核酸、蛋白质杂交用相关试剂、缓冲液的配制
核酸电泳相关试剂、缓冲液及配制方法
三、核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法50×TAE Buffer (pH8.5)组份浓度 2 M Tris-醋酸，100 mM EDTA配制量 1 L配制方法3.加入57.1 ml的乙酸，充分搅拌。
4.加去离子水将溶液定容至l L后，室温保存。
10×TBE Buffer (pH8.3)组份浓度890 mM Tris-硼酸，20 mM EDTA配制量 1 L配制方法l.3.加去离子水将溶液定容至l L后，室温保存。
10×MOPS(3-吗啉基丙磺酸)Buffer组份浓度200 rnM MOPS，20 mM NaOAc，10 mM EDTA配制量 1 L41.8 g MOPS，置于1 L烧杯中。
2.加约700 ml DEPC处理水，搅拌溶解。
3.使用2 N NaOH调节pH值至7.0。
1 L。
0.45 m滤膜过滤除去杂质。
7.室温避光保存。
注：溶液见光或高温灭菌后会变黄。
变黄时也可使用，但变黑时不要使用。
溴乙锭(10 mg/ml)组份浓度10 mg/ml溴乙锭配制量100 ml1 g溴乙锭，加入到100 ml容器中。
2.加入去离子水100 ml，充分搅拌数h完全溶解溴乙锭。
3.将溶液转移至棕色瓶中，室温避光保存。
0.5 g/ml。
注意：溴乙锭是一种致癌物质，必须小心操作。
Agarose凝胶×TBE或1×TAE)。
2.根椐制胶量及凝胶浓度，准确称量琼脂糖粉，加入适当的锥形瓶中。
3.加入一定量的电泳缓冲液(总液体量不宜超过锥形瓶的50%容量)。
注：用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须统一。
4.在锥形瓶的瓶封上保鲜膜，并在膜上扎些小孔，然后在微波炉中加热熔化琼脂糖。
加热过程中，当溶液沸腾后，请戴上防热手套。
小心摇动锥形瓶。
使琼脂糖充分均匀熔化。
此操作重复数次，直至琼脂糖完全熔化。
必须注意，在微波炉中加热时间不宜过长，每次当溶液起泡沸腾时停止加热，否那么会引起溶液过热暴沸，造成琼脂糖凝胶浓度不准，也会损坏微波炉。
核酸检验试剂配制方案
核酸检验试剂配制方案核酸检验是一项非常重要的实验室技术，用于检测和分析DNA和RNA的序列和结构。
核酸检验试剂的配制是核酸检验工作中的关键环节，下面是一个700字的核酸检验试剂配制方案。
一、试剂准备1. Tris-HCl缓冲液：将121.14g Tris-HCl溶解在800ml去离子水中，调pH至7.5，加去离子水至1L。
2. EDTA溶液：将186.1g EDTA二钠溶解在800ml去离子水中，加去离子水至1L。
3. NaCl溶液：将58.44g NaCl溶解在800ml去离子水中，加去离子水至1L。
4. Lyse Buffer溶液：将10ml Tris-HCl缓冲液、1ml EDTA溶液、8ml NaCl溶液混合，加去离子水至50ml。
5. 2×载脂体缓冲液：将40ml Tris-HCl缓冲液、8ml EDTA溶液、70ml NaCl溶液混合，加去离子水至200ml。
6. 蛋白酶K溶液：将1mg的蛋白酶K溶解在1ml去离子水中。
7. 合成引物：按需要合成引物序列，并与合成公司确认纯度和浓度。
二、试剂配制1. DNA提取试剂配制：将1ml Lyse Buffer溶液和10μl蛋白酶K溶液混合，制成DNA 提取试剂。
2. PCR反应液配制：将50μl 2×载脂体缓冲液、5μl DNA模板、1μl合成引物、3μl MgCl2、1μl dNTP混合，加去离子水至100μl，制成PCR反应液。
3. 电泳缓冲液配制：将242g Tris和36g boric acid溶解在800ml去离子水中，加去离子水至1L，pH调至8.0，加入20ml 0.5M EDTA混合，最终体积调至1L。
4. DNA标记液配制：将1μl DNA样品和9μl DNA加载缓冲液混合，制成DNA标记液。
5. 试剂保存温度：将所有试剂保存在适宜的温度下，避免阳光直射和高温。
三、注意事项1. 试剂配制时要严格按照实验室的操作规程进行，避免实验污染。
实验常用试剂、缓冲液的配制方法
实验常用试剂、缓冲液的配制方法1、1M Tris-HCl□组份浓度1 M Tris-HCl（pH7.4，7.6，8.0）□配制量1L□配置方法1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
pH值浓HCl7.4 约70mL7.6 约60mL8.0 约42mL4. 将溶解定容至1L。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH 值随温度的变化差很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2、1.5 M Tris-HCl□组份浓度1.5 M Tris-HCl（pH8.8）□配制量1L□配置方法1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调pH值至8.8。
