝胶珠
②如何检验凝胶珠的质量是否合格？
说明：刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间，以 便形成稳定的结构。检验凝胶珠的质量是否合格，可以使用 下列方法。一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤 压，如果凝胶珠不容易破裂，没有液体流出，就表明凝胶珠 的制起，也能表明制备的凝胶珠是成功的。
（二）用固定化酵母细胞发酵 问题思考：发酵时为什么要将温度控制在25℃？
四．实验操作结果分析与评价
1．观察凝胶珠的颜色和形状 问题思考：①如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色， 则说明什么？ ②如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说明什么？
如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色，说明海藻酸 钠的浓度偏低，固定的酵母细胞数目较少；如果形 成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说明海藻酸钠的 浓度偏高，制作失败，需要再作尝试。
2、固定化酶技术常采用
A 包埋法
B 化学结合和物理吸附法
C 活化法
D 微囊化法
3、海藻酸钠在水中溶解的速度较慢，需要 经过加热促进其溶解，采用的最好加热方 法是
A 快速加热
B 持续高温加热
C 小火间断加热 D 灼烧加热
谢谢大家!
一种酶只能催化一种 化学反应，而在生产 实践中，很多产物的 形成都通过一系列的 酶促反应才能得到的。
固定后的酶或细胞与
成本低，操作更容易。
反应物不容易接近， 可能导致反应效果下
降等。
课堂讨论： 1．从操作角度来考虑，你认为固定化酶技术与固定化 细胞技术哪一种方法更容易？哪一种方法对酶活性的影 响更小？
类型
优点
不足
直接使用酶
对环境条件非常敏感，
容易失活；溶液中的
催化效率高，低耗能、 低污染等。
酶很难回收，不能被 再次利用，提高了生 产成本；反应后酶会
混在产物中，可能影
响产品质量。
固定化酶 固定化细胞
酶既能与反应物接触， 又能与产物分离，同 时，固定在载体上的 酶还可以被反复利用。
驾考宝典网 / 驾考宝典2016科目一 科目四
三．实验操作 （一）制备固定化酵母细胞 1．酵母细胞的活化
思考：1、什么叫酵母细胞的活化？
在缺水的状态下，微生物会处于休眠状态。活化就是让处于 休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态。酵母细胞所需 要的活化时间较短，一般需要0.5～1 h，教师需要提前做好 准备。此外，酵母细胞活化时体积会变大，因此活化前应该 选择体积足够大的容器，以避免酵母细胞的活化液溢出容器 外。
固定化细胞技术
2．固定化细胞固定的是一种酶还是一系列酶？
固定化细胞固定的是一系列酶
3．如果想将微生物的发酵过程变成连续的酶反应，应 该选择哪种方法？
固定化细胞技术
4．如果反应物是大分子物质，又应该选择哪种方法？
固定化酶技术
元贝驾考 元贝驾考2016科目一 科 目四
2．配制物质的量浓度为0.05mol/L的CaCl2溶液
思考：2、配制物质的量浓度为0.05mol/L的CaCl2溶 液有什么作用？
3．配制海藻酸钠溶液
思考：①配制的海藻酸钠溶液具体作用是什么？ 包埋酶或细胞
②在加热的过程中，为什么要用小火，或者间断加热？
防止焦糊
4．海藻酸钠溶液与酵母细胞混合 5．固定化酵母细胞
2．观察发酵的葡萄糖溶液 问题思考：当观察到哪些现象时，可说明实验获得 成功？为什么？
利用固定的酵母细胞发酵产生酒精，可以看到产 生了很多气泡，同时会闻到酒味。
4、固定化酶和固定化细胞的原理是什么？
就是将酶固定在不溶于水的载体上，或 者将微生物细胞均匀地包埋于不溶于水 的多孔性载体上，使酶既能与反应物接 触，又能与产物分离，同时，固定在载 体上的酶还可以被反复利用的技术。
思考：①为什么刚形成的凝胶珠要在CaCl2溶液中
浸泡30min左右？
形成稳定的凝胶珠
②如何检验凝胶珠的质量是否合格？
说明：刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间，以 便形成稳定的结构。检验凝胶珠的质量是否合格，可以使用 下列方法。一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤 压，如果凝胶珠不容易破裂，没有液体流出，就表明凝胶珠 的制起，也能表明制备的凝胶珠是成功的。
（二）用固定化酵母细胞发酵 问题思考：发酵时为什么要将温度控制在25℃？
四．实验操作结果分析与评价
1．观察凝胶珠的颜色和形状 问题思考：①如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色， 则说明什么？ ②如果形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说明什么？
如果制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色，说明海藻酸 钠的浓度偏低，固定的酵母细胞数目较少；如果形 成的凝胶珠不是圆形或椭圆形，则说明海藻酸钠的 浓度偏高，制作失败，需要再作尝试。
2、固定化酶技术常采用
A 包埋法
B 化学结合和物理吸附法
C 活化法
D 微囊化法
3、海藻酸钠在水中溶解的速度较慢，需要 经过加热促进其溶解，采用的最好加热方 法是
A 快速加热
B 持续高温加热
C 小火间断加热 D 灼烧加热
谢谢大家!
一种酶只能催化一种 化学反应，而在生产 实践中，很多产物的 形成都通过一系列的 酶促反应才能得到的。
固定后的酶或细胞与
成本低，操作更容易。
反应物不容易接近， 可能导致反应效果下
降等。
课堂讨论： 1．从操作角度来考虑，你认为固定化酶技术与固定化 细胞技术哪一种方法更容易？哪一种方法对酶活性的影 响更小？