维拉帕米和利血平对A549和H4_省略_肺癌侧群细胞的阻断差异机制及意义_曹宝山
药理学简答题(考研)
药理学简答题&论述题（哈医大考研初试&复试）第一章药理学总论—绪言1.新药的研究过程可分为几个阶段？1）临床前研究2）临床研究3）上市后的药物监测2.临床前研究包括什么？（2011年考过）（2016复试）1）药物化学：（1）制备工艺路线（2）理化性质（3）质量控制标准2）药理学：（1）药效学（研究对象为实验动物）（2）药代动力学（3）毒理学3.新药的临床研究可分为几期每期内容是什么？（2009年考过）（2016面试）内容受试者数量要求Ⅰ初步的药理学及安全性评价试验健康志愿者 20-30Ⅱ随机双盲对照试验病人≥100Ⅲ上市前，试生产期，扩大的多中心临床试验病人≥300Ⅳ新药上市后监测病人≥2000第二章药物代谢动力学4.药物通过细胞膜的方式？（2014年考过）（复试）1）滤过（水溶性扩散）2）简单扩散（脂溶性扩散）3）载体转运：（1）主动转运（2）异化扩散5.载体转运特点？1）选择性2）饱和性3）竞争性6.药物主动转运和被动转运的特点：（2009年考过）主动转运：需要载体和能量逆浓度梯度，有饱和性，有竞争性抑制。
被动转运：不耗能，顺浓度梯度扩散，无饱和性，无竞争性抑制。
7.影响药物通透细胞膜的因素？（以简单扩散为例）（2011年考过）（复试）1）膜面积2）药物的解离度3）体液的PH 4）膜两侧的浓度差5）药物分子的通透系数6）细胞膜的厚度7）载体蛋白的量和功能通透量（单位时间分子数）=（C1- C2）╳（面积╳通透系数/厚度）8.药物的给药途径有哪些？1）口服 2）吸入 3）局部用药 4）舌下给药 5）注射给药9.影响药物在体内分布的因素？（2016复试）1）药物的脂溶度 2）毛细血管通透性 3）器官和组织的血流量 4）与血浆蛋白和组织蛋白结合能力 5）药物的pk a和局部的PH值 6）药物转运载体的数量和功能的状态 7）特殊组织的屏障作用10.体内屏障包括？1）血脑屏障 2）胎盘屏障 3）血眼屏障第三章药物效应动力学11.药物代谢涉及的反应？各个反应包括？（2014年考过）1）Ⅰ相反应：通过引入或脱去功能基团（-OH,-NH2，-SH）使原形药生成极性增高的代谢产物，其多为无活性的，不再产生药理作用，氧化，还原，水解均为Ⅰ相反应。
维拉帕米作用机制
维拉帕米作用机制
维拉帕米作为一种抗炎剂，主要通过抑制细胞因子的产生来产生抗炎作用。
它通过抑制多种细胞因子的产生，如白介素-2（IL-2），白介素-6（IL-6），肿瘤坏死因子α（TNF-α），白介素-1β（IL-1β），白介素-12（IL-12）和促炎细胞因子（PGE2）等，因此可以抑制炎症反应，减轻慢性炎症状态。
此外，维拉帕米还可以抑制细胞凋亡和抗氧化，从而改善和预防慢性疾病。
此外，维拉帕米还可以改善免疫系统功能，增强机体对病原体的抵抗力，减少患者感染，降低患者出院后死亡率。
此外，维拉帕米具有抗过敏作用，可以抑制致敏物质的活性和细胞因子的释放，降低过敏反应的几率。
天津中医药大学 于亚平 郑哲涵 周菲 中医药砷剂联合用药诱导细胞凋亡治疗恶性肿瘤研究综述
ATO（三氧化二砷）的联合用药及新剂型开发一、联合用药（一）协同与增敏作用1.与传统化疗药物的联合1.1硼替佐米（Bor，用于多发性骨髓瘤治疗）王清等ATO联合Bor处理多发性骨髓瘤KM3细胞实验发现，联合用药通过激活caspase-3-8-9机制诱导细胞凋亡，具有协同效应。
葛群芳等用Bor和ATO联合处理多发性骨髓瘤KM3细胞实验发现，在体外ATO可增强Bor对KM3细胞增殖的抑制，增加KM3细胞的凋亡，并且可能通过抑制Bcl-xLmRNA 表达，诱导Caspase-3和BIMmRNA表达的途径增强凋亡作用。
扶云碧等用Bor和ATO联合处理急性髓性白血病HL60细胞发现，联合用药在体内外对HL60细胞增殖抑制与诱导凋亡作用均增强，其机制可能与共同抑制Bcl-2表达及Caspase 信号途径的活化有关，且骨髓抑制作用较轻，毒副作用无明显相加效应。
牛超等用ATO与Bor联合处理多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226细胞发现，Bor可以增加细胞对ATO诱导凋亡的敏感性，可能与Bcl-2表达下调及caspase-3-8-9和PARP蛋白的表达上调有关。
1.2顺铂（CDP，用于多种实体瘤治疗）高洪泉等CDP与ATO联合对体外培养卵巢癌细胞株HO8910细胞实验发现，二者联合能抑制卵巢癌细胞增殖并诱导卵巢癌细胞凋亡。
何景利等ATO联合CDP对人结肠癌细胞株colon26的实验发现，两者联合对colon26细胞增殖的抑制作用和诱导凋亡能力均有增强。
其机制可能与下调Bcl-2蛋白表达有关。
曹海武等ATO联合ICE方案(异环磷酰胺、CDP、依托泊苷)治疗复发难治非霍奇金淋巴瘤(NHL)的实验发现ATO通过下调细胞周期的重要驱动基因CyclinE和CDK2的表达、上调CDK抑制因子P21基因的表达，阻滞细胞周期于G1期，从而诱导淋巴瘤细胞凋亡。
王志刚等发现ATO联合CDP（CDDP）联合能抑制C6神经胶质瘤细胞体内外的生长，与抑制细胞增殖，调控凋亡及免疫活性有关。
白藜芦醇诱导人肺腺癌A549细胞_省略_其与p38MAPK信号途径的联系_华丛书
摘要
目的
探讨白藜芦 醇 ( Ｒes) 诱 导 人 肺 癌 A549 细胞 株 CCK8法
1. 2 ) μmol / L。 用 10 μmol / L Ｒes 处理 A549 细胞 24 、 36 、 48 h， 细胞凋亡率 较 对 照 组 明 显 增 加 ( P ＜ 0. 01 ) 。 Ｒes 作用 于 A549 细 胞 48 h 后， Western blot 法 检 测 显 示 Caspase1、 Caspase3 蛋白出现断裂片 断， p38 、 pp38 表达 亦 增 高。 结论 Ｒes 明显诱导人肺癌 A549 细胞毒作用， 诱 导 A549 细胞 凋 p38 MAPK 途径有关。 亡， 其机制与激活 p关键词 细胞凋亡; 信号通路; 白藜芦醇; 肺癌 A549 细胞 Ｒ 737. 3 中图分类号
2015 － 06 － 15 接收 基金项目: 国家自然科学基金项目( 编号: 81373421 ) 作者单位: 1 安徽省胸科医院胸外科， 合肥 230022
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文献标志码 A 文章编号 1000 － 1492 ( 2015 ) 10 － 1447 － 04
天 然 的 多 酚 类 化 合 物 白 藜 芦 醇 ( resveratrol， Ｒes) 广泛 存 在 于 葡萄、 虎杖、 花 生 等 植 物 体 内。 近 Ｒes 的药 理 作用 得 到 充 分 研究， Ｒes 具有 广泛 年来， 的生物学和药理学活性， 如抗氧化、 抗炎、 免疫调节、
凋亡及其与 p38 MAＲK 信 号 通 路 的 联 系。 方法
