汪氏敏清药理实验资料
血清药理幻灯
与非灭活血清比较a p＜0.05， b p＜0.01 血清来源：大鼠； 细胞系：小鼠3T3细胞株。
21
4血清的灭活 血清的灭活
附表4-2 灭活与否对含药血清生物活性的影响（一） 某药物含药血清对病毒致细胞病变作用的影响
组别 时-效曲线下面积 灭活前 4.386 3.412 4.532 2.175 3.721 4.653 5.132 2.876 4.198 3.652 灭活后 2.412 1.569 2.261 1.262 2.121 2.583 2.155 1.524 2.543 2.528 下降率（%） 45 54 50 42 43 44 58 47 38 31
空白血清 30 60 90 120
19.00±2.97 46.33±10.52 20.67±8.29 8.17±1.94 b 9.33±1.53 a
— -143.84 -8.79 57.00 50.89
18.33±3.50 13.50±2.26 a 14.33±6.02 10.33±2.58 b 15.67±4.23
T1/2分布范围是12min ~ 150h，符合正态分 布，T1/2＞3h的药物有216个，占67% （216/412）。若每日给药2次，间隔12h，那 么T1/2＞3h的药物均可产生蓄积。
18
3动物给药及采血方案的设计 动物给药及采血方案的设计
依据上述推论得到实验通法。通法规定，口 服给药，每日2次，间隔12h，连续给药3天， 末次给药后1h采血，总体而言中药成分中约 67%可能具有蓄积作用，再加上无蓄积性 但在其口服后1h在Tmax内的68个药品，占 412个药品中的16.5%，两者相加可达 83.5%。
— 14.45 12.51 19.08 0.67
板蓝根水提物的HPLC指纹图谱
中总黄酮提取率(总黄酮提取率=总黄酮质量 金莲花质量×100%)。
214 正交试验结果及方差分析:结果见表2,方差分析见表3。
表2 正交试验结果Table2 Results of orthogonal test试验号A B C D(空白)总黄酮提取率 % 111112120212225131313335160421234124522315168623125183731323153832135107933216141K11311191971311014129K215175161061519614167K315101171841418114191R2164717821860162表3 方差分析结果Table3 Results of var i ance analysis方差来源离均差平方和自由度均方F值显著性A11242016217171B1113525168162114P<0101C11382016919171P<0105 D(误差)01072 01035 F0105(2,2)=1910 F0101(2,2)=9910 从直观分析可知,极差最大的为B因素,其次为C因素和A因素。
说明B因素即温度的改变对金莲花总黄酮的提取影响最大,其次为提取时间和加水量。
由于金莲花为花类药材,其体积较大,相对用水量较大才能浸泡完全。
根据正交试验结果,提取工艺最佳组合条件为A2B3C2,即提取溶剂为金莲花药材的30倍量,提取温度为100℃,提取时间为30 m in。
215 验证试验:按优选的最佳提取工艺制备4批样品,测定样品中总黄酮,结果提取出的总黄酮吸光度最高,药材中总黄酮提取率平均高达6149%。
3 讨论 金莲花除主要含有黄酮类化合物以外,还含有挥发油成分,长时间加热包括提取和浓缩时的加热,将不利于这些成分的稳定[5]。
试验也证明,即100℃提取时间为60m in时的总黄酮提取率比提取30 m in低11103%。
嗅敏灵的药效学实验研究
液器 ， 解剖剪 ， 眼科镊 ， 漏斗， 试管架， 吸耳球 ， 刻度试管 。 １３ 动物 ． ｌ 【 Ｍ种小 鼠， 体质量 １～ ５ ， ８ ２ 雌雄兼用 ， ｇ 由兰州
表 １ 嗅 敏 灵对 二 甲 苯所 致 小 鼠耳 肿 胀 的 影 响
注： 与对 照组 比较 ， ０ ０ ， Ｏ Ｏ。 ห้องสมุดไป่ตู้ ５‘ ． １
样 本 上清 液 于波 长 ５ ０ ｍ处测 定 光 密度 ， ９ ｎ 以光 密度 值 表 示染 料 渗 出程 度 。
量 １ ～ ２ｇ小 鼠 ５ ， ８ ２ ６只 雌雄 各半 ， 按性别 体质量 随机 分为
ＡＢｃＤ 、、 、 ， ４组 各组 小鼠腹部用脱毛剂脱毛。 后 Ａ组小 鼠 ２ｄ
分 别 用 扭 力 天 平称 重 ， 以两 耳 重 量 差 为肿 胀 度 ， 并计 算 肿 胀
中药化学教研室制备； 醋酸氟轻松软膏， 皖药准字 （０ １ 第 ２０）