4. 将溶液定容至1L。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
3、10×TE Buffer□组份浓度100 mM Tris-HCl，10 mM EDTA （pH 7.4，7.6，8.0）□配制量1L□配置方法1. 量取下列溶液，置于1L烧杯中。
1 M Tris-HCl Buffer（pH7.4，7.6，8.0）100mL500 mM EDTA（pH8.0）20mL2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水，均匀混合。
3. 将溶液定至1L后，高温高压灭菌。
4. 室温保存。
4、3 M 醋酸钠□组份浓度3 M 醋酸钠（pH5.2）□配制量100mL□配置方法1. 称取40.8gNaOAc•3H2O置于100～200mL烧杯中，加入约40mL的去离子水搅拌溶解。
2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。
3. 加入去离子水将溶液定容至100mL。
各种缓冲液配方
三、核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法50×TAE Buffer (pH8.5)组份浓度2 M Tris-醋酸，100 mM EDTA 配制量 1 L配制方法1.2.3.加入57.1 ml 的乙酸，充分搅拌。
4.加去离子水将溶液定容至l L 后，室温保存。
10×TBE Buffer (pH8.3)组份浓度890 mM Tris- 硼酸，20 mM EDTA 配制量 1 L配制方法l.2.3.加去离子水将溶液定容至l L 后，室温保存。
10×MOPS(3-吗啉基丙磺酸)Buffer组份浓度200 rnM MOPS，20 mM NaOAc，10 mM EDTA 配制量 1 L配制方法1.称41.8 g MOPS，置于1 L 烧杯中。
2.加约700 ml DEPC 处理水，搅拌溶解。
3.使用2 N NaOH 调节pH 值至7.0。
4.5.用DEPC6.用0.45 m 滤膜过滤除去杂质。
7.室温避光保存。
注：溶液见光或高温灭菌后会变黄。
变黄时也可使用，但变黑时不要使用。
溴乙锭(10 mg/ml) 组份浓度10 mg/ml 溴乙锭配制量100 ml 配制方法 1.称量 1 g 溴乙锭，加入到100 ml 容器中。
2.加入去离子水100 ml ，充分搅拌数h 完全溶解溴乙锭。
3.将溶液转移至棕色瓶中，室温避光保存。
4.溴乙锭的工作浓度为0.5 g/ml 。
注意：溴乙锭是一种致癌物质，必须小心操作。
Agarose 凝胶配制方法1. 配制适量的电泳及制胶用的缓冲液（通常是0.5×TBE 或1×TAE）。
2.根椐制胶量及凝胶浓度，准确称量琼脂糖粉，加入适当的锥形瓶中。
3.加入一定量的电泳缓冲液（总液体量不宜超过锥形瓶的50%容量）。
注：用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须统一。
4.在锥形瓶的瓶封上保鲜膜，并在膜上扎些小孔，然后在微波炉中加热熔化琼脂糖。
加热过程中，当溶液沸腾后，请戴上防热手套。
核酸、蛋白质杂交用相关试剂、缓冲液的配制方法
核酸、蛋白质杂交用相关试剂、缓冲液的配制方法20×SSC20×SSPE Buffer50×Denhardt’s溶液■组份浓度 3.0 M NaCl，0.3 M 柠檬酸钠■配制量 1 L■配制方法 1. 称量下列试剂，置于1 L烧杯中。
NaCl 175.3 g柠檬酸钠·2H2O 88.2 g2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 滴加14 N HCl，调节pH值至7.0后，加去离子水将溶液定容至1 L。
4. 高温高压灭菌后，室温保存。
■组份浓度 3.0 M NaCl，0.2 M NaH2PO4，0.02 M EDTA■配制量 1 L■配制方法 1. 称量下列试剂，置于1 L烧杯中。
NaCl 175.3 gNaH2PO4·H2O 27.6 gNa2EDTA·2H2O 7.4 g2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 加NaOH调节pH值至7.4（约6.5 ml的10 N NaOH）。
4. 加去离子水将溶液定容至1 L。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
■组份浓度1%（W/V） Ficoll 4001%（W/V） Polyvinylpyrrolidone1%（W/V） BSA■配制量 500 ml■配制方法 1. 称量下列试剂，置于500 ml烧杯中。
Ficoll 400 5 gPolyvinylpyrrolidone 5 gBSA 5 g2. 加去离子水约400 ml，充分搅拌溶解。
3. 加去离子水将溶液定容至500 ml。
4. 用0.45 μm滤器过滤后，分装成每份25 ml。