Annexin V检测 Ｒes 对 人 肺 癌 A549 细 胞 增 殖 抑 制 作 用， FITC / PI 双染法检测 Ｒes 对 肺 癌 A549 细胞 凋 亡率， Western blot 法 检 测 Ｒes 对 人 肺 癌 A549 细 胞 Caspase 剪 切 片 断 ( Caspase1、 Caspase3 ) 表达的 影响， 及 其 对 丝 裂 原 激活 蛋白 pp38 ) 表达的影响。结果 激酶( MAPK) 通路蛋白( p38 、 Ｒes 48 h 对人肺癌 A549 细胞株 生 长 呈 浓度 依 赖 性 的 抑制 作用， 的 Ｒes 作用肺癌 A549 的半数 抑制 浓度 ( IC50 ) 值 为 ( 10. 6 ±
最新关于“维拉帕米”的认识
2. 维拉帕米的分子式为 C17H25NO4·HCl，分子量 为369.84，属于有机化合物 。
03
3. 维拉帕米在结构上含有 一个苯环和一个吗啉环，这 两个环通过亚甲二氧基连接 在一起，形成了其独特的化 学结构。
2. 维拉帕米的主要作用
01
1. 维拉帕米是一种钙离子通 道阻滞剂，主要作用是抑制 心脏和平滑肌细胞的钙离子 内流，降低心肌收缩力和心 率。
3. 维拉帕米还能调节血管 内皮细胞的功能，保护血管 壁，防止动脉硬化的发生和 发展。
3. 对神经系统的作用机制
1. 维拉帕米通过抑制钙离子 进入心脏和平滑肌细胞，降低 心肌收缩力和血管平滑肌的紧 张度，从而起到抗心律失常、 降压和缓解心绞痛的作用。
2. 维拉帕米还可以通过阻断神 经末梢对去甲肾上腺素和乙酰 胆碱的再摄取，增加这两种神 经递质在突触间隙中的浓度， 从而发挥其抗心律失常的效果 。
3. 对于有肝肾功能不全的患者，使用维拉帕米时需谨慎，可能 需要调整剂量或选择其他药物。
感谢观看!
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3. 维拉帕米还可以用于治疗预激综合征相关的快速心律失常。
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2. 在高血压中的应用
1. 维拉帕米在高 血压治疗中，主要 通过降低心脏的收 缩力和心率，从而
1 降低血压。
2. 对于一些高血压
3. 使用维拉帕米治
患者，维拉帕米可以
疗高血压时，需要定
作为首选药物进行治
期监测血压和心率，
疗，特别是那些伴有
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2. 若出现头晕、乏力 等维拉帕米的常见副作 用，可暂时停药并及时 就医。
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3. 对于有严重肝肾功 能不全的患者，使用维 拉帕米前需谨慎评估， 必要时调整剂量或选择 其他药物。
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维拉帕米和利血平对A549和H460肺癌侧群细胞的阻断差异机制及意义曹宝山1,贾 军2,任 军2,马 博2,鲁智豪2,邸立军2,宋国红2,方 健2,马力文1T he m echanism and significance of the difference bet w een verapam il and reser p ine to eli m ina te the side popula tion of A549and H460lung cancer cellsC AO Bao-shan1,J I A Jun2,RE N Jun2,MA Bo2,LU Zhi-hao2,D IL i-jun2,S ONG Guo-hong2,F ANGJ ian2,MA L i-wen1 1D epart m ent of O ncology,Peking U niversity Third Hospital,B eijing100083,China;2Internal D epart m ent of O ncology,B eijing CancerHospital,Peking U niversity School of O ncology,B eijing100036,China.【Abstract】 O bjecti ve:T o evaluate the effects of verapa m il or reser p ine on side populati on(SP)fr om A549andH460and exp l ore its mechanis m s.M ean while t o evaluate whether CD133is regarded as a ste m cell marker of lungcancer.M ethods:Side populati on(SP)and non-side populati on(non-SP)cells fr om lung cancer cell lines ofA549and H460were separated by fluorescence-activated cell s orting(F ACS).Verapa m il or reser p ine was used t oinhibit efflux of Hoechst33342by SP cells.Reverse transcri p ti on-poly merase chain reacti on(RT-PCR)was em2p l oyed t o analyze the exp ressi on of ABCG2,MDR1,CD133and G AP DH of SP or non-SP subset fr om A549andH460.Results:Reser p ine was more effective than verapa m il in inhibiting efflux of Hoechst33342by SP cells.A t l owerconcentrati on,the inhibit ors were more effective thr ough p reinhibiti on than coinhibiti on;ABCG2,MDR1and CD133were overexp ressive in SP cells of both A549and H460compared with non-SP cells.Conclusi on:The inhibit ors oftargeting the functi on of ABCG2would be effective t o overcome resistance t o current che motherapeutic drugs.CD133may be a ne w cancer stem cell surface marker of lung cancer.【Key words】side populati on;ATP-binding cassette(ABC)trans porter;C D133;reser p ine;verapa m ilModern Oncol ogy2009,17(01):0008-0012【摘要】 目的:探讨维拉帕米和利血平对肺癌细胞株A549和H460侧群细胞(side populati on,SP)的阻断差异机制及意义,探讨CD133作为肺癌干细胞表面分子标志的可行性。
MLN4924通过抑制类泛素化通路上调人肺腺癌A549细胞中PD-L1的表达演示稿件
03