Ｘ０ ９ ６号 ， 湖 三 益 制 药 有 限 公 司 ， 号 ：２ ３ ３ 丙 酮 ， ０３３ 芜 批 ００ ０ ；
天津 化学试剂 有限公司 ； 甲苯 ， 二 天津化学试剂二 厂： 磷酸 组织胺 ， 中科院上海生化研究所生产， 批号 ：０ ０９ 伊文 氏 ０ １３ ； 蓝， 上海化 学试剂采购站 ； 脱毛剂 ， 自制。
２２ 对二 甲苯所致小 鼠腹部 皮肤 炎症 的影 响 ．
取体质
位取 相同面积 ， 用手术剪剪碎后放入具塞玻璃试管 内， 加入 丙酮 一生理盐水 （： ８ Ｌ 加盖后置暗处放置 ， 日轻轻摇动 １ ） ， １ ｍ 每 ２ ３次， 天后各管用滤纸过滤， ～ ３ 以丙酮 一生理盐水校零， 取各
灵 ０２ｇ ． ／只 ； Ｄ组 同法 涂 抹 嗅 敏 灵 ０ １ ／只 。给 药 ３ ｉ ． ｇ ０ｍ ｎ
抗痴呆药_吡咯烷酮乙酰胺的合成
抗痴呆药α－吡咯烷酮乙酰胺的合成第11期作者简介：智翠梅(1977-)，女，山西应县人，太原科技大学化学与生物工程学院教师，硕士，主要从事教学工作。
*通讯联系人α-吡咯烷酮乙酰胺通用名为吡拉西坦，是一种延缓衰老、改善中老年记忆衰退、防治血管性痴呆的有效药物。
该药主要用于脑动脉硬化及脑血管意外损伤所致的记忆和思维功能减退，为临床上常用的治疗脑血管疾患药物。
它可以促进磷脂及氨基酸吸收，增加大脑内蛋白质的合成，增进生物体内激酶的活性，保护外源性刺激对大脑的损伤。
动物实验表明，该药能推迟缺氧性记忆障碍的产生，提高大脑对葡萄糖的利用率和能量储备，改善大脑功能。
本研究采用通氨气的方法对α-吡咯烷酮乙酸乙酯进行氨解，并讨论了氨解的温度及时间、静置的温度及时间及反应物配比对转化率的影响。
1实验部分1.1试剂与仪器α-吡咯烷酮乙酸乙酯，实验室自制；乙醇为分析纯，天津市科密欧化学试剂开发中心；异丙醇为分析纯，北京化三助剂研究所；活性炭为分析纯，北京光华木材厂；氨气，氨含量≥99.8%，山西丰喜肥业公司。
1730傅立叶变换红外光谱仪,美国P-E 公司；2XZ-1型旋片式真空泵,浙江黄岩医疗器械厂；SB2型薄层色谱仪,上海仕博生物技术有限公司；PE-2400CHN 自动元素分析仪,北京泰克仪器有限公司；WZS 阿贝折射仪，上海光学仪器厂；XT-4型双目视显微熔点仪，北京电子光学设备厂。
1.2α－吡咯烷酮乙酰胺的合成。
合成路线[1]见图1。
图1α-Fi g1S i c r of α-oxo-1-pyr ol i di i 1.2.1氨化500mL 三口瓶内加入60mL 乙醇，置于冰盐水中，开动搅拌，使瓶内温低于0℃，然后通入氨气，尾气经乙醇吸收后排放。
通氨约3h 后测反应液质量，增加约20％后加入α－吡咯烷酮乙酸乙酯34.2g （0.2mol ），保持反应液温度低于10℃，通氨约4h ，观察通氨前后乙醇吸收瓶中气泡量大致相同后停止通氨。
藏药翁布提取物对CCl4所致小鼠肝损伤的保护作用研究
作 者 简 介 ： 敏 （９ １ ）女 ， 鲍 １ ７ 一 ， 四川 乐 至 县 人 ， 副教 授 ， 士 ． 硕
பைடு நூலகம்
４ ４
青海师 范大 学学报 （ 自然科 学版 ）
２１ ０ ０血
取小 鼠 ５ ０只 ， 雌雄 各半 ， 机分 ５组 ， 组按 表 １所示 的药 物及 剂 量 灌 胃（ｇ ７ ， 随 各 ｉ） ｄ 于末 次 给 药 ２ｈ 后， 除正 常对照组 以外其 余组 均腹 腔注射 （ｐ ０ １ Ｃ １（０ｍｌｋ ） 禁食 （ 禁水 ） ６ｈ之 后 ， 动 脉取 ｉ） ． Ｃ １ ／ ｇ ， 不 １ 颈 血 ， ，０ ｐ 离 心 ， 离血 清 ； 肝称重 ， ２ ０ ０ｒｍ 分 取 用冷 生理盐 水 （ Ｓ ） 净血 污 ， 干备用 ． Ｎ． ． 洗 吸
第 Ｏ １号 ） ． １ ２ 药 品 和 试 剂 ．
翁布 （ ｒｃｒａｐ ｎｃ ｌｔ ．Ｙ Ｍｙ ｉ ｉ ａ ｉｕａａ Ｐ ．Ｚ ａ ｇｅ ａ ｈ ｎ ｔ Ｙ．Ｊ ｈ ｎ ） 采 自青海 省祁 连县 ， ．Ｚ ａ ｇ ， 海拔 ２ ０ ｍ， ３ ０ 由青
海师范 大学 生命 与地理 科学 学 院吴学 明教授 鉴定． 核 黄素 ， 氯化 硝基 四氮 唑 兰 ， 甲硫 氨 酸 （ ｔ ， Ｍｅ） 四氯 化 碳 （ Ｃ （ 用 前 配 制 成 ０ １ 的 橄 榄 油溶 Ｃ １） 使 ．％
中图 分 类 号 ： ６ １ ４ ０ ４ ． 文献标识码 ： Ａ 文 章 编 号 ： ０ １ ５ ２ ２ １ ） １ ０ ４ —０ １ ０ —７ ４ （ ０ ０ Ｏ — ０ ３ ４