5. -20℃保存。
0.5 M磷酸盐BufferSalmon DNA (鲑鱼精DNA)DNA变性缓冲液■组份浓度 0.5 M Na2HPO4■配制量 1 L■配制方法 1. 称量134 g Na2HPO4·7H2O置于1 L烧杯中。
各种缓冲液配方
三、核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法50×TAE Buffer (pH8.5)组份浓度 2 M Tris-醋酸，100 mM EDTA配制量 1 L配制方法3.加入57.1 ml的乙酸，充分搅拌。
4.加去离子水将溶液定容至l L后，室温保存。
10×TBE Buffer (pH8.3)组份浓度890 mM Tris-硼酸，20 mM EDTA配制量 1 L配制方法3.加去离子水将溶液定容至l L后，室温保存。
10×MOPS(3-吗啉基丙磺酸)Buffer组份浓度200 rnM MOPS，20 mM NaOAc，10 mM EDTA配制量 1 L配制方法 1.称41.8 g MOPS，置于1 L烧杯中。
2.加约700 ml DEPC处理水，搅拌溶解。
3.使用2 N NaOH调节pH值至7.0。
6.用0.45 m滤膜过滤除去杂质。
7.室温避光保存。
注：溶液见光或高温灭菌后会变黄。
变黄时也可使用，但变黑时不要使用。
溴乙锭(10 mg/ml)组份浓度10 mg/ml溴乙锭配制量100 ml配制方法 1.称量1 g溴乙锭，加入到100 ml容器中。
2.加入去离子水100 ml，充分搅拌数h完全溶解溴乙锭。
3.将溶液转移至棕色瓶中，室温避光保存。
4.溴乙锭的工作浓度为0.5 g/ml。
注意：溴乙锭是一种致癌物质，必须小心操作。
Agarose凝胶配制方法 1.配制适量的电泳及制胶用的缓冲液(通常是0.5×TBE或1×TAE)。
2.根椐制胶量及凝胶浓度，准确称量琼脂糖粉，加入适当的锥形瓶中。
3.加入一定量的电泳缓冲液(总液体量不宜超过锥形瓶的50%容量)。
注：用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须统一。
4.在锥形瓶的瓶封上保鲜膜，并在膜上扎些小孔，然后在微波炉中加热熔化琼脂糖。
加热过程中，当溶液沸腾后，请戴上防热手套。
小心摇动锥形瓶。
使琼脂糖充分均匀熔化。
此操作重复数次，直至琼脂糖完全熔化。
蛋白质、核酸电泳相关溶液配制
蛋白质电泳相关试剂及缓冲液<说明：如下常规试剂配制方法仅供参考>30%（W/V）丙烯酰胺溶液l 组分浓度30%（W/V）Acryl amidel 配制量100mll 配制方法1.称取下列试剂，置于250ml烧杯中。
Acryl amide 38gBIS 2g2.向烧杯中加入约80ml的去离子水，充分搅拌溶解；最后定容至100ml，用0.45um滤膜过滤除杂。
3.置于棕色瓶中4℃保存。
（注意：丙烯酰胺具有强烈的神经毒性，可通过皮肤吸收并具有累积性，配制时应戴手套操作）40%（W/V）丙烯酰胺溶液l 组分浓度40%（W/V）Acryl amidel 配制量100mll 配制方法1.称取下列试剂，置于200ml烧杯中。
Acryl amide 29gBIS 1g2.向烧杯中加入约80ml的去离子水，充分搅拌溶解；最后定容至100ml，用0.45um滤膜过滤除杂。
3.置于棕色瓶中4℃保存。
（注意：丙烯酰胺具有强烈的神经毒性，可通过皮肤吸收并具有累积性，配制时应戴手套操作）10%（W/V）过硫酸铵l 组分浓度10%（W/V）过硫酸铵l 配制量10mll 配制方法1.称取1g过硫酸铵。
2.加入10ml的去离子水后搅拌溶解，贮存于4℃。
（注意：10%（W/V）过硫酸铵溶液在4℃保存能使用两周左右，过期会失去催化效果）5X Tris—Glycine Bufferl 组分浓度0.125M Tris，1.25M Glycine，0.5%(W/V) SDSl 配制量1Ll 配制方法1.称取下列试剂，置于1L的烧杯中Tris 15. 1gGlycine 94gSDS 5.0g2.加入约800ml的去离子水，搅拌溶解。
3.加入去离子水定容至1L后，室温保存。
2X SDS—PAGE Loading Buffer l 组分浓度100mM Tris—HC1 (pH6.8)4%(W/V) SDS0.2%(W/V) 溴酚蓝20%(V/V) 甘油2%(W/V) β—巯基乙醇l 配制量5mll 配制方法1.称取下列试剂，置于15ml塑料离心管中1M Tris—HC1 (pH6.8) 0.5mlSDS 0.2g溴酚蓝10mg甘油1ml2.加入去离子水溶解定容至5ml。
核酸、蛋白质杂交用相关试剂、缓冲液的配制方法
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蛋白相关试剂、缓冲液的配制方法
蛋白相关试剂、缓冲液的配制方法20% （W/V） Glucose配制量100ml配制方法:1. 称取20 g Glucose置于100～200 ml烧杯中，加入约80 ml 的去离子水后，搅拌溶解。
2. 加去离子水将溶液定容至100 ml。