MLN4924对A549细胞中 PD-L1表达的影响
MLN4924对A549细胞中PD-L1表达的抑制作用
实验结果显示，MLN4924能够显著抑制A549细胞中PD-L1的表达，表明MLN4924对类泛素化通路 具有抑制作用。
MLN4924对A549细胞中PD-L1表达的抑制作用可能是通过抑制类泛素化通路实现的，这为研究PDL1的表达调控提供了新的思路。
效。
MLN4924的局限性
要点一
耐药性问题
长期使用MLN4924可能导致肿瘤细胞出现耐药性，影响治 疗效果。
要点二
临床试验阶段
MLN4924目前仍处于临床试验阶段，尚未获得广泛用于 肺腺癌治疗的批准。
未来研究方向
探索与其他药物的联合应用
进一步研究MLN4924与其他抗癌药物的联合应用，以提 高治疗效果。
MLN4924的特性
MLN4924是一种小分子抑制剂，能 够通过抑制类泛素化通路上调人肺腺 癌A549细胞中PD-L1的表达。
MLN4924具有高选择性，能够特异 性的抑制NEDD8-activating enzyme (NAE)的活性，从而影响类 泛素化通路。
MLN4924的作用机制
01
MLN4924通过抑制NAE的活 性，导致NEDD8-conjugated 蛋白质无法正常降解，从而上 调PD-L1的表达。
VS
MLN4924对A549细胞迁移和侵袭的 影响可能是通过抑制类泛素化通路实 现的，这为研究肺癌细胞的转移提供 了新的思路。
04
MLN4924在肺腺癌治疗中 的潜在应用
MLN4924的抗癌机制
抑制类泛素化通路
MLN4924通过抑制类泛素化通路，干扰癌 细胞的信号转导和基因表达，从而抑制肿瘤 细胞的增殖和扩散。
白藜芦醇诱导肺癌A549细胞凋亡_刘盛楠
研究报告Research Report白藜芦醇诱导肺癌A549细胞凋亡刘盛楠邵淑丽*隋文静张伟伟赵彬陈微微齐齐哈尔大学生命科学与农林学院,齐齐哈尔,161006*通讯作者,shshl32@摘要本实验以人肺腺癌A549细胞为实验对象，白藜芦醇(Res)诱导细胞凋亡的效应及其机制进行了研究。
用不同浓度Res 处理A549细胞48h 后，癌细胞的形态和生物学反应发生了明显的变化。
为了确证这些变化是特征性的细胞凋亡现象，采用MTT 法检验了细胞存活率；光学和荧光显微镜观察了细胞形态结构；流式细胞术分别检测了细胞凋亡率、细胞周期和线粒体膜电位(ΔΨm)；Real Time RT-PCR 和Western blot 测定了Bcl -2/Bax 表达水平。
结果显示，白藜芦醇能够抑制A549细胞生长，并呈剂量依赖性关系，经Res 处理后的A549细胞48h 的最佳药物浓度是30μmol/L ，增殖抑制率为(60.85±0.84)%，显微镜下观察细胞呈明显凋亡现象，细胞凋亡率为(17.44±0.28)%，ΔΨm 显著下降(p <0.01)，使细胞阻滞于G 2期和S 期；下调Bcl -2，使Bax 的表达明显增加，从而导致Bcl -2/Bax 比值显著降低(p <0.01)。
这些结果表明白藜芦醇可能通过调节Bcl -2/Bax 基因的途径，诱导人肺腺癌A549细胞凋亡，并抑制癌细胞的进一步增殖。
关键词凋亡,白藜芦醇,A549细胞,Bcl -2/BaxResveratrol Induces the Apoptosis of Human Lung Cancer A549CellsLiu Shengnan Shao Shuli *Sui Wenjing Zhang Weiwei Zhao Bin Chen WeiweiCollege of Life Sciences and Agriculture and Forestry,Qiqihar University,Qiqihar,161006*Corresponding author,shshl32@ DOI:10.13417/j.gab.034.000685Abstract In order to explore the molecular mechanism for the apoptosis trigged by resveratrol on human lung cancer A549cells,the effects of resveratrol were studied by MTT,light microscope,fluorescence microscope,flow cytometry,Real Time RT-PCR and Western blot.After the A549cells treated with various cencentrations of Res for 48hours,the the mophology of the cells changed clearly.To characterize the changes related to apoptosis,the survive rate of the cell was determined by MTT;the cell structures were observed by light microscope and fluorescence microscope;the apoptotic rate,the cell cycle and the potential (ΔΨm)of mitochondrial membrane were investigated by flow cytometry;the expression levels of Bcl -2/Bax gene were explored by real-time qPCR and western blot.The results showed that the growth of the A549cells was inhibited by Res,and correlated with the dossage.The concentration for the treatment was optimized to 30μmol/L in this study.The inhibition rate was up to (60.85±0.84)%for the proliferation.The apoptotic rate was reached to (17.44±0.28)%under the microscope.The potential of mitochondrial membrane (ΔΨm)decreased heavely,a significant S arrest ocurred with the cell loss of G 1and G 2-M phase.Importantly,the expression levels of Bcl -2decreased and the expression level Bax gene increased,so that the ratio of Bcl -2/Bax declined significantly.These results suggest that resveratrol could induce the apoptosis of cancer cells and inhibit their proliferation on A549cell line by regulating the gene expression of Bcl -2and Bax .Keywords Apoptosis,Resveratrol,A549cells,Bcl -2/Bax基金项目：本研究由黑龙江省教育厅科学技术项目(批准号:11511447、12511611)和黑龙江省自然科学基金(批准号:C200624、C201241)共同资助基因组学与应用生物学，2015年，第34卷，第4期，第685-691页Genomics and Applied Biology,2015,Vol.34,No.4,685-691白藜芦醇(resveratrol,RES)是一种非黄酮类多酚化合物，广泛存在于葡萄属植物中，目前已在70多种植物中被发现。