藏 药翁布 原植 物 为柽柳科 （ ｍａｉａｅｅ 水柏 枝属 （ ｒｃ ｒａＤ ｓ．１ ２ ） Ｔａ ｒ ｃａ ） ｃ Ｍｙ ｉ ｉ ｅｖ ８ ５ Ｚ春 水柏 枝 （ ｒｃｒ ａ Ｍｙ ｉａ — ｉ ａ ｉ ｌｔ ．Ｙ．Ｚ ａ ｇ ｅ Ｙ．Ｊ ｈ ｎ ） 灌 木 ， 传 统 藏 药 ， 泛 分 布 于 我 国 西 部 海 拔 ２ ０ ０ ａｐ ｎｃ ａａ Ｐ ｕ ｈ ｎ ｔ ．Ｚ ａ ｇ ， 为 广 ， ０ ～ ２ ９ ０ｍ的藏 区 ， ，０ 其药 用部 分为 干燥 嫩枝 ． 具有 清 热解毒 ， 风 、 表 、 疏 解 透疹 、 咳等 功 效 ， 止 主治麻 疹不
以DL-樟脑-10-磺酸为离子对试剂反相高效液相色谱测定血浆中小檗碱的含量
脑－０磺酸 ＣＡ 购自中国科学院上海分院申科技 １－ Ｓ
术装备公司 。 （ 色谱条件 二）
综合考虑小檗碱与内标的分离度及生物样品中
的杂质和溶 剂负峰 的干扰作 用 ， 我们选 择 Ｃ Ａ的浓 Ｓ 度 为 ２ｍ ｏ， ０ ｍ ｌ并在流动相 中添加 了 ０５ ． ％的二 乙胺 。 在此 条件下 ， 完全避免各 种杂质的 干 ， 可 扰 小檗碱 与
０９ｇｍ ． ／。 （ 样 品处理 三）
内标可得到完全的分离， 保留时间分别为 ５４ｍｎ ．１ｉ和 ７５ｍｎ图２。 ．３ｉ 与之相比， 用庚烷磺酸和十二烷基磺
酸 钠 Ｓ Ｓ 为离子对 试剂均 不能在 这样 短的时 间内 Ｄ） 使小檗碱和 １ 甲基小檗碱 完全分离 。 ３ 丙酮具有粘度低 、 、 价廉 无毒等优点 ， 在溶剂选择 性 的分组上与 乙腈同属 组［， 因其 紫外截 止波 长 ８但 ］ 为 ３０ｍ， 了其应用范围 。 ３ｎ 限制 小檗碱在 ３５ｍ处具 ４ｎ 有最大 吸收 ， 故我们以丙酮取代 乙腈配制 流动相 ， 取 得 了良好的效果 。 （ 工作 曲线和检测 限 二）
进一步探讨 。 致谢 实验 中曾得到上海市药 品检验所张 叔 良
老师、 武汉市药品检验所周元瑶老师的指导和帮助，
在此一并致 谢。 参 考 文 献 ８） ６ ８ ９
［ ］ ｒ Ｎｅ Ｊ ｅ ａ． Ｃｉ．Ｃ ｒｉｌ１ （） ２ ３ １８ ） ２Ｍａｉ ｔ Ａ ｌ ， ｌ ｎ ｏ ｔ ｎ ａｄ ， １４ ，５ （ ９ ８ ． ｏ
取健康 人血 浆配 制成 含小 檗碱 的血浆 标准 液 。
（ 生物样 品的预处理 四）
药理学汪纯凤
环丙沙星药理学研究概述（汪纯凤化学工程与技术122081700221）环丙沙星是1978年在喹诺酮结构中引入氟原子合成第三代氟喹诺酮诺氟沙星后又相继在伊氟沙星、培氟沙星、氧氟沙星之后，在1983年合成的可与三、四代头孢媲美的广谱、高效抗生素，系目前喹诺酮类中应用最广泛的品种。
环丙沙星由联邦德国拜尔药厂首创，我国自20世纪90年代开始生产并投入临床使用。
1.药理作用及特点环丙沙星具广谱抗菌作用，尤其对需氧革兰阴性杆菌的抗菌活性高，对下列细菌在体外具有良好抗菌作用：肠杆菌科的大部分细菌，包括枸椽酸杆菌属、阴沟、产气肠杆菌等肠杆菌属、大肠埃希菌、克雷伯菌属、变形杆菌属、沙门菌属、志贺菌属、弧菌属、耶尔森菌等。
常对多重耐药菌也具有抗菌活性。
对青霉素耐药的淋病奈瑟菌、产酶流感嗜血杆菌和莫拉菌属均具有高度抗菌活性。
对铜绿假单胞菌等假单胞菌属的大多数菌株具抗菌作用。
环丙沙星对甲氧西林敏感葡萄球菌具抗菌活性，对肺炎链球菌、溶血性链球菌和粪肠球菌仅具中等抗菌活性。
对沙眼衣原体、支原体、军团菌具良好抗微生物作用，对结核杆菌和非典型分枝杆菌也有抗菌活性。
对厌氧菌的抗菌活性差。
环丙沙星为杀菌剂，通过作用于细菌DNA螺旋酶的A亚单位，抑制DNA的合成和复制而导致细菌死亡。
2.作用机理环丙沙星通过抑制细菌的DNA回旋酶而影响DNA合成。
DNA回旋酶是由两个亚单位A和另个亚单位B组成的四聚体。
亚单位A切断DNA双联，使另一侧的DNA链同过切口并重新连结。
这一过程所需的能量由具有ATP酶活性的亚单位A应用后，其新出现的不良反应相继报道，现综述如下。
的抑制剂，通过形成药物一DNA一酶多合物而抑制，通过形成药物一DNA的复制，导致细菌死亡。
3.不良反应环丙沙星常见的不良反应为恶心，呕吐，腹泻，头晕，头痛，皮疹，瘙痒，一过性转氨酶升高。
但近年来临床上广泛应用后，其新出现的不良反应相继报道。
3.1过敏反应临床对照试验文献12篇，试验病例918人，发生过敏反应23例，发生率2.5%。
HPLC法测定肝脂清胶囊中大黄素、大黄酚的含量
中 国药师 ２ ７ ０ 年第１卷第７ Ｃｉ ａｎ ｉ２ ７ Ｖ１０ ｏ ０ ０ 期 ｈａ ｈｒａｓ ０ ， ｏ１ ｎＰ ｒｃｔ ０ ． Ｎ． ７
均使用安尔碘 消毒瓶盖 。输 液密封 瓶铝 盖 中心 部位 为塑 料 盖 ， 盖后 ， 启 中心部 位暴露 ， 而铝 盖与胶 塞表 面有 空 隙 ， 作 操
系 ； 黄 酚 在 进 样 量 ２ ．２—１７ ５ ｇ范 围 内 呈 良好 的 线 性 大 ７９ ６ ，２ｎ 关系 。
２ ５ 精 密度 ．
３ 结 论