3. 高温高压灭菌后，4℃保存。
0.5 M EDTA （pH8.0）配制量1 L配制方法:1. 称取186.1 g Na2EDTA•2H2O，置于1 L烧杯中。
2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌。
3. 用NaOH调节pH值至8.0（约20 g NaOH）。
4. 加去离子水将溶液定容至1 L。
5. 适量分成小份后，高温高压灭菌。
6. 室温保存。
注意：pH值至8.0时，EDTA才能完全溶解。
1 M DTT配制量50ml配制方法:1. 称取7.71g DTT，加入到100ml烧杯中。
2. 加50 ml的0.01 M NaAc（pH5.2），溶解后根据使用情况0.22um滤膜过滤除菌。
3. 适量分成小份后，-20℃保存。
30%丙烯酰胺（29：1）配制量1 L配制方法:1. 量取下列溶液，置于1 L烧杯中。
Acrylamide 290gBisacrylamide 10g2. 向烧杯中加入约600 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 加去离子水将溶液定容至1 L，用0.45um滤膜滤去杂质。
4. 于棕色瓶中4℃保存。
注意：丙烯酰胺具有很强的神经毒性，并可通过皮肤吸收，其作用具有积累性，配制时应戴手套等。
聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为有可能含有少量的未聚合成份。
5×Tris-甘氨酸电泳缓冲液组份浓度 0.125 M Tris, 1.25 M Glycine,0.5%（W/V）SDS配制量 1 L配制方法：1．称量下列试剂，置于1 L烧杯中。
2．取下列溶液，加入烧杯中。
Tris 15.1gGlycine 94gSDS 5g3. 加入约800 ml的去离子水，搅拌溶解。
实验室常用试剂缓冲液的配制方法
实验室常用试剂缓冲液的配制方法实验室中常常需要使用各种试剂和缓冲液，以下是一些常用试剂和缓冲液的配制方法及其用途。
1.NaCl溶液配制：NaCl作为实验室常用的盐类试剂，可用于生化、分子生物学等多个实验室操作中。
常用浓度为0.9%（w/v）的生理盐水。
配制方法如下：称取对应质量的NaCl加入蒸馏水中，搅拌溶解，用蒸馏水调整至最终体积。
2.血红蛋白溶液配制：血红蛋白溶液可用于实验室的一些生化、免疫学等实验。
常用方法如下：从新鲜血液中分离出血红蛋白，加入适量的生理盐水或缓冲液，控制pH值为7.4-7.6，并用密闭容器保存。
3. Tris-HCl缓冲液配制：Tris-HCl缓冲液在生物化学实验中广泛应用于DNA/RNA电泳、蛋白质电泳等实验。
常用方法如下：按需求称取Tris固体加入一定量的去离子水中，搅拌溶解，用强碱（比如氢氧化钠）或强酸（比如盐酸）调整pH值至所需范围。
1. Tris缓冲液配制：Tris缓冲液常用于酶反应、凝胶电泳等实验中，配制方法如下：称取适量的Tris固体加入适量的去离子水中，搅拌溶解，用浓盐酸或盐酸调节pH值至所需范围，并用去离子水稀释至最终体积。
2.PBS缓冲液配制：PBS缓冲液在生物学实验中用于细胞培养、免疫染色等操作中。
配制方法如下：称取适量的NaCl、KCl、Na2HPO4、KH2PO4固体加入适量的去离子水中，搅拌溶解，并用去离子水稀释至最终体积，调整pH值至所需范围。
3. Tris-Borate-EDTA（TBE）缓冲液配制：TBE缓冲液常用于核酸凝胶电泳中，配制方法如下：称取适量的Tris固体加入适量的去离子水中，搅拌溶解，用浓盐酸或盐酸调节pH值至所需范围，然后加入Boric acid和EDTA固体，继续搅拌溶解，并用去离子水稀释至最终体积。
以上仅是一些常见的试剂和缓冲液的配制方法，实验室中还会使用到很多其他试剂和缓冲液。
在配制试剂和缓冲液时，需要注意选择合适的纯度的试剂、使用无菌器具和操作台，并遵循相应的实验操作规范和安全要求。
缓冲液的配制方法
核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法50 X TAE Buffer (pH8.5)组份浓度 2 M Tris-醋酸，100 mM EDTA配制量 1 L配制方法 1.称量下列试剂，置于1 L烧杯中2•3. 加入57.1 ml的乙酸，充分搅拌。
4•加去离子水将溶液定容至I L后，室温保存。
10 X TBE Buffer (pH8.3)组份浓度890 mM Tris-硼酸，20 mM EDTA配制量1 L配制方法l.称量下列试剂，置于I L烧杯中。
2•3•加去离子水将溶液定容至l L后，室温保存。
10 XM0PS（3-吗啉基丙磺酸）Buffer组份浓度200 rnM MOPS , 20 mM NaOAc , 10 mM EDTA配制量 1 L配制方法 1.称41.8 g MOPS，置于1 L烧杯中。
2. 加约700 ml DEPC处理水，搅拌溶解3. 使用2 N NaOH 调节pH值至7.0。
4. 再向溶液中加入下列试剂。
5. 用DEPC处理水将溶液定容至1 L6. 用0.45 m滤膜过滤除去杂质。