麦冬皂苷B通过调控miR-432-5p抑制A549细胞增殖、迁移和侵袭
Ｕ６ Ｓｅｎｓｅｐｒｉｍｅｒ Ａｎｔｉｓｅｎｓｅｐｒｉｍｅｒ ＲＴｐｒｉｍｅｒ
ＴＣＧＣＡＣＴＧＧＡＴＡＣＧＡＣＣＣＡＣＣＣ
ＡＧＡＧＡＡＧＡＴＴＡＧＣＡＴＧＧＣＣＣＣＴＧ ＡＴＣＣＡＧＴＧＣＡＧＧＧＴＣＣＧＡＧＧ ＧＴＣＧＴＡＴＣＣＡＧＴＧＣＡＧＧＧＴＣＣＧＡＧＧＴＡＴ
ＴＣＧＣＡＣＴＧＧＡＴＡＣＧＡＣＡＡＡＡ
Ｔａｂ２ ＴｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｍｉＲ－４３２－５ｐｏｎＡ５４９ｃｅｌｌｓｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ， ｍｉｇｒａｔｉｏｎａｎｄｉｎｖａｓｉｏｎ（ｘ珋±ｓ，ｎ＝３）
Ｔｅｓｔｍｅｔｈｏｄ
ＥｄＵａｓｓａｙ ｃｏｌｏｎｙｆｏｒｍａｔｉｏｎ Ｔｒａｎｓｗｅｌｌｍｉｇｒａｔｉｏｎ Ｔｒａｎｓｗｅｌｌｉｎｖａｓｉｏｎ
ｍｉｃｒｏＲＮＡ广 泛 参 与 肿 瘤 细 胞 的 增 殖、转 移、侵 袭 及 凋 亡，对肿瘤发展具有重要意义［３］。研究 发 现，ＯＰＢ可 通 过 Ｌｉｎｃ００６６８／ｍｉＲ４３２５ｐ／ＥＭＴ轴抑制肺癌细胞的上皮 －间质 转化（ＥｐｉｔｈｅｌｉａｌＭｅｓｅｎｃｈｙｍａｌＴｒａｎｓｉｔｉｏｎ，ＥＭＴ）［４］，然而，ｍｉＲ ４３２５ｐ在 ＮＳＣＬＣ中的作用尚未明确，ＯＰＢ调控 ｍｉＲ４３２５ｐ 发挥抗肿瘤作用的分子机制有待进一步阐明。 １ 材料与方法 １．１ 材料 Ａ５４９、Ｈ１２９９、ＳＫＭＥＳ１和 Ｈ４６０均购自中国科 学院细胞库 ／干细胞库。麦冬皂苷Ｂ（南京世洲生物科技， ＳＺ２０１８０９０１ＭＤＺＧＢ）；ｍｉＲ４３２５ｐｍｉｍｉｃｓ和 ｍｉＲＮＣ均委托 南京锐真生物技术有限公司构建；ＥｄＵ５９４增殖检测试剂盒 （碧云天生物）；Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室（Ｃｏｒｎｉｎｇ）；Ｅｃａｄｈｅｒｉｎ、ＭＭＰ２、 Ｓｎａｉｌ、βａｃｔｉｎ一抗及羊抗兔、羊抗鼠二抗，均购自 ＣＳＴ；ｍｉＲ ＮＡ第一链 ＤＮＡ合成（茎环法）、ｍｉＲＮＡ荧光定量 ＰＣＲ试剂 盒购自生 工 生 物；Ｍａｔｒｉｇｅｌ胶 （ＢＤ）；Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ２０００（Ｉｎ ｖｉｔｒｏｇｅｎ）。 １．２ 细胞转染 取 １×１０６个 Ａ５４９细胞接种在 ６孔板中培 养 ２４ｈ，直至细胞 ７０％ －９０％融合。根据 Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ２０００ 说明书转染，实验分为阴性对照（ＮＣ）组和 ｍｉＲ４３２５ｐ过表 达组。 １．３ ＲＮＡ提取与 ｑＲＴＰＣＲ检测 空白组不做处理，两个 实验组分别以 ２５、５μｍｏｌ·Ｌ－１ＯＰＢ处理 ２４ｈ后，按照 ＴＲ Ｉｚｏｌ说明书分离总 ＲＮＡ，并进行逆转录和荧光定量。引物序 列见 Ｔａｂ１。
维拉帕米介导食管癌细胞多药耐药及细胞凋亡的实验研究
维拉帕米介导食管癌细胞多药耐药及细胞凋亡的实验研究翁呈韬;张腾跃;刘亚贝;樊高飞;吴旸;范平生【期刊名称】《实用临床医药杂志》【年(卷),期】2017(021)024【摘要】目的探讨维拉帕米提高食管癌化疗药物敏感性及促进细胞凋亡的影响.方法采用CCK-8法检测紫杉醇、顺铂、5-氟尿嘧啶对于4种食管癌细胞系(EC109、EC9706、KYSE-450、TE-1)的IC50值(IC501);用维拉帕米(4.91 μg/mL)联合上述化疗药物处理每种细胞,CCK8法检测维拉帕米联合上述化疗药物针对上述4种食管癌细胞株(EC109,EC9706,KYSE-450和TE-1)IC50值(IC502);以前期实验得出的VER逆转化疗耐药能力差异最为显著的一对食管癌细胞为研究对象,Annexin V-PI 双染法检测食管癌细胞凋亡.结果紫杉醇在KYSE-450和EC9706的IC50值明显大于EC109和TE-1,顺铂在TE-1细胞中IC50值明显小于其他3种细胞,5-氟尿嘧啶在EC109中IC50值明显高于在其他3种细胞.加用维拉帕米后,4种食管癌细胞系(EC109,EC9706,KYSE-450和TE-1)针对紫杉醇、顺铂、5-氟尿嘧啶的IC50值均不同程度下降,提示维拉帕米均不同程度提高了上述3种化疗药物的敏感性.其中,顺铂组未加入维拉帕米前,EC109,EC9706,KYSE-450与TE-1相比,均存在不同程度耐药性,加入维拉帕米后,针对EC9706 IC50值变化倍数较大(15.2倍),提示逆转敏感;针对EC109IC50值变化倍数较小(1.6倍),提示逆转耐受.结论维拉帕米逆转EC9706的阿霉素效率指数最高(15.2倍),与EC109细胞相比有显著性差异(1.6倍).提示EC9706 (DDP)对维拉帕米的逆转敏感,而EC109 (DDP)对维拉帕米的逆转耐受.维拉帕米有可能通过促进细胞调亡途径提高其逆转化疗耐受的能力,从而增强化疗药物敏感性.【总页数】5页(P1-5)【作者】翁呈韬;张腾跃;刘亚贝;樊高飞;吴旸;范平生【作者单位】安徽省肿瘤医院肿瘤内科,安徽合肥,230031;安徽省肿瘤医院肿瘤内科,安徽合肥,230031;安徽省肿瘤医院肿瘤内科,安徽合肥,230031;安徽省肿瘤医院肿瘤内科,安徽合肥,230031;安徽省肿瘤医院肿瘤内科,安徽合肥,230031;安徽省肿瘤医院肿瘤内科,安徽合肥,230031【正文语种】中文【中图分类】R735.1【相关文献】1.三氧化二砷诱导多药耐药肝癌细胞凋亡的实验研究 [J], 王宁;李玉;刘洁;张海波2.膀胱癌细胞凋亡与多药耐药的实验研究 [J], 杨丽红;杨策尧;曹宁生;陈屹3.肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)联合低剂量顺铂诱导多药耐药人卵巢癌细胞凋亡的实验研究 [J], 张薏;王英红;潘晓琳;赵霞;李洪安;张祖娟;陈继明4.MiR-34a介导mTOR/4E-BPmir信号通路对食管癌细胞凋亡作用机制研究 [J], 程齐尧; 蒋磊; 耿亚迪5.低氧条件下食管癌细胞中PRRX1通过p53介导线粒体通路诱导细胞凋亡的研究[J], 王珍;章恒;张建庆;古丽娜尔·吐尔地因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
维拉帕米和三苯氧胺逆转卵巢癌细胞对阿霉素耐药性的实验研究.