本 文参 照有关文献 “ 选用 ２ ４ｎ ５ ｍ为检 测波 长 ， 以甲 醇－． ％磷 酸溶液 （５ １ ） ０ １ ８ ：５ 为流 动相 ， 果大 黄素 、 黄 酚 结 大
３ ２ 预 防 措 施 ．
①加 强护 理人员工作责任心 ， 认真执行操作规程 。针头 刺入 密封 瓶时 ， 针头 、 针梗与胶塞面呈 ６ 。 ０ 角为宜 。②消毒
瓶塞 中心 部位时安尔碘棉球不能过湿 ， 以消毒后胶塞 表面与
１ 丁力． １ 种 中西药注射 剂配伍 变化 快捷检 索手册［ ．天津 ： ３８ Ｍ］ 天津科学技
２ ２ ２ 供试 品溶液 的制备 取本 品 ２ ．． ０粒 ， 出 内容 物 ， 倾 研
细， 取细粉约０ ５ｇ精密称定 ， ． ， 置锥形瓶 中， 精密加入 甲醇 ５ Ｏ
ｍｌ称定重量 ， ， 加热 回流 ３ ｉ ， ０ｍ ｎ 放冷 ， 称定重量 ， 甲醇补 再 用
高效液相 色谱 仪 ： 安 Ｓ ｍ ｉ Ｐ ８ Ａ泵 ，ｕ ｉ Ｐ Ａ． 戴 ｕ ｍｔ ６０ Ｓｍｍｔ Ｄ
１ ｌ称 定重量 ， ０Ｉ ， Ｔ ｌ 置水浴 中微热溶解残 渣 ， 冷后 ， 放 再称定 重 量 ， 甲醇补足减 失的重量 ， 匀 ， 用 摇 滤过 ， 取续 滤液 ， 即得 。 ２ ２ ３ 阴性对 照溶液 的制备 ．． 除 大黄外 ， 按照处 方 比例称
诃子提取物含药血清对乳鼠心肌细胞损伤的爱惜作用
诃子提取物含药血清对乳鼠心肌细胞损伤的爱惜作用张东邬国栋张述禹王玉华杨玉梅【摘要】目的：研究诃子提取物含药血清对H2O2所致心肌细胞损伤的爱惜作用。
方式：采纳H2O2处置培育心肌细胞，造成氧化应激模型，通过检测细胞培育液中LDH、CK漏出量、MDA含量和SOD活性反映诃子提取物含药血清对H2O2氧化模型的阻碍。
结果：与模型组比较，诃子提取物含药血清能显著减少LDH、CK漏出量（P＜,P＜）；降低培育液中MDA含量（P＜,P＜），升高SOD活性（P＜）。
结论:诃子提取物含药血清可减轻H2O2对心肌细胞的损伤程度，对心肌细胞具有爱惜作用，其机制可能与稳固细胞膜和抗氧化有关。
【关键词】诃子;过氧化氢;心肌细胞培育；血清药理学Abstract Objective: To investigate the protective effects of the Terminalia chebula extract serum on myocardial cells injury in cultured rats induced by H2O2. Methods: Oxidative damage model were induced by H2O2, the leakage level of lactidehydrogenase (LDH), creatine kinase (CK), the content level of methylenedioxyamphetamine (MDA),the activity of superoxide dismutase (SOD) were measured in medium to observethe effects of the Terminalia chebula extract serum on myocardial cells injury in cultured rats induced by Hydrogen peroxide(H2O2). Results: Compared with the model control, the content of LDH, CK, MDA decreased significantly（P＜,P＜） and the activity of SOD increased significantly（P＜）. Conclusion: the Terminalia chebula extract serum can mitigate injury of Hydrogen peroxide(H2O2) on myocardium ,it has protecting effect on damaged myocardium. It is suggested that the protecting mechanism may be related to stabilizing membrane and its antioxidant properties.Key words Terminalia chebula; Hydrogen peroxide; Cardiac myocyte culture; Serum pharmacology诃子又名诃黎、诃黎勒、随风子，为使君子科植物诃子（Terminalia chebula Retz.）或绒毛诃子（Terminalia chebula Kurt.）的干燥成熟果实。