7. 室温避光保存。
注：溶液见光或高温灭菌后会变黄。
变黄时也可使用，但变黑时不要使用溴乙锭(10 mg/ml)组份浓度10 mg/ml溴乙锭配制量100 ml配制方法 1.称量1 g溴乙锭，加入到100 ml容器中。
2. 加入去离子水100 ml，充分搅拌数h完全溶解溴乙锭3. 将溶液转移至棕色瓶中，室温避光保存。
4. 溴乙锭的工作浓度为0.5 g/ml注意：溴乙锭是一种致癌物质，必须小心操作Agarose 凝胶配制方法 1.配制适量的电泳及制胶用的缓冲液（通常是0.5 X TBE或1 X TAE）。
2. 根椐制胶量及凝胶浓度，准确称量琼脂糖粉，加入适当的锥形瓶中。
3. 加入一定量的电泳缓冲液（总液体量不宜超过锥形瓶的50%容量）。
注：用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须统一。
4. 在锥形瓶的瓶封上保鲜膜，并在膜上扎些小孔，然后在微波炉中加热熔化琼脂糖。
实验常用试剂、缓冲液的配制方法
实验常用试剂、缓冲液的配制方法Ampicillin（氨卡青霉素）100mg/ml□组份浓度100mg/ml Ampicillin□配制量50mL□配置方法 1.称量5g Ampicillin置于50mL离心管中。
2.加入40mL灭菌水，充分混合溶解后，定容至50mL。
3.用0.22μm滤膜过滤除菌。
4.小份分装（1mL/份）后，-20℃保存。
Kan（卡那霉素）50mg/ml□组分浓度50mg/ml卡那霉素□配制量50mL□配制方法 1.称取2.5g卡那霉素置于50ml塑料离心管中。
2.加入40ml灭菌水，充分混合溶解之后定容至50mL。
3.用0.22μm 滤膜过滤除菌。
4.小份分装（1mL/份）后，-20℃保存。
IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷) 24 mg/ml□组份浓度24mg/L IPTG□配制量50mL□配置方法 1.称量1.2gIPTG置于50mL离心管中。
2.加入40mL 灭菌水，充分混合溶解后，定容至50mL。
3.用0.22μm 滤膜过滤除菌。
4.小份分装（1mL/份）后，-20℃保存。
X- Gal 20mg/m□组份浓度20mg/L X-Gal□配制量50mL□配置方法 1.称取1gX-Gal置于50mL离心管中。
2.加入40mL DMF（二甲基甲酰胺），充分混合溶解，定容至50mL。
3.小份分装（1mL/份）后，-20℃避光保存。
LB培养基□组份浓度1％（W/V）Tryptone，0.5％（W/V）Yeast Extract，1％（W/V）NaCl□配制量1L□配置方法 1.称量下列试剂，置于1L烧杯中Tryptone（胰化蛋白胨）10gYeast Extract（酵母提取物）5gNaCl（氯化钠）10g2.加入约800mL 的去离子水，充分搅拌溶解。
3.滴加5N NaOH（约0.2mL），调节pH值至7.2-7.3。
4.加去离子水定容至1L。
5.高温高压灭菌后，4℃保存。
一、实验室常用试剂、缓冲液的配制方法
一、实验室常用试剂、缓冲液的配制方法1 M Tris-HCl(pH7.4，7.6，8.0)组份浓度 1 M Tris-HCl配制量1L配制方法 1.称量121.1 g Tris置于l L烧杯中。
2.加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
5.高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高l℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
1.5 M Tris-HCl(pH8.8)组份浓度 1.5 MTris-HCl配制量 1 L配制方法 1.称量181.7 g Tris置于1 L烧杯中。
2.加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3.用浓HCl调节pH值至8.8。
4.将溶液定容至1 L。
5.高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高l℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
1 0×TE Buffer (pH7.4, 7.6，8.0)组份浓度100 mM Tris-HCl，10 mM EDTA配制量 1 L配制方法3.将溶液定容至1 L后，高温高压灭菌。
4.室温保存。
3 M醋酸钠(pH5.2)组份浓度 3 M醋酸钠配制量100 ml配制方法 1.称量40.8 g NaOAc·3H2O置于100~200 ml烧杯中，加入约40 ml 的去离子水搅拌溶解。
2.加入冰醋酸调节pH值至5.2。
3.加去离子水将溶液定容至100 ml。
4.高温高压灭菌后，室温保存。