维拉帕米和三苯氧胺逆转卵巢癌细胞对阿霉素耐药性的实验研究作者：韦冰,李佳平作者单位：广东医学院附属医院妇产科，广东湛江524001【摘要】目的了解维拉帕米和三苯氧胺体外逆转卵巢癌细胞阿霉素耐药性的效果及临床意义。
方法分别以阿霉素、维拉帕米和三苯氧胺作用于人卵巢癌亲本细胞SKOV3 和阿霉素耐药细胞SKOV3/ADM后,采用MTT法检测药物对癌细胞的抑制作用，以细胞内阿霉素聚集量测定和流式细胞术检测凋亡。
结果维拉帕米和三苯氧胺能部分逆转耐药细胞对阿霉素的耐药性，且维拉帕米能显著增加耐药细胞内阿霉素的聚集量并促进其凋亡。
结论虽然维拉帕米和三苯氧胺能部分逆转耐药细胞对阿霉素的耐药性，但用于临床的意义不大。
【关键词】卵巢癌细胞株;阿霉素;维拉帕米;三苯氧胺;多药耐药Reversal of adraimycin resistance in ovarian carcinoma cells by verapamil and tamoxifen in vitroWEI Bing, LI Jia pingDepartment of Gynecology and Obstetrics, Affiliated Hospital of Guangdong Medical College, Zhanjiang 524001, ChinaAbstract: Objective To investigate the reversal effect andclinical significance of verapamil and tamoxifen on adraimycin resistance ovarian carcinoma cell line in vitro. Methods SKOV3 and SKOV3/ADM cell lines were treated with adraimycin, verapamil and tamoxifen, and then the cell inhibition, intracellular adraimycin accumulation and apoptosis were detected by MTT, spectrofluorimetry and flow cytometry, respectively.Results Adraimycin resistance in ovarian carcinoma cells was partly reversed by verapamil and tamoxifen. Verapamil increased the intracellular adraimycin concentration and enhanced the apoptosis in SKOV3/ADM cells.Conclusion Verapamil and tamoxifen could partly reverse adraimycin resistance in ovarian carcinoma cells in vitro, but they have little clinical value.Key words: ovarian carcinoma cell line; adraimycin; verapamil; tamoxifen; multidrug resistance阿霉素在上皮性卵巢癌的治疗中具有十分重要的作用。
维拉帕米联合抗癌药多西他赛对乳腺癌细胞抑制作用的研究
维拉帕米联合抗癌药多西他赛对乳腺癌细胞抑制作用的研究舒湘岑【摘要】目的：研究多西他赛与维拉帕米联合应用对多药耐药的人乳腺癌MCF-7／ADR细胞的生长抑制作用。
方法：采用噻唑蓝（ MTT）法测定药物在体外对MCF-7／ADR细胞的抑制作用，计算半数致死量（ IC50值），并且应用金氏公式进行联合用药的效果分析，此外，还应用流式细胞分析技术进行细胞凋亡和细胞周期的分析。
结果：多西他赛联合维拉帕米治疗对人乳腺癌MCF-7／ADR细胞有显著的抑制作用，抑制率与单一应用多西他赛相比提高了10倍，且IC50值为单独用多西他赛的1／10。
金氏公式显示多西他赛与维拉帕米二者联合具有协同作用，细胞周期和细胞凋亡的结果进一步证明二者联用强于单一用药。
结论：维拉帕米可以逆转乳腺癌细胞的多药耐药，其与多西他赛联合用药对乳腺癌细胞起到协同作用。
%OBJECTIVE:To investigate the inhibitory effects of verapamil combined with docetaxel on human breast cancer cell MCF-7/ADR.METHODS:MTT assay was adopted to determine the inhibitory effects of verapamil combined with docetaxel on breast cancer cell MCF-7/ADR, IC50 value was calculated , Jin's formula was used to analyze the effect of drug combination therapy .Besides ,the apoptosis and cell cycle were analyzed by flow cytometry . RESULTS:The inhibitory effects of verapamil combined with docetaxel in treatment of breast cancer cell MCF -7/ADR is significant, the inhibition ratio of was 10 times higher than that of single docetaxel ,the IC50 value was 1/10 of single docetaxel.According to Jin's formula,verapamil combined with docetaxel had strong synergism effects .Moreover,the results of cell cycle and apoptosis also showed thatverapamil combined with docetaxel had better effects than docetaxel or verapamil alone .CONCLUSIONS:Verapamil can reverse the multi-drug resistance of breast cancer cells ,and when combined with docetaxel can gain the synergistic effects on breast cancer cells .【期刊名称】《中国医院用药评价与分析》【年(卷),期】2016(016)002【总页数】3页(P190-192)【关键词】乳腺癌细胞;多西他赛;维拉帕米【作者】舒湘岑【作者单位】孝感市中心医院药学部，湖北孝感 432100【正文语种】中文【中图分类】R979.1DOI 10.14009/j.issn.1672-2124.2016.02.018ABSTRACT OBJECTIVE：To investigate the inhibitory effects of verapamil combined with docetaxel on human breast cancer cell MCF-7/ADR.METHODS：MTT assay was adopted to determine the inhibitory effects of verapamil combined with docetaxel on breast cancer cell MCF-7/ADR，IC50 value was calculated，Jin’s formula was used to analyze the effect of drug combination therapy. Besides，the apoptosis and cell cycle were analyzed by flow cytometry. RESULTS：The inhibitory effects of verapamil combined with docetaxel in treatment of breast cancer cellMCF-7/ADR is significant， the inhibition ratio of was 10 times higher than that of single docetaxel，the IC50 value was 1/10 of single docetaxel. According to Jin’s formula，verapamil combined with docetaxel had strong synergism effects. Moreover，the results of cell cycle and apoptosis also showed that verapamil combined with docetaxel had better effects than docetaxel or verapamil alone. CONCLUSIONS：Verapamil can reverse the multi-drug resistance of breast cancer cells，and when combined with docetaxel can gain the synergistic effects on breast cancer cells. KEYWORDS Human breast cancer cells； Docetaxel； Verapamil随着化疗药物的广泛使用，肿瘤治疗中的多药耐药(multidrug resistance，MDR)问题显得越来越突出，也是目前临床肿瘤治疗中的主要障碍和化疗失败的主要原因之一[1]。
2022年华北理工大学冀唐学院基础医学专业《药理学》科目期末试卷A(有答案)
2022年华北理工大学冀唐学院基础医学专业《药理学》科目期末试卷A(有答案)一、填空题1、研究药物对机体作用及作用机制的学科被称为_______，研究机体影响下药物的变化及规律的学科被称为_______2、乙酰胆碱可使内脏平滑肌_______，血管平滑肌_______，瞳孔_______。
3、溴隐亭服用大剂量时，对_________受体有较强的激动作用，故可用于治疗_________4、伴精神抑郁的高血压病人不宜用______；伴支气管哮喘的高血压病人不宜用______；伴糖尿病或高血脂的高血压病人不宜用______；伴心动过缓或传导阻滞的高血压病人不宜用______5、链霉素过敏性休克发生时应立即静脉注射_______和_______。
6、抑制胃酸分泌的药物种类有________、________、________、________。
二、选择题7、女性用药时应考虑的“四期”不包括（）A.月经期B.妊娠期C.分娩期D.哺乳期E.更年期8、下列不属于β受体阻断药适应证的是（）A.支气管哮喘B.心绞痛C.心律失常D.高血压E.青光眼9、有关维生素B12的叙述，正确的是（）A.长期应用广谱抗生素可导致其缺乏B.只存在于植物性食物中C.不影响叶酸的作用D.恶性贫血时应口服维生素B12E.缺乏时，可影响正常神经髓鞘脂质合成10、子宫兴奋作用最强、最快的药物是（）A.麦角新碱B.麦角胺C.麦角毒D.缩宫素E.垂体后叶素11、为了减轻甲氨蝶呤的毒性反应所用的救援剂是（）A.叶酸B.维生素BC.磷酸亚铁D.亚叶酸钙E.维生素C12、TMP的抗菌作用机制是抑制（）A.二氢叶酸还原酶B.过氧化物酶C.二氢蝶酸合酶D.DNA回旋酶E.β-内酰胺酶13、具有抗病毒作用的抗帕金森病药物是（）A.左旋多巴B.卡比多巴C.金刚烷胺D.溴隐亭E.司来吉兰14、大环内酯类抗生素抗菌作用机制是（）A.影响细菌细胞壁的合成B.改变胞浆膜的通透性C.抑制依赖于DNA的RNA多聚酶D.抑制70S始动复合物的形成E.与核蛋白体50S亚基结合，抑制mRNA移位，阻滞肽链延长15、患者，男，27岁，直肠疼痛、出血就诊。
肺癌耐药分子标志与个体性化疗
44% 26% 56% 88% 50% 21% 16% 66% 29% 11% 76% 52%
**Vast majority of deaths due to chemoresistance
CA Cancer J Clin.51:23, 2001
DRUG ACCUMULATION IS REDUCED IN DRUG-RESISTANT CELLS
一．肺癌化疗耐药的复杂性 二．肺癌耐药逆转药物的局限性 三．肺癌个体性化疗的实践性 四．典型病例
一. 肺癌化疗耐药的复杂性
以铂类药物为基础的联合化疗比单一化疗效果好，是 中晚期肺癌一线治疗的‘金标准’;
紫杉醇、诺维本、多西紫杉醇、吉西他滨; 在过去三十年中，非小细胞肺癌的中位生存时间只延
长了大约三个月; 中晚期非小细胞肺癌经验性化疗疗效停滞于平台期，
致力于寻找各种敏感的化疗耐药分子标志和高效的耐 药逆转剂具有广泛的应用前景。
Corey Langer 2000; Breathnach et al 2001; Schiller et al 2002
What is the Scope of the Problem?