儿童过敏性咳嗽患者用汪氏敏清注意事项
儿童过敏性咳嗽患者用华北牌汪氏敏清注意事项1、在服用汪氏敏清期间请停止内服、外用的祛除过敏产品及其它脱敏治疗等。
因为汪氏敏清是第三代祛过敏理论结晶，是纯中药以调理为主，祛除过敏根本的理论。
与西药激素类和抗组胺类药物在治疗理论方面有冲突。
2、如过敏症状非常严重（特别是哮喘咳嗽类患者），可暂时用西药及外用喷剂控制一下（西药或喷剂减量服用），间隔3个小时再服用汪氏敏清。
服用一段时间可停掉西药以及外用喷剂等，坚持服用汪氏敏清一种。
3、若遇其它病情（感冒、发烧等）请先暂停汪氏敏清，治疗好其它病症后再继续服用汪氏敏清。
4、用温开水冲服，每天服用3袋，重度每天服用4袋。
5、服用汪氏敏清期间不要吃生冷、辛辣的食物，少受油烟油漆等刺激，注意防寒保暖，请暂时远离过敏源，吹空调温度不要太低，以免过分刺激过敏体质。
6、服药期间不要吃水果，水果主要偏热性或寒性，会刺激过敏体质，导致症状严重。
7、对于儿童过敏性咳嗽患者，特别要注意的是早晚穿暖和，避免受风寒刺激，调理期间尽量少接触过敏源。
晚上饭菜以清淡为主。
日常煮些山药红枣粥喝喝，补补气，晚上可以吃些糖拌白萝卜丁，帮助顺气消化。
8、对于重度和顽固性的过敏患者以及服用过西药激素类、抗阻胺类的患者，不能达到起效迅速的效果，请坚持服用，（对湿疹和荨麻疹等过敏性皮肤病，起效会更慢一些，因为皮肤过敏是过敏体质更严重的表现，而且经常伴随一些其他症状）因为汪氏敏清是先祛除残留体内激素而后祛除过敏症状并彻底转变过敏体质。
9、因为过敏是体质虚寒之症，服用汪氏敏清一段时间，明显饭量好转，消化吸收提高，感冒等症状减少，这些都是服用汪氏敏清所起的相关效果，是过敏体质转变的一些表现，请放心服用。
消肿解毒膏中大黄素、大黄酚的含量测定
〔１５ꎬ１６〕
作为淋洗液ꎬ开始时
淋洗液氢氧化钾溶液的浓度选择在 ２０ｍｍｏｌꎬ可是出峰时间在
３ｍｉｎ 左右ꎬ这与磷酸根对照液的出峰时间不相符合ꎮ 经过多
番的摸索后发现氢氧化钾的浓度应该选择在 ３０ｍｍｏｌＬ
－１
效
有预期的 ３０％ 左右ꎬ显然水不足以使复方五味子糖浆中的磷
酸根完全析出ꎮ 后来参考国家药品标准中复方五味子糖浆总
水￣乙酸(７４ ∶ ２５ ∶ １ ) ꎻ检测波长 ４２８ｎｍꎻ柱温 ３０℃ ꎻ流速 １ ０ｍＬｍｉｎ － １ ꎮ 结果 ＨＰＬＣ 测定大黄素及大黄酚分别在 ０ ０３８ ~ ０ ７６μｇꎬ０ ０７２ ~
１ ４４μｇ 线性关系良好ꎬ平均回收率分别为 ９９ ４％ 和 ９８ ５％ ꎮ 结论 建立的含量测定方法简便、准确ꎬ专属性好ꎮ
１０ꎮ 经查文献可知用离子色谱法测定磷酸根的试验中其响应
〔１５〕 胡晓敏ꎬ宋周虎ꎬ陈梅兰ꎬ等 免试剂离子色谱法测定缬沙坦中
液相色谱那样响应值都比较大ꎬ而是比其小的多得多ꎮ
〔１６〕 臧道德ꎬ童俊ꎬ冯菊丽ꎬ等 淋洗液在线发生离子色谱法测定水
就不同ꎬ当淋洗液浓度为 ２０ｍｍｏｌＬ － １ 时保留时间较小ꎬ就
作者简介:蔡天进ꎬ男ꎮ 学历:学士ꎮ 职称:副主任药师ꎮ 主要从事医院药学的研究ꎮ Ｅ￣ｍａｉｌ:ｃｎｒｍｙｙｙｊｋ＠ １２６ ｃｏｍ
磷量的测定的前处理方式而是磷酸根较完全的析出ꎮ
参考文献
的氢氧化钾溶液淋洗
〔１〕 王铮帅ꎬ吴韶铭 复方五味子糖浆中总磷量的测定〔 Ｊ〕 中国药
本实验的淋洗液浓度是在线稀释的ꎬ可通过用超纯水来
〔２〕 姚志道ꎬ杨梅音ꎬ买买提苏唐 复方五味子糖浆的制备与临床
果最佳ꎮ 所以最终选择了 ３０ｍｍｏｌＬ
【精选文档】中药血清药理学以及实验设计思路PPT
实验设计思路
• 复方黄连注射剂血清用肌内注射复方黄
连注射剂，2次/d，连续3d。末次给药后15 、30
中药血清药理学以及实验设计思路
中药血清药理学
• 中药血清药理学是将中药 或中药复方经口服给动物灌 服一定时间后采集动物血液 、分离血清，用含有药物成 分的血清进行体外实验的一 种半体内实验方法。
血浆 血清 凝血
• 血浆是指血液中除血球、血小板之外的部 分, 是一种无色透明的液体, 含有水、无机 盐、营养物、激素、尿酸等。
防止中药粗制剂理化性质 反映药物的代谢产物和 由于中药及其复方化学成分复杂，半衰期很难测定，所以采用7～10d 给药法也是权宜之计。
实验动物的选择 成分复杂，影响因素太多，结果重复性差 成分复杂，影响因素太多，结果重复性差
对体外试验的干扰 给药后产生的内源性成分 设立正常血清空白对照组来排除血清本身所含干扰性物质对实验结果的影响。
min，1、2、3 h后从兔颈静脉取血，分离含药血
清。采用反相高效液相色谱法测定含药血清中小
檗碱含量，用微量稀释法和药敏纸片法测定复方
黄连注射剂含药血清的抑菌能力。结果复方黄连