PBS Buffer组份浓度137 mM NaCl，2.7 mM KCl，10 mM Na2HPO4，2 mM KH2PO4 配制量 1 L配制方法3.滴加浓HCl将pH值调节至7.4，然后加入去离子水将溶液定容至1 L。
4.高温高压灭菌后，室温保存。
注意：上述PBS Buffer中无二价阳离子，如需要，可在配方中补充1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。
实验常用试剂、缓冲液的配制方法
实验常用试剂、缓冲液的配制方法1、1M Tris-HCl□组份浓度1 M Tris-HCl（pH7.4，7.6，8.0）□配制量1L□配置方法1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
pH值浓HCl7.4 约70mL7.6 约60mL8.0 约42mL4. 将溶解定容至1L。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH 值随温度的变化差很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2、1.5 M Tris-HCl□组份浓度1.5 M Tris-HCl（pH8.8）□配制量1L□配置方法1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。
2. 加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 用浓盐酸调pH值至8.8。
4. 将溶液定容至1L。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
3、10×TE Buffer□组份浓度100 mM Tris-HCl，10 mM EDTA （pH 7.4，7.6，8.0）□配制量1L□配置方法1. 量取下列溶液，置于1L烧杯中。
1 M Tris-HCl Buffer（pH7.4，7.6，8.0）100mL500 mM EDTA（pH8.0）20mL2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水，均匀混合。
3. 将溶液定至1L后，高温高压灭菌。
4. 室温保存。
4、3 M 醋酸钠□组份浓度3 M 醋酸钠（pH5.2）□配制量100mL□配置方法1. 称取40.8gNaOAc•3H2O置于100～200mL烧杯中，加入约40mL的去离子水搅拌溶解。
2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。
3. 加入去离子水将溶液定容至100mL。
蛋白相关试剂缓冲液的配制方法
蛋白相关试剂缓冲液的配制方法
抗体配制方法
一、特定抗体的提取
2.在每次提取过程中，加入相应浓度的硫酸钠缓冲液，保护免疫复合物，同时阻止抗原血清中的细菌性污染物的滋生。
3.当抗原血清的浓度达到0.5-1.0mg/ml时，抗原复合物被充分溶解，可以进行下一步处理。
二、特定抗体的纯化
1.将提取的抗原复合物用合成吸附树脂进行吸附，使特定抗体固定在
树脂上，同时有效去除抗原血清中的其他杂质。
2.在酸性条件下用特定的离子交换树脂洗涤抗原复合物，进行特定抗
体的分离；
3.使用异丙醇溶液洗涤去除吸附在树脂上的抗体，并使抗体浓度达到
目的浓度，完成纯化工艺。
三、缓冲液的配制
1.选择相应的缓冲液，如磷酸盐缓冲液、乙酸乙酯缓冲液等，根据想
要获取的抗体类型进行选择。
2.按比例称取缓冲液组分，按照比例增加，使缓冲液的pH值达到
6.5-
7.5
3.将缓冲液加入容器中，进行超声消化，使缓冲液更加稳定，减少活
性物质的损失。
4.用透析膜过滤，去除缓冲液中的残留颗粒物，保证缓冲液的纯度。
5.完成缓冲液的配制。
蛋白质电泳相关试剂缓冲液的配制方法
蛋白质电泳相关试剂缓冲液的配制方法一、电泳缓冲液配制1、Tris-HCl缓冲液Tris-HCl(缩写为Tris-HCl)缓冲液由于特性稳定，被广泛用于蛋白质电泳的缓冲液中。
Tris-HCl缓冲液的常用配制方法：将三氯氢氧化钠(Tris)和盐酸(HCl)用distilled water精制后，加入一定比例的Tris和HCl，按照如下的配比配制：Tris：HCl(25mM:1M)具体操作步骤如下：A、将Tris和HCl加到适量的distilled water中，并搅拌均匀，直至完全溶解为止；B、再另外精制distilled water，添加到配制好的缓冲液中，搅拌均匀；C、最后检查实验液的pH值，确保PH值为7.2～7.4，如果需要，可以适当增加Tris或HCl的比例重新配制；D、最后将Tris-HCl缓冲液装入实验容器中，待用。
2、SDS-缓冲液碳酸氢盐-尿素-树脂素电泳(Carboxyhydrate-urea-resin electrophoresis, SDS-)是一种广泛用于蛋白质定性分析的电泳方法，其所用的缓冲液主要包括Tris-glycine-SDS（TGS）和Tris-acetate-SDS （TAS）两种。