Chemotherapy
Chemotherapy
Cancer Stem Cell
-Lung Cancer支气管肺癌干细胞BASC
limiting dilution assay
K-ras conditioning mouse
BASC has self-renewal capacity.
BASC proliferates in airway
Proc. Natl. Acad. Sci. USA 101, 14228–14233 (2004)
维拉帕米逆转肿瘤多药耐药性的研究进展
维拉帕米逆转肿瘤多药耐药性的研究进展
陈晓飞;付良青;刘泽源
【期刊名称】《国际药学研究杂志》
【年(卷),期】2007(034)003
【摘要】肿瘤细胞对化疗药物产生的多药耐药(MDR)已成为当前影响肿瘤化学治疗疗效的主要障碍,寻找低毒有效的MDR逆转剂是提高化疗疗效的关键.MDR产生机制复杂,由mdrl基因编码的P-糖蛋白(P-glycoprotein P-gP)的过表达是产生MDR的主要原因.维拉帕米是应用最早的MDR逆转剂之一,但其毒副作用大大限制了临床应用.从维拉帕米分离出的光学异构体R-型维拉帕米,在逆转肿瘤MDR时,更加高效安全,具有良好的临床应用前景.
【总页数】4页(P190-193)
【作者】陈晓飞;付良青;刘泽源
【作者单位】军事医学科学院附属医院药理室,北京,100071;军事医学科学院附属医院药理室,北京,100071;军事医学科学院附属医院药理室,北京,100071
【正文语种】中文
【中图分类】R979.1
【相关文献】
1.中药逆转肿瘤多药耐药性及其机制的研究进展 [J], 戴骁意;李婷;朱礼胜;单乐天
2.DNA 拓扑异构酶抑制剂在逆转肿瘤多药耐药性中的研究进展 [J], 张游华;顾牣赜;牛天力;张青川
3.肿瘤攻防战——肿瘤细胞多药耐药性产生机制及逆转的研究进展 [J], 杨佩满;胡军
4.五味子乙素逆转肿瘤细胞多药耐药性的研究进展 [J], 徐希妮;刘玉清;陶玉龙;侯晓节;吴海星
5.中药逆转肿瘤多药耐药性的研究进展 [J], 于海涛;付明娟
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维拉帕米对自发性高血压大鼠左心室流出道自发慢反应电位的影响
维拉帕米对自发性高血压大鼠左心室流出道自发慢反应电位的影响焦宏;马建伟;吕莉【期刊名称】《神经药理学报》【年(卷),期】2005(022)005【摘要】目的:探讨高血压大鼠左室流出道自发性慢反应电位0相和4相去极离子流中Ca2+的作用.方法:利用自发性高血压大鼠(SHR)的离体心脏,常规玻璃微电极细胞内记录方法和Ca2+离子通道阻断剂维拉帕米(VER),观测最大舒张电位(MDP)、0相除极幅度(APA)、0相最大除极速度(Vmax)、4相自动除极速度(VDD)、复极50%(APD50)和90%(APD90)的时间以及自发放电频率(RPF).结果:1.0μmol/L维拉帕米可使该慢电位的APA、Vmax、VDD明显减小,RPF减慢(P＜0.01);APD、APD90延长(P＜0.05).结论:(1)该区域的自发慢电位0相去极离子流主要为Ca2+内流.(2)4相去极离子流中,Ca2+内流起部分作用.【总页数】3页(P17-19)【作者】焦宏;马建伟;吕莉【作者单位】河北北方学院生理教研室,河北,张家口,075000;河北北方学院生理教研室,河北,张家口,075000;河北北方学院生理教研室,河北,张家口,075000【正文语种】中文【中图分类】R331.3【相关文献】1.不同降压药物干预对自发性高血压大鼠主动脉瞬时受体电位通道C亚族表达的影响 [J], 廖雪艳;陈明;余冬梅2.急性心肌缺血大鼠左心室流出道自发性慢反应电位去极离子流变化分析 [J], 王晓玲;孙亦兵;焦宏;李志军;孙琳3.自发性高血压大鼠左心室流出道自发慢反应电位去极离子流初步分析 [J], 焦宏;马建伟;吕莉;邱丽颖;王雪芳;陈立锋4.自发性高血压大鼠左心室流出道自发性电活动的特征 [J], 邱丽颖;焦宏;吕莉;马建伟5.自发性高血压大鼠左心室肌细胞动作电位延长的离子机制 [J], 李勋;蒋文平因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
维拉帕米对胶质瘤细胞卡氮芥化疗敏感性的作用