注射剂含药血清对耐药性金葡菌具有明显的抑制
作用。
实验设计思路
• 茵陈蒿汤保肝作用的血清药理学研究
• 建立CCl4诱导的大鼠肝细胞损伤细胞模型， SD 大鼠为含药血清供体，以含药血清对损伤肝 细胞增殖(WST-8法)的影响为指标，采用正交试
• 含药血清的保存: -20 ℃或更低温度环境下保存。
刺老苞根皮水煎剂对去势小鼠的血清雌二醇、骨碱性磷酸酶及骨钙素的影响及意义
CHINESE COMMUNITY DOCTORS 实验研究中国社区医师2019年第35卷第10期刺老苞根皮水煎剂对去势小鼠的血清雌二醇、骨碱性磷酸酶及骨钙素的影响及意义王松月薛帆宋晶珠李金诚裴凌鹏100081民族医药教育部重点实验室，中央民族大学药学院，北京刺老苞又名楤木，为五加科，属头序楤木、棘茎楤木、短序楤木，以及食用楤木，为土家族用来祛风除湿，强筋健骨的常用药[1]。
刺老苞始载于《千金方》，治疗肠痈，其他古代医书对其也有相关记载，《本草推陈》中记载：“楤木树皮及根皮均有健胃、收敛、利尿及降糖作用。
”《滇南本草》中记载：“刺脑包，又名刺老包、鹊不踏。
味苦辛、性凉，入脾、肾二经。
治风湿痛、胃痛、跌打损伤。
”本实验室前期的药理作用研究表明，刺老包根皮可以改善大鼠骨质量，减少骨髓腔的脂肪含量，抑制大鼠骨丢失。
本研究的目的是通过去势后小鼠模型，评估刺老苞根皮对于去势后小鼠骨代谢血清学的影响及其意义。
资料与方法实验动物：选取健康SPF 级12周龄C57雌性小鼠80只，体重(21.62±0.76)g，购买于斯贝福(北京)生物技术有限公司，动物合格证编号[SCXK(京)2014-0010]。
实验前，所有小鼠均于北京海淀区卫计委实验动物中心内饲养，室温维持于16～22℃，湿度60%～75%，明暗交替照射12h/12h，不限制水及食物的摄入，应用常规鼠粮进行喂养。
实验分组：第15周去势手术完成后，选取符合选入标准(阴道涂片无明显动情周期)小鼠，按照体重随机分为5组，每组10只，分别为模型组(OVX，n =10)、空白对照组(Control group，CG，n =10)、刺老苞根皮水提取物组(CLB，n =10)、仙灵骨葆组(XL，n =10)、阿仑膦酸钠组(AST，n =10)。
实验药物：①刺老苞根皮水煎剂的制备：将干燥的刺老苞根皮生药243.36g 加入10倍蒸馏水于圆底烧瓶中，沸腾之后，于120℃加热60min，待冷却后倒出水煎剂，再加入6倍蒸馏水，沸腾后，于120℃加热30min，冷却后合并两次煎液，在常压下进行浓缩，浓缩至每100mL 水煎剂含生药79.7g。
药理实验方法
丁苯酞又名芹菜甲素，最初发现于芹菜籽中，其药效学特点涵盖了很多方面作用：1、能改善缺血脑能量代谢；2、明显缩小大鼠局部脑缺血脑梗塞面积，改善神经功能缺失；3、改善局部脑缺血引起的脑水肿；4、对缺血区局部脑血流和软脑膜微循环有明显改善作用；5、能显著改善局部脑缺血引起的记忆障碍。
在中国专利93117148.2中，公开了芹菜甲素在制备预防和治疗哺乳动物或人类脑缺血引起的疾病的药物中的应用。
另外在中国专利03137457.3中，公开了L-丁苯酞在制备预防和治疗痴呆，尤其是阿尔茨海默病、血管性痴呆的药物中的应用。
目前市场上已经有丁苯酞软胶囊、丁苯酞氯化钠注射液等产品上市。
丁苯酞的化学结构式如式（1）：其光学活性化合物L-丁苯酞结构式如式（2）：2-莰醇是中国传统中药（龙脑）中的主要成分，2-莰醇分为消旋体、右旋异构体、左旋异构体。
其中，(+)-2-莰醇为天然冰片（右旋龙脑）主要成分，根据药典（中华人民共和国《药典》2010年版一部）规定，在天然冰片（右旋龙脑）中(+)-2-莰醇含量不少于96.0%；(-)-2-莰醇为艾片（左旋龙脑）主要成分，根据药典（中华人民共和国《药典》2010年版一部）规定，在艾片（左旋龙脑）中(-)-2-莰醇含量不少于85.0%；(±)-2-莰醇为冰片（合成龙脑）主要成分，根据药典（中华人民共和国《药典》2010年版一部）规定，在冰片（合成龙脑）中2-莰醇含量不少于55.0%。
作为传统常用中药，冰片具有开窍醒神，清热止痛的功效，在中药中常作为“引药”应用。
以下是丁苯酞或其光学活性化合物左旋丁基苯酞与2-莰醇或其光学活性化合物以及与天然冰片（右旋龙脑）、艾片（左旋龙脑）、冰片（合成龙脑）、分别组合的药用效果试验。
试验1：对局灶性脑缺血再灌损伤的保护作用1.1材料与方法1.1.1实验动物Sprague-Dawley(SD)大鼠，雄性，清洁级，体重260-290g。
1.1.2方法1.1.2.1脑缺血模型的制备采用颈内动脉线栓法制备大脑中动脉阻塞（Middle cerebral artery occlusion，MCAO）脑缺血再灌注模型。
单体药理IF11.492：黄芩素...