A、TGS缓冲液Tris-glycine-SDS(TGS)缓冲液是SDS-常用的缓冲液，其配制方法如下：将三氯氢氧化钠(Tris)，甘氨酸(Glycine)以及十二烷基三硫化铵(Sodium dodecyl sulfate，缩写为SDS)加入适量的distilled water 中，按照如下的比例配制：Tris：Glycine：SDS（25mM:192mM:0.1%）具体操作步骤如下：A、将Tris和Glycine加到distilled water中，并搅拌均匀。
蛋白相关试剂及缓冲液配制
Bradford 工作液
配 制 量： 配制方法：
配方：
5%(V/V) 乙醇 8.8%(V/V) 磷酸 0.07m g/ml 考马斯亮蓝 G-250
1L
1. 量取 850ml ddH2O 于烧杯中 2. 加入 30ml 无水乙醇，60ml 88%的浓磷
酸 3. 再添入 60ml Bradford 储液，混匀 4. 用 0.45um 滤纸过滤除杂 5. 棕色瓶中 4℃保存数周 6. 长时间保存后，需再过滤后使用
蛋白相关试剂的配制
PMSF
配 制 量： 配制方法：
配方： 10mg/ml PMSF
500ml
1. 称取 5g PMSF 溶于 500ml 异丙醇中 2. 常温保存 1 年以上 注意：PMSF 有剧毒，需小心操作
5配制方法：
配方：
50mM Tris-HCl pH=8.0
解，定容至 100ml 3. 用 0.22um 滤膜过滤灭菌 4. 4℃保存或-20℃分装保存 注意：为减少变性，须将蛋白加入水中
1mg/ml BSA
配 制 量： 配制方法：
配方： 1mg/ml BSA
50ml
1. 吸取 5ml 灭菌的 BSA(10mg/ml)加入到 50ml 离心管中
2. 加入 45ml 的灭菌 ddH2O，混匀 3. 分装于灭菌的 1.5ml 离心管中，-20 度
脱色液
配 制 量： 配制方法：
配方：
10%(V/V)甲醇 10%(V/V)冰醋酸
1L
1. 在 800ml D-H2O 中加入 100ml 甲醇 2. 再加入 100ml 冰醋酸 3. 混匀，室温保存
5M Betaine 甜菜碱
配 制 量： 配制方法：
蛋白质电泳相关试剂、缓冲液的配制
组份浓度 配制量 配制方法
0.1%（W/V）考马斯亮蓝R-250, 25%（V/V） 异丙醇, 10%（V/V） 冰醋酸
1L
1. 称取1 g考马斯亮蓝R-250，置于1 L烧杯中。 2. 量取250 ml的异丙醇加入上述烧杯中，搅拌溶解。 3. 加入100 ml的冰醋酸，搅拌均匀。 4. 加入650 ml的去离子水，搅拌均匀。 5. 用滤纸除去颗粒物质后，室温保存。
组份浓度 配制量 配制方法
10%（V/V）醋酸, 5%（V/V）乙醇 1L 1. 量取下列溶液，置于1 L烧杯中。
2. 充分混合后使用。
组份浓度 配制量 配制方法
组份浓度 配制量 配制方法
组份浓度 0.4%（W/V）AgNO3, 1%（V/V）浓NH3·H2O, 0.04%（W/V）NaOH
配制量 配制方法
蛋白质电泳相关试剂、缓冲液mide
组份浓度 配制量 配制方法
30%（W/V）Acrylamide 1L 1. 称量下列试剂，置于1 L烧杯中。
40% (W/V) Acrylamide
2. 向烧杯中加入约600 ml的去离子水，充分搅拌溶解。 3. 加去离子水将溶液定容至1 L，用0.45 µm滤膜滤去杂质。 4. 于棕色瓶中4℃保存。 注意：丙烯酰胺具有很强的神经毒性，并可通过皮肤吸收，其作用具有积累性，配制时应戴 手套等。聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为有可能含有少量的未聚合成份。
10% (W/V) 过硫酸铵
组份浓度 配制量 配制方法
5×Tris-Glycine Buffer (SDS-PAGE电泳缓冲 液)
组份浓度 配制量 配制方法
0.125 M Tris, 1.25 M Glycine, 0.5%（W/V）SDS 1L 1. 称量下列试剂，置于1 L烧杯中。
tne缓冲液的功能主治
TNE缓冲液的功能主治1. 什么是TNE缓冲液？TNE缓冲液是一种常用的实验室试剂，其中的TNE代表三种核酸碱基（Thymidine、Nicotinamide、Ethylenediamine），常用于许多生物学实验和研究中。
2. TNE缓冲液的配方TNE缓冲液的配方如下：•NaCl：100mM•Tris-HCl：10mM （pH 7.5）•EDTA：1mM•Triton X-100：0.1%以上配方根据实验的需求可以进行调整，但通常可以作为基础的TNE缓冲液配方。
3. TNE缓冲液的功能TNE缓冲液具有多种功能，在生物学研究中起到重要作用。
3.1 细胞裂解•TNE缓冲液可用于细胞裂解的目的，其中的Triton X-100可以破坏细胞膜，释放细胞内的成分。
3.2 核酸提取•TNE缓冲液可以用于核酸的提取和纯化。
其中的EDTA可以抑制核酸酶的活性，保护核酸不被降解。
•TNE缓冲液的pH值适中，利于核酸的稳定。
3.3 蛋白质分析•TNE缓冲液可以用于蛋白质的裂解和分析。
其中的Tris-HCl可以调整溶液的pH值，使得裂解和分析过程中维持适宜的酸碱条件。