维拉帕米对胶质瘤细胞卡氮芥化疗敏感性的作用蔡青;欧阳琦;黄钱焕;贺震民;王存祖【期刊名称】《安徽医药》【年(卷),期】2010(014)006【摘要】目的探讨维拉帕米对不同胶质瘤细胞(U251、SHG-44)卡氮芥(BCNU)化疗敏感性的作用及其机制.方法通过免疫组化测定BCNU化疗前后肿瘤细胞中的耐药基因的表达;用MTT实验评估BCNU及维拉帕米作用前后化疗的细胞生长情况.结果 U251细胞中BCNU化疗前耐药基因LRP表达阳性,MRP阴性,P-gp阴性;化疗后LRP仍为阳性,MRP转变为阳性,P-gp为弱阳性,加入维拉帕米后细胞生长情况无明显差异( P> 0.05);SHG-44细胞中,BCNU化疗前,LRP为阳性,P-gp和MRP1为阴性,化疗后上述基因表达无差异,加入维拉帕米后细胞生长受到明显抑制( P< 0.05).结论维拉帕米对细胞化疗前后表达不同耐药基因的化疗敏感性具有不同的作用.【总页数】3页(P643-645)【作者】蔡青;欧阳琦;黄钱焕;贺震民;王存祖【作者单位】江苏大学附属医院神经外科;江苏大学基础医学与医学技术学院;江阴市人民医院;江苏大学附属第四人民医院神经外科,江苏,镇江,212001;江苏大学附属医院神经外科【正文语种】中文【相关文献】1.4E-BP1在人脑胶质瘤细胞对卡氮芥获得性耐药中的作用 [J], 朱慧丽;翁泽平;张继君;林琛莅;谢思明;王超;马继伟;钟雪云2.胶质瘤细胞对卡氮芥、威猛联合的敏感性实验研究 [J], 商战平;高玲;刘潇;祝世功;朱晓波;赵万3.FoxM1在胶质瘤对卡氮芥化疗抵抗中的作用 [J], 张明杰;范承哲;李少一;刘云会4.维拉帕米对裸鼠胶质瘤U251模型卡氮芥疗效的影响 [J], 吴小明;仇有成;王存祖;欧阳琦;黄钱焕;杨伟现;许慧中5.DMSA@γ-Fe_2O_3纳米磁流体联合卡氮芥在交变磁场下对人胶质瘤细胞U251的影响 [J], 梁平;杨天明;易国庆因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
斑蝥素对肺癌A549细胞周期阻滞作用机制的观察
斑蝥素对肺癌A549细胞周期阻滞作用机制的观察张卫东;赵惠儒;于秉治;王晓华;宗志红;刘莹【期刊名称】《中国肿瘤临床》【年(卷),期】2004(31)23【摘要】细胞周期调控是当前肿瘤研究的热点。
几乎所有癌基因、抑癌基因的生物学效应，最终都归结到细胞周期的机制。
癌基因、抑癌基因的变异，导致细胞周期失控、无限增殖，形成克隆群体一肿瘤。
细胞周期的基础研究为探讨肿瘤发病机制，肿瘤靶向治疗开辟了新的途径。
斑蝥素(Cantharidin，CTD)医治疾病已有2000多年的历史，【总页数】3页(P1372-1374)【作者】张卫东;赵惠儒;于秉治;王晓华;宗志红;刘莹【作者单位】中国医科大学第一临床学院胸外科,沈阳市,110001;中国医科大学第一临床学院胸外科,沈阳市,110001;中国医科大学第一临床学院胸外科,沈阳市,110001;中国医科大学第一临床学院胸外科,沈阳市,110001;中国医科大学第一临床学院胸外科,沈阳市,110001;中国医科大学第一临床学院胸外科,沈阳市,110001【正文语种】中文【中图分类】R734.2【相关文献】1.斑蝥素通过MAPK途径对肺癌A549细胞周期阻滞及其分子机制的研究 [J], 张卫东;赵惠儒;于秉治;王晓华;宗志红;刘莹2.细胞周期阻滞在急性肾损伤向慢性肾脏病转变中的作用机制研究进展 [J], 高召;陈星华;丁国华3.LncRNA LINC00152过表达在替莫唑胺诱导脑胶质瘤干细胞周期阻滞中的作用机制探讨 [J], 张良龙; 安宏伟; 赵立智; 董倩; 高桂艳4.汉黄芩素调节JAK/STAT信号通路并诱导肺癌A549细胞凋亡及周期阻滞的作用及机制研究 [J], 廉政君;常炜5.去甲斑蝥素诱导人肝癌Huh7细胞凋亡和周期阻滞的机制研究 [J], 董秀;包红因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
维拉帕米和三苯氧胺逆转卵巢癌细胞对阿霉素耐药性的实验研究
维拉帕米和三苯氧胺逆转卵巢癌细胞对阿霉素耐药性的实验研
究
韦冰;李佳平
【期刊名称】《广东医学院学报》
【年(卷),期】2007(025)004
【摘要】目的了解维拉帕米和三苯氧胺体外逆转卵巢癌细胞阿霉素耐药性的效果及临床意义.方法分别以阿霉素、维拉帕米和三苯氧胺作用于人卵巢癌亲本细胞SKOV3和阿霉素耐药细胞SKOV3/ADM后,采用MTI法检测药物对癌细胞的抑制作用,以细胞内阿霉素聚集量测定和流式细胞术检测凋亡.结果维拉帕米和三苯氧胺能部分逆转耐药细胞对阿霉素的耐药性,且维拉帕米能显著增加耐药细胞内阿霉素的聚集量并促进其凋亡.结论虽然维拉帕米和三苯氧胺能部分逆转耐药细胞对阿霉素的耐药性,但用于临床的意义不大.
【总页数】4页(P381-383,390)
【作者】韦冰;李佳平
【作者单位】广东医学院附属医院妇产科,广东湛江,524001;广东医学院附属医院妇产科,广东湛江,524001
【正文语种】中文
【中图分类】R737.31
【相关文献】
1.三苯氧胺逆转卵巢癌细胞株多药耐药性的研究 [J], 王进;黄守松;冯忻
2.三苯氧胺逆转裸鼠人大肠癌移植瘤多药耐药性的实验研究 [J], 吴文溪;沈历宗
3.三苯氧胺逆转过表达BCRP的JAR/VP16细胞对VP16的耐药性 [J], 王丽君;孙玉洁;束永前;吕京澴;殷咏梅;夏文宏
4.外源性TNF-α基因联合异搏定、三苯氧胺逆转多药耐药性 [J],
5.三苯氧胺对肺癌A549/DDP细胞多药耐药性的逆转作用及机制 [J], 李爱华;宋丽华
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维拉帕米和利血平对A549和H460肺癌侧群细胞的阻断差异机制及意义曹宝山1,贾 军2,任 军2,马 博2,鲁智豪2,邸立军2,宋国红2,方 健2,马力文1T h e m e c h a n i s m a n d s i g n i f i c a n c e o f t h e d i f f e r e n c e b e t w e e n v e r a p a m i l a n d r e s e r p i n e t o e l i m i n a t e t h e s i d e p o p u l a t i o n o f A549a n d H460l u n g c a n c e r c e l l sC A O B a o-s h a n1,J I A J u n2,R E N J u n2,M A B o2,L U Z h i-h a o2,D I L i-j u n2,S O N G G u o-h o n g2,F A N G J i a n2,M A L i-w e n1 1D e p a r t m e n t o f O n c o l o g y,P e k i n gU n i v e r s i t yT h i r dH o s p i t a l,B e i j i n g100083,C h i n a;2I n t e r n a l D e p a r t m e n t o f O n c o l o g y,B e i j i n gC a n c e r H o s p i t a l,P e k i n g U n i v e r s i t y S c h o o l o f O n c o l o g y,B e i j i n g100036,C h i n a.【A b s t r a c t】 O b j e c t i v e:T oe v a l u a t et h e e f f e c t s o f v e r a p a m i l o r r e s e r p i n e o ns i d ep o p u l a t i o n(S P)f r o m A549a n dH460a n de x p l o r e i t s m e c h a n i s m s.M e a n w h i l et oe v a l u a t e w h e t h e r C D133i s r e g a r d e da s as t e m c e l l m a r k e r o f l u n gc a n c e r.Me t h od s:S i de p o p u l a t i o n(S P)a n dn o n-s i d e p o p u l a t i o n(n o n-S P)c e l l sf r o m l u ng c a n c e r c e l l l i n e so fA549a n d H460w e r e s e p a r a t e d b y f l u o r e s c e n c e-a c t i v a t e d c e l l s o r t i n g(F A C S).V e r a p a m i l o r r e s e r p i n e w a s u s e dt oi n h i b i t e f f l u x o f H o e c h s t33342b y S Pc e l l s.R e v e r s e t r a n s c r i p t i o n-p o l y m e r a s ec h a i nr e a c t i o n(R T-P C R)w a s e m-p l o y e d t o a n a l y z e t h e e x p r e s s i o no f A B C G2,M D R1,C D133a n dG A P D H o f S Po r n o n-S Ps u b s e t f r o m A549a n dH460.R e s u l t s:R e s e r p i n e w a s m o r e e f f e c t i v e t h a n v e r a p a m i l i n i n h i b i t i n g e f f l u x o f H o e c h s t33342b y S Pc e l l s.A t l o w e rc o n c e n t r a t i o n,t h ei n h i b i t o r s w e r em o r ee f f e c t i v et h r o u g hp r e i n h i b i t i o nt h a nc o i n h i b i t i o n;A B C G2,M D R1a n dC D133w e r e o v e r e x p r e s s i v e i n S Pc e l l s o f b o t hA549a n dH460c o m p a r e dw i t hn o n-S Pc e l l s.C o n c l u s i o n:T h e i n h i b i t o r s o ft a r g e t i n g t h ef u n c t i o no f A B C G2w o u l db e e f f e c t i v e t o o v e r c o m e r e s i s t a n c et o c u r r e n t c h e m o t h e r a p e u t i c d r u g s.C D133m a y b e a n e wc a n c e r s t e mc e l l s u r f a c e m a r k e r o f l u n g c a n c e r.【K e y w o r d s】s i d e p o p u l a t i o n;A T P-b i n d i n g c a s s e t t e(A B C)t r a n s p o r t e r;C D133;r e s e r p i n e;v e r a p a m i lM o d e r n O n c o l o g y2009,17(01):0008-0012【摘要】 目的:探讨维拉帕米和利血平对肺癌细胞株A549和H460侧群细胞(s i d e p o p u l a t i o n,S P)的阻断差异机制及意义,探讨C D133作为肺癌干细胞表面分子标志的可行性。
方法:应用荧光激活细胞分选方法检测和分选A549和H460中的S P和非S P细胞。
分别应用维拉帕米、利血平作为S P细胞的阻断剂。
应用逆转录聚合酶链反应(R T-P C R)方法检测S P和非S P细胞内A B C G2、M D R-1、C D133的表达情况。
结果:在阻断A549和H460的S P细胞对H o e c h s t33342的外排方面,利血平的阻断效果更好。
阻断剂在低浓度加入并提前给药效果较好。
A549和H460的S P细胞中A B C G2、M D R-1均高表达。
C D133在A549和H460肺癌细胞株的S P内过表达。
结论:针对A B C G2编码蛋白的阻断剂或许可以更好的克服肺癌因A B C转运蛋白产生的S P细胞耐药。
C D133可能被用来作为肺癌干细胞的分子表面标志。
【关键词】侧群细胞;A B C转运蛋白;C D133;利血平;维拉帕米【中图分类号】R730.23;R734.2 【文献标识码】A 【文章编号】1672-4992-(2009)01-0008-05 肿瘤中存在少量具有自我更新和分化潜能的细胞,其在体内更容易导致肿瘤形成,这群细胞即为肿瘤干细胞[1]。
自从1996年G o o d e l l应用S P方法成功分离出造血干细胞以来[2],人们应用S P方法在多种肿瘤中分离出肿瘤干细胞[3]。
【收稿日期】 2008-05-09【修回日期】 2008-11-05【作者单位】 1北京大学第三医院肿瘤治疗中心化疗科,北京 1000832北京大学临床肿瘤学院内科,北京 100036【作者简介】 曹宝山(1976-),男,河北人,主治医师,博士研究生,主要从事肺癌的临床治疗与相关基础研究。
【通讯作者】 任军(1966-),男,内蒙古自治区人,教授,主任医师,博士生导师,主要从事转移复发乳腺癌、肺癌等实体瘤化疗;肝癌生物免疫治疗;干细胞移植以及肿瘤干细胞的基础与临床研究。
该群细胞高表达多种A T P结合盒(A T P-b i n d i n gc a s s e t t e, A B C)转运蛋白,从而导致肿瘤干细胞天然耐药[4]。
近期M a r i a等人应用S P方法,成功的从肺癌细胞株和肺癌组织中分离出S P细胞,并证实其富集了肺癌干细胞[5],其表达多种A B C转运蛋白,导致S P细胞对化疗药物更为抵抗,因此克服肺癌S P细胞耐药成为了肺癌治疗的一个重要问题。
钙离子阻断剂可以阻断S P细胞A B C转运蛋白的功能,因此成为解决肿瘤耐药的主要研究对象。
维拉帕米和利血平是S P分选方法最常用阻断剂。
其对S P细胞的阻断功能受S P细胞A B C转运蛋白表达的影响。
本实验通过应用流式细胞技术,检测A549和H460细胞的S P细胞比例,并分析了维拉帕米和利血平的阻断差异,进一步应用R T-P C R方法检测了常见A B C转运蛋白A B C G2和M D R-1的表达情况,探讨二者逆转肺癌耐药的可行性,并检测了S P细胞中C D133的表达,明确C D133作为肺癌干细胞分子标志的可行性。
·8·M O D E R NO N C O L O G Y,J a n.2009,V O I.17,N O.11 材料和方法1.1 试剂H o e c h s t 33342、碘化吡啶(P I )、利血平、维拉帕米、H E P E S 均为S i g m a -A l d r i c h 公司制剂。
0.5%T r y p s i n -E D T A(G i b c o10×)、T R I z o l 试剂、S u p e r S c r i p t T M I I 逆转录酶H B S S 缓冲盐均为I n v i t r o g e n -l i f e T e c h n o l o g y 公司制剂。