单体药理IF11.492：黄芩素...【题目及作者信息】Baicalein resensitizes tamoxifen-resistant breast cancer cells by reducing aerobic glycolysis and reversing mitochondrial dysfunction via inhibition of hypoxia-inducible factor-1α【摘要】耐药性是他莫昔芬(TAM) 提供临床有效性的主要障碍。
因此，必须确定一种可用于提高TAM 治疗TAM耐药性乳腺癌疗效的敏化剂。
在这里，我们研究了黄芩素逆转TAM抗性的能力（前言目的）。
我们发现黄芩素增加了 TAM 抑制 TAM 抗性细胞增殖和诱导细胞凋亡的功效。
它还增强了 TAM 诱导的来自 NOD/SCID 小鼠乳腺脂肪垫的抗性细胞的生长减少，而不会引起明显的全身毒性。
使用CellMiner 工具和Kaplan-Meier 绘图仪数据库进行的分析表明，在NCI-60 癌细胞和乳腺癌患者中，HIF-1α 表达与TAM 治疗反应呈负相关。
由于mRNA 水平增加和泛素介导的降解减少，TAM抗性细胞中的HIF-1α 表达增加。
黄芩素通过促进其与PHD2 和pVHL的相互作用来降低HIF-1α的表达，从而促进泛素连接酶介导的蛋白酶体降解，从而抑制核易位、与缺氧反应元件的结合以及 HIF-1α的转录活性。
因此，黄芩素通过限制葡萄糖摄取、乳酸生成、ATP 生成、乳酸/丙酮酸比和HIF-1α靶向糖酵解基因的表达来下调有氧糖酵解，从而增强TAM 的抗增殖功效。
此外，黄芩素干扰 HIF-1α 对线粒体生物合成的抑制，从而增加线粒体 DNA含量和线粒体数量，恢复线粒体中活性氧的产生，从而增强TAM诱导的线粒体凋亡途径。
HIF-1α 稳定剂二甲基乙二烯丙基甘氨酸阻止了黄芩素诱导的糖酵解和线粒体生物合成下调，并降低了黄芩素逆转TAM抗性的作用（结果）。
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[河北省疾病预防控制中心验证本产品保健功能药理试验研究资料] 1．1华北牌汪氏敏清欣可颗粒对小鼠体重的影响（见表1-2）
表1 各组小鼠初始体重
表2 各组小鼠结束体重
表1-2结果表明，经口给予小鼠一定剂量的华北牌汪氏敏清欣可颗粒30天后，其体重于对照组比较无差异。
（由于灌胃失误造成一组动物数减少）
1．2华北牌汪氏敏清欣可颗粒对小鼠脏器/体重比值的影响
表3 华北牌汪氏敏清欣可颗粒对小鼠脏器/体重比值的影响
由表3可见，经口给予小鼠一定剂量的华北牌汪氏敏清欣可颗粒30天后，脾脏和胸腺的脏器系数三个剂量组于对照组比较均无显著性差异。
1．3华北牌汪氏敏清欣可颗粒对小鼠迟发型变态反应（DTH）的影响（见表4）表4 华北牌汪氏敏清欣可颗粒对小鼠迟发型变态反应（DTH）的影响
由表4可见，经口给予小鼠一定剂量的华北牌汪氏敏清欣可颗粒30天后，其高剂量组的足跖肿胀度与对照组比较有显著性差异。
1．4华北牌汪氏敏清欣可颗粒对ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化试验的影响（见表5）
表5 华北牌汪氏敏清欣可颗粒对ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化试验的影响
由表5可见，经口给予小鼠一定剂量的华北牌汪氏敏清欣可颗粒30天后，其对ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化功能高剂量组与对照组比较有显著性差异。
1．5华北牌汪氏敏清欣可颗粒对小鼠脾脏抗体生成细胞数的影响（见表6）表6 华北牌汪氏敏清欣可颗粒对小鼠脾脏抗体生成细胞数的影响
由表5可见，经口给予小鼠不同剂量的华北牌汪氏敏清欣可颗粒30天后，其抗体生成细胞数各剂量组与对照组比较均有显著性差异。
）的影响（见表7）
1．6华北牌汪氏敏清欣可颗粒对小鼠半数溶血值（HC
50
表7 华北牌汪氏敏清欣可颗粒对小鼠半数溶血值（HC
）的影响
50
由表7可见，经口给予小鼠不同剂量的华北牌汪氏敏清欣可颗粒30天，其各剂量组的半数溶血值与对照组比较均无显著性差异。
1．7华北牌汪氏敏清欣可颗粒对小鼠单核-巨噬细胞碳廓清功能的影响（见表8）表8 华北牌汪氏敏清欣可颗粒对小鼠单核-巨噬细胞碳廓清功能的影响
由表8可见，经口给予小鼠一定剂量的华北牌汪氏敏清欣可颗粒30天，各剂量组的单核-巨噬细胞吞噬指数与对照组比较均无显著性差异。