•Triton X-100可以使得蛋白质释放出来，并维持蛋白质的可溶性。
3.4 免疫检测•TNE缓冲液可以用于免疫检测中的洗涤步骤。
其中的NaCl可以用于调节检测抗体和抗原之间的结合反应。
•Triton X-100可以用于破坏非特异性的相互作用，减少背景信号。
3.5 其他应用•TNE缓冲液还可用于DNA/RNA杂交技术、制备细胞裂解液等。
4. TNE缓冲液的主治TNE缓冲液主要用于细胞裂解、核酸提取和蛋白质分析等与基因表达和调控相关的实验中，具体包括但不限于以下主治：•细胞裂解和组织溶解：TNE缓冲液能有效裂解各种细胞和组织，保持细胞成分的完整性。
•核酸提取：TNE缓冲液可用于DNA和RNA的提取、纯化和保存，适用于分子生物学实验中对核酸的需求。
•蛋白质分析：TNE缓冲液可用于蛋白质的裂解、提取、分析和保存，适用于蛋白质组学研究中的需要。
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核酸、蛋白质杂交用相关试剂、缓冲液的配制方法
20×SSC 组份浓度
配制量
配制方法 3.0 M NaCl, 0.3 M 柠檬酸钠1 L 1. 称量下列试剂，置于1 L
烧杯中。
2. 向烧杯中加入约800 ml 的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 滴加14 N HCl ，调节pH 值至7.0后，加去离子水将溶液定容至1 L 。
4. 高温高压灭菌后，室温保存。
20×SSPE Buffer 组份浓度
配制量
配制方法 3.0 M NaCl, 0.2 M NaH 2PO 4, 0.02 M EDTA 1 L 1. 称量下列试剂，置于1 L
烧杯中。
2. 向烧杯中加入约800 ml 的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 加NaOH 调节pH 值至7.4（约6.5 ml 的10 N NaOH)。
4. 加去离子水将溶液定容至1 L 。
5. 高温高压灭菌后，室温保存。
50×Denhardt's
溶液
500 ml
1. 称量下列试剂，置于500 ml
烧杯中。
2. 加去离子水约400 ml ，充分搅拌溶解
3. 加去离子水将溶液定容至500 ml 。
4. 用0.45 µm 滤膜过滤后，分装成每份25 ml 。
5. -20℃保存。
组份浓度
配制量
配制方法0.5 M Na 2HPO 41 L 1. 称量134 g Na 2HPO 4·7H 2O 置于1 L 烧杯中。
2. 加入约800 ml 的去离子水充分搅拌溶解。
3. 加入85%的H 3PO 4（浓磷酸）调节溶液pH 值至7.2。
4. 加去离子水定容至1 L 。
5.
高温高压灭菌后，室温保存。
组份浓度配制量配制方法10 mg/ml Salmon DNA
约100 ml
1. 称取鲑鱼精DNA 2 g置于500 ml烧杯中，加入约200 ml的TE Buffer。
2. 用磁力搅拌器室温搅拌2～4小时，溶解后加入4 ml的5 M NaCl，使其终浓度为0.1 M。
3. 用苯酚和苯酚/氯仿各抽提1次。
4. 回收水相溶液后，使用17号皮下注射针头快速吸打溶液约20次，以切断DNA。
5. 加入2倍体积的预冷乙醇进行乙醇沉淀。
6. 离心回收DNA后，溶解于100 ml的去离子水中，测定溶液的OD260值。
7. 计算溶液的DNA浓度后，稀释DNA溶液至10 mg/ml。
8. 煮沸10分钟后，分装成小份（1 ml/份)。
-20℃保存。
9. 使用前在沸水浴中加热5
分钟后，迅速冰浴冷却。
组份浓度
配制量
配制方法
100 ml
1.称量下列试剂，置于200 ml
烧杯中。
2.充分混匀后，使用0.45 µm
滤膜滤去杂质后使用。
100 ml
1. 称量下列试剂，置于200 ml
烧杯中。
2. 充分混匀后，使用0.45 µm滤膜滤去杂质后使用。
组份浓度
配制量
39 mM Glycine, 48 mM Tris, 0.037% (W/V) SDS, 20% (V/V) 甲醇
1 L
配制方法 1. 称量下列试剂，置于1 L
烧杯中。
2. 向烧杯中加入约600 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 加去离子水将溶液定容至800 ml后，加入200 ml的甲醇。
4. 室温保存。
组份浓度配制量配制方法20 mM Tris-HCl, 150 mM NaCl, 0.05%（V/V）Tween 20 1 L
1. 称量下列试剂，置于1 L
烧杯中。
2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解。
3. 加入0.5 ml Tween 20后充分混匀。
4. 加去离子水将溶液定容至1 L后，4℃保存。
组份浓度配制量配制方法5%（W/V）脱脂奶粉/TBST Buffer
100 ml
1. 称量5 g脱脂奶粉加入到100 ml的TBST Buffer中，充分搅拌溶解。
2. 4℃保存待用（本封闭液应该现配现用)。