1．8华北牌汪氏敏清欣可颗粒对小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞功能的影响（见表9）表9 华北牌汪氏敏清欣可颗粒对小鼠巨噬细胞吞噬鸡红细胞功能的影响
由表9可见，经口给予小鼠一定剂量的华北牌汪氏敏清欣可颗粒30天，其各剂量组的巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬绿与吞噬指数与对照组比较均无显著性差异。
1．9华北牌汪氏敏清欣可颗粒对小鼠NK细胞活性影响（见表10）
表8 华北牌汪氏敏清欣可颗粒对小鼠NK细胞活性的影响
由表8可见，经口给予小鼠一定剂量的华北牌汪氏敏清欣可颗粒30天，各剂量组的NK细胞活性与对照组比较均无显著性差异。
1．10综上所述，经口给予小鼠一定剂量的华北牌汪氏敏清欣可颗粒30天，能明显提高小鼠的足跖厚度、淋巴细胞转化功能、脾脏抗体生成细胞数。
根据《保健食品功能学评价程序和检验方法》的规定，可判定华北牌汪氏敏清欣可颗粒具有增强免疫力作用。
2．验证本配方食用安全的药理试验研究资料
2．1急性毒性试验
2．1.1小鼠急性毒性试验（见表1）
表1 华北牌汪氏敏清欣可颗粒对小鼠急性毒性试验
华北牌汪氏敏清欣可颗粒在15000 mg/kg.bw的剂量条件下，两种性别的小鼠均未见明显的中毒症状及死亡。
该产品对雌雄小鼠的MTD均大于15000 mg/kg.bw。
2．1．2大鼠急性毒性试验（见表2）
表2 华北牌汪氏敏清欣可颗粒对大鼠急性毒性试验
结论：根据急性毒性分级，华北牌汪氏敏清欣可颗粒属无毒物。
2．2遗传毒性试验
2.2.1.Ames试验（见表3）
表3 华北牌汪氏敏清欣可颗粒Ames试验结果
由表3可见，华北牌汪氏敏清欣可颗粒对TA97（a）、TA98、TA100、TA102四株试验菌株，在加与不加S-9的情况下，均未呈现致突变作用。
2.2.2小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验结果（见表4）
表4 小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验结果
华北牌汪氏敏清欣可颗粒的三个剂量组的微核发生率均在正常范围内，经统计学处理与阴性对照组比较无显著性差异，与阳性对照组比较差异显著。
该产品小鼠微核试验阴性。
2.2.3小鼠精子畸形试验（见表5）
表5 华北牌汪氏敏清欣可颗粒小鼠精子畸形试验结果
华北牌汪氏敏清欣可颗粒的三个剂量组的精子畸形率均在正常范围内，经统
计学处理与阴性对照组比较无显著性差异，与阳性对照组比较差异显著。
该产品小鼠精子畸形试验阴性。
2.3 30天喂养试验
一般状况：经过30天喂养，大鼠全部存活，各组动物发育良好，未见异常体征。
2.3.1华北牌汪氏敏清欣可颗粒对大鼠体重的影响：结果见表6
表6 华北牌汪氏敏清欣可颗粒对大鼠体重的影响
2.3.2对大鼠食物利用率的影响：结果见表7。
各组大鼠的食物利用率与其对照组比较均无显著性差异。
表7 华北牌汪氏敏清欣可颗粒对大鼠食物利用率的影响
2.3.3 血液学检查：实验结束时，各组动物红细胞、血红蛋白、白细胞均在正常范围内。
表8 华北牌汪氏敏清欣可颗粒30天喂养血液学检查结果
2.3.4末期生化检验结果：实验结束时，各组动物谷丙转氨酶（速率法）、血糖（己糖激酶法）、尿素氮（紫外法）、总胆固醇（酶法）、甘油三脂（酶法）、肌酐（苦味酸两点法）、总蛋白（双缩脲法）白蛋白（溴钾酚氯法）等指标均在正常范围内波动。
（结果见表9）
表9 末期生化检查结果
2.3.5华北牌汪氏敏清欣可颗粒对大鼠脏器系数的影响：各组脏器系数均无显著性差异（见表10）。
表10 各组动物脏体比值结果（%）
2.4 病理组织学检查：大体解剖各组大鼠各脏器未见异常。
病理组织学检查各组大鼠的肝小叶结构正常，肝细胞无变性、坏死，小叶间无炎细胞浸润和纤维组织增生；肾小球、肾小管结构正常，肾小管上皮细胞无变性、坏死，管腔内无异常物质，间质无炎细胞浸润、出血和纤维组织增生；胃壁及十二脂肠壁结构清晰完整，无出血、炎细胞浸润，胃上皮细胞及肠粘膜上皮细胞无变性、坏死、缺损。
未见华北牌汪氏敏清欣可颗粒对受试物组动物肝、肾、胃及肠产生特异性的病理改变。
3．小结：本试验结果表明，华北牌汪氏敏清欣可颗粒对两种性别的大、小鼠的MTD均大于15000mg/kg.bw，说明该产品属无毒物；三项致突变试验结果阴性；大鼠30天喂养试验各项指标均无明显异